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1、目录摘要关键字1前言1.1DNJ简介1.2HPLC法简介1.3国内外研究动态1.4DNJ的作用和研究意义2材料与仪器2.1材料2.2设备和仪器2.3试剂3方法与步骤3.1桑叶样品的制备3.2DNJ标准液的配制3.3DNJ的衍生化3.4高效液相色谱测定3.5精密度实验3.6稳定性实验3.7重现性实验3.8回收率实验4结果4.1标样高效液相图谱4.2样品高效液相色谱4.3标准曲线的制备4.4精密度实验结果4.5稳定性实验结果4.6重现性实验结果4.7回收率实验结果5讨论6结论参考文献致谢应用HPLC测定桑叶中DNJ的含量学生：章珍亭指导老师：唐忠海讲师（湖南
2、农业大学东方科技学院长沙410128）摘要：本实验以桑叶为材料，以0.05mol/LHCl为溶剂提取桑叶中的1-脱氧野尻霉素，并用芴基氯甲酸甲酯（FMOC-Cl）为衍化剂，在PH8.5的硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应，生成具有紫外吸收的DNJ-FMOC的络合物，再用高效液相色谱-紫外检测法对其分离测定。通过精密度，稳定性，重复性试验，回收率来确定桑叶中DNJ的含量。结果表明,反应产物的色谱图分离效果良好DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系,加样回收率平均为101.4%。精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验表明,该方法稳定可靠,可以
3、作为测定桑叶中DNJ含量的有效方法。关键词：高效液相色谱；1-脱氧野尻霉素；精密度；稳定性；重复性；回收率DeterminationofDNJinMorusalbaL.leavesbyHPLCStudent:ZhangZhentingTutor:TangZhonghai(OrientScienceandTechnologyCollegeofHnnanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China)Abstract:Inthisexperiment,1-deoxynojirimycin(DNJ)inthemulber
4、ryleafpowderwasextractedwith0.05mol/LHCl,thenitwasderivedbyfluorenylmethyl(FMOC)inpH8.5boratebuffersolution.DNJ-FMOCcameintobeingcomplexcompound,whichcanbedetectedbyultraviolet,WeseparatedanddetecteditbyUV-HPLC.Theresultindicatedthattheproductwasseparatedentirely.Therearethemostp
5、ositiverelevancebetweenthepeakareaofDNJ-FMOCandtheconcentrationofDNJ.Theaveragerecoveryratioofaddingsampleis101.4%.Theprecisionexperiment,stabilityexperiment,repeatabilityexperimentandrecoveryrateexperimentshowedthatthemethodiscredible,soitcanbeusedasanefficientmethodtodetectDNJc
6、ontentinthemulberry.Keywords:HighPerformanceLiquidChromatography;1-Deoxynojirimycin；precision;Stability;repeatability;recoveryrate1前言:1.1DNJ简介DNJ(1-脱氧野尻霉素)是一种哌啶生物碱，其化学名称是3,4,5-三羟基-2-羟甲基四氢吡啶[2]。是1-Deoxynojirimycin的缩写[3]。分子式是C6H13NO4，分子量为163[4]。现代药理研究表明，桑叶中的多羟基生物碱类成分具有显著的降血糖作用，其中1-
7、脱氧野尻霉素(1-deoxynojirmycin,DNJ)是最有潜力的一种糖苷酶抑制剂[5]，通过抑制酶分解淀粉和糖，并阻止葡萄糖的吸收，从而降低血糖水平[6,7]。野尻霉素(nojirimycin)首先由Inoue等作为抗生素从链霉菌中得到的，DNJ是由野尻霉素氢化得到的。DNJ的来源有两大类：植物来源和微生物来源。植物来源包括桑叶及桑根皮，野砣草(Commelinacommunis),风信子(Hyacinthusorientalis)，沙参属植物(Adenophoratriphyllavar.japonia)，爵床科植物(Jacobiniasuber
8、ecta)。微生物来源包括浅紫灰链霉菌GC-148(StreptomycesLa
