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时间:2018-07-09
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1、现场样品采集、保存和运输 在现场调查中,很重要的—项工作是正确采集、妥善保存、和尽快送检样品,以及随后对样品检测结果进行正确的判读和分析。 (一)样品采集的目的、作用和原则 现场调查的目的主要可分为两大类:一是查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因,二是进行卫生质量监测和评价。应该遵循如下总原则: 1.注意生物安全:需要采取的具体措施包括如下两方面:①个人防护:采样时要戴手套,接触不同患者时不能重复使用一副手套,以免交叉感染,并注意手套是否有小的破损;采样中尽可能穿防护服;采样后消毒要穿戴防护服和厚橡胶手套,对污染区表面和溢出物进行消毒;如
2、怀疑有高度传染力的病原,需使用护目镜、呼吸面罩等;为了防止意外,确保安全,采样应备有急救包。②恰当处理污染废弃物:污染的可废弃设备和材料应先消毒后废弃;用过的针头妥善收集消毒,并按规定销毁或损毁;在暴发疫点使用过的防护服、设备、材料等使用化学消毒剂消毒后再清洗,特殊情况也可在现场建简易焚烧炉焚烧。 2.注意采样的代表性或针对性:以卫生质量评价为目的的样品采集,影响采样代表性的因素包括采样量、采样部位、采样时间、采样的随机性和均匀性,以及按批号抽样。以查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因为目的的样品采集,不要求样品的代表性,强调针对性,尽可能采集
3、病原微生物含量最多的部位和足够检测用的样本。 3.注意采样时间和种类:以分离培养细菌为目的,则应尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本,如果已使用抗生素,采样和分离培养最好加入相应的中和剂(中和样品中残存的抑菌物质)或进行其他处理。作病毒分离和病毒抗原检测的标本,应在发病初期和急性期采样,最好在发病1~2天内采取。 4.注意避免采样引入新的污染或者对微生物的杀灭因子:所有采样用具、容器需严格灭菌,并以无菌操作采样。对微生物样品,应避免采样时对微生物的杀灭作用和引入新的抑菌物质,如容器是否有消毒剂的残留,或使用刚烧灼未冷却的采样工具。 5.注意
4、对样品的详细标记:用于卫生质量评价的样品,应标明样品名称、编号、采样时间、采样量、采样者、检测项目等。 (二)样品采集的方法和注意事项 1.用于微生物分离培养或抗原检测的生物性样品 (1)咽拭子、洗漱液或痰液标本: ①咽拭子的采集:让患者仰头张口,用压舌板压舌,用无菌棉拭子在咽部涂抹数次后,放入含2mlHank液的试管中,棉拭子接触手的部分应及时折断或剪断去掉,然后盖紧试管。 ②洗漱液的采集:用生理盐水或自配淡盐水约15ml作为洗漱液,让患者咳嗽后,倒入灭菌生理盐水或自配淡盐水约15ml,反复洗漱咽部1分钟,直接将洗漱液吐入灭菌容器内。
5、 ③痰液标本:肺部感染应采取痰标本,以清晨第一口痰为最佳。采取标本的时间一般在发病的第一日采集,最迟不得超过3日,最好选择体温在38℃以上时采集。 (2)粪便标本:对黏液脓血便应挑取黏液或脓血部分,液状粪便采集水样便或含絮状物的液状粪便2~5ml;成形粪便至少取蚕豆大小粪便1块(约5g)放于灭菌容器内,最好加有保存液或增菌液。若无法获得粪便时,可用保存液或增菌液湿润过的棉拭子插入肛门4~5cm深处(小儿2~3cm)轻轻转动一圈,取直肠表面的黏液后取出,盛入运送培养基或保存液中送检,为保证多个检验项目的开展,同一患者应至少采集2支肛拭。运送时间不得
6、超过2小时,否则应保存在4~8℃条件下送检。 (3)血液标本:作血液病原培养时,严格无菌采静脉血,一般成人采血10~15ml,儿童2~5ml,婴儿0.5~2ml,放入无菌的加入抗凝剂的有螺口容器或培养瓶(见下图)中送检。作血片、暗视野检查可采耳垂血或指尖血。 (4)尿液标本:主要采用中段尿采集法,先用肥皂水清洗外阴部,再以无菌水洗净,一般取首次晨尿的中段尿10~20ml于无菌容器内。结核分枝杆菌集菌检查时,以一清洁容器留取24小时尿,取沉渣10~15ml送检。最好在2~3小时内送到实验室检测,否则应在4~8℃条件下保存运送样品。 (5)脑脊
7、液:在无菌条件下由腰椎穿刺抽取3~5ml,放于无菌试管或厌氧瓶内。用于细菌培养时标本采集后应立即送检;用于病毒培养时在4~8℃最多可维持48小时,否则需在-70℃保存。 (6)皮肤标本:如怀疑皮肤炭疽或淋巴腺鼠疫时可从病变皮肤取样做细菌学培养。出现囊疱疹或脓疱疹时可直接从囊疱或脓疱采集液体用于镜检或培养。 (7)尸体标本:如需要采血则需进行心脏穿刺。采脑组织样本时,如不开颅,可用穿刺长针由鼻孔插入,一直刺到脑干和间脑部位吸出脑组织少许。剖检森林脑炎尸体时,可采取丘脑和小脑部分,其他型别脑炎可采海马回部位的脑组织块。如取脏器组织,先用灼热的金属压舌
8、板接触一下采样部位,瞬时烙焦表面,清除杂菌,用剪刀剪取深部组织块。供分离病毒的组织要在死后5小时内取样。尸体
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