蛹虫草中虫草素探究进展

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1、蛹虫草中虫草素探究进展【摘要】本研究综述了蛹虫草中虫草素的药理作用、检测方法、培养技术及分离纯化工艺的研究进展。为蛹虫草与虫草素进一步研究、开发奠定了基础。�【关键词】蛹虫草；虫草素；药理作用；分离纯化�蛹虫草(Cordyeepsmilitaris)又称北虫草，属子囊菌亚门、麦角菌科、虫草属[1]。作为冬虫夏草(Cordyeepssinensis)替代品之一，其虫草素含量较冬虫夏草高约3～6倍[2]。虫草素(Cordycepin)是腺苷的类似物，分子量251，碱性，针状或片状结晶，熔点230℃～231℃，最大吸收波长为259．0nm[

2、3]。1951年，德国的Cunningham等[4]从蛹虫草的培养滤液中分离发现虫草素。目前虫草素的研究现正成为药物化学中一个极其活跃的领域。本研究就近年来用蛹虫草中虫草素的药理作用、检测方法、培养技术、提取方法等方面的有关研究进行综述。�1药理作用�1．1抗肿瘤9虫草素对鼠艾氏腹水癌、人鼻咽癌KB细胞、人表皮样疣、人宫颈癌Hela细胞、Lewis肺癌等具有明显的控制作用，对多种实体恶性肿瘤有很强的抑制作用[5]。因此，将其作为一种用途广泛的抗肿瘤新药来开发是未来趋势之一。�1．2抗菌抗病毒作用虫草素能抑制病毒的RNA合成，对HIV-

3、I型病毒有杀伤作用，对枯草杆菌[5]和鸟型结核杆菌[6]均有抑制作用。作为一种新型的广谱抗生素，以其特有的抗菌抗病毒活性，已引起全球科技发达国家的高度重视。�1．3免疫调节作用Zhou等[7]报道虫草素通过诱导产生白介素-1，同时抑制白介素-2的生成，表明其具有较强的免疫调节功能。虫草素对T淋巴细胞转化也有一定促进作用[8]。�1．4清除自由基机体内产生的自由基起主要作用的是SAFR和HFR，虫草素对SAFR具有较强的特异性清除作用，而虫草素和D-甘露醇等组分共同作用能有效的清除HFR[9]。�1．5其他作用虫草素还具对核多聚腺苷酸聚

4、合酶的抑制[10]、促进细胞分化[11]、重建细胞骨架[12]、抑制蛋白激酶活性[13]等多种作用。�2检测方法�2．1薄层层析法(TLC)雷帮星等[14]将待虫草素待测样品与标准品点于已活化的薄层板上(1lO℃活化0．5h9)，待溶剂挥干后，在展开剂(氧仿:乙酸乙酯:异丙醇:水=8:2:6:0．3)中展开。挥干展层剂，将其置紫外线分析仪上，254nm显色,计算标准品和样品中各点的相对迁移率Rf。�2．2高效液相色谱法(HPLC)张嘉等[15]以HPLC测定虫草素含量，其色谱条件：SymmetryC18(5um,4．6×150mm)色

5、谱柱，流动相：磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(ph=6．8，加1％四氢呋喃)，流速1．8ml／min，检测波长：260nm，进样量10ul，灵敏度1．000AUFS，室温。�3培养技术�目前虫草素的获得主要有两条途径：一是在蛹虫草子实体、菌丝体或发酵液中提取;二是人工化学合成。化学合成目前处于探索阶段，国外有报道虫草素能够人工合成，但过程复杂且产量极低[16],因此如何提高蛹虫草中虫草素的含量并实现虫草素的工业化生产,是目前国内外研究的主要方向。在培养过程中影响虫草素含量得主要因素有以下几个。�3．1培养方式近年来中国一些地方已实现蛹虫草

6、批量栽培。蛹虫草可以用蚕或蚕蛹为寄主来培养[17]也可以用大米为培养基来栽培[18,19]，后者是目前人工培育的主要方法。�3．2时间影响温鲁等[20]的研究报道随着培养时间延长，虫草素含量上升，培养40d时的虫草素含量最高，继续培养，虫草素又逐渐减少。由于从35d到40d仅有少量增加，故培养时间以35d为宜。� 93．3温度影响王菊凤[21]的研究发现在15℃左右菌丝体生长缓慢，在22℃左右生长最快，当温度达到25℃时，菌丝生长减速，温度能显著影响蛹虫草子实体虫草素的含量，当温度从17℃上升至25℃时，虫草素含量增加了近4倍。�3．

7、4PH值影响张红霞[22]认为不同的pH值对发酵液中的虫草素和腺苷含量具有一定的差异,在pH值4-9时，虫草素含量呈快速上升趋势，而在pH值9-10时呈下降趋势，其中pH值为9时发酵液中的虫草素含量为最高值。�3．5营养因子影响毛先兵[23]的研究报道最适培养基的碳源为葡萄糖42g/L，氮源蛋白胨15．8g/L时其最大虫草素产量可达到（345．4±8．5）mg/L。毛先兵[24]在对矿物质的影响进行了评估时,确认CaCl2和FeSO4•7H2O浓度最佳为0．097g/L和0．074g/L，虫草素产量提高到（215．1±6．

8、2）mg/L。�4虫草素的提取纯化�4．1虫草素的提取方法王英娟[25]以蛹虫草为材料采用超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法4种提取方法选择虫草素最优提取方法,用正交试验方法考察水热回流法中提取温度、提取