不同产地黄芪中山柰素的含量分析及hplc测定

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1、不同产地黄芪中山柰素的含量分析及HPLC测定【摘要】目的：建立测定黄芪中黄酮类成分山柰素的HPLC方法，并对不同产地黄芪中山柰素的含量进行分析。方法：YWG-C18色谱柱（4.6mm×250mm，10μm），甲醇与0.4%磷酸水溶液（70：30）溶剂洗脱，检测波长375nm，柱温30℃，流速1.0ml.min-1，进样量20μl。结果：山柰素的回归方程：Y=1730.75838X±1.3279795，r=0.9998。平均回收率99.6%（n=5）。结论：不同产地黄芪中山柰素含量相差很大，本方法专属性强，重现性好，可对黄芪药材的质量控制提供依据。【关键词】黄芪；山

2、柰素；HPLCHPLCMethodtoMeasuretheKaempferolinRadixAstragaliandtheAnalyzedofContentinDifferentPlazesBAIXue-mei，TIANJia-ming，WANGDe-bao，etalHebeiNorthUniversity，Zhangjiakou，075000，China【ABSTRACT】Objective:TodevelopaHPLCmethodtomeasuretheKaempferolofflavonoidscompositioninRadixastragaliandan

3、alyzetheKaempferolquantitycontainedinRadixastragaligrownindifferentplazes.Methods:YWG-C18column(4.6mm×250mm，10μm),usethesolutionofMeOHand0.4%H3PO4solvent(70：30)toseparate,themeasuringwavelengthis375nm,thetempratureofcolumnis30℃,andtheflowingspeedis1.0ml.min-1,injectedis2μl

4、.Results:TheregressionequationofKaempferol:Y=1730.75838X±1.3279795，r=0.9998.Theaverageretrievingratesare99.6%.Conclusion:TherearedifferentplazesoftheirKaempferolquantitycontained.Thismethodisgoodatitsspecializationandgoodrestoration.Itcanprovidescientificreferencetocentrollingthequali

5、tyofRadixastragali.【KEYWORDS】radix；astragalikaempferol；HPLC黄芪（RadixAstragali）是多年生草本豆科植物蒙古黄芪［Astragalusmembranaceus(Fisch)Bge.varmongholicus(Bge.)Hsicao］或膜荚黄芪［Astragalusmembranaceus(Fisch)Bge.］的干燥根。黄芪中含皂甙类、黄酮类、多糖类等多种有效成分，黄芪总黄酮有抗心肌缺血作用［1］。目前，文献报道对黄芪皂甙类成分的含量测定方法较多，如薄层法，HPLC法等，黄酮类的HPLC法只限

6、于芒柄花黄素，毛蕊异黄酮［2］，对其他黄酮类成分如山柰素的含量测定未见报道。山柰素是黄芪中黄酮类有效成分中重要组分之一，本文建立了测定黄芪药材中山柰素含量的HPLC法，并对不同产地黄芪中山柰素的含量进行分析。1仪器和试剂1.1仪器Agilent1100高效液相色谱仪，包括四元泵，在线脱气机，柱温箱，VWD检测器，化学工作站（chimstationsystem）；索式提取器；紫外可见光分光光度计。1.2试剂甲醇（色谱级），山柰素标准品（中国药品生物制品检定所）。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：YWG-C18（4.6mm×250mm，10μm），流

7、动相：甲醇与0.4%磷酸水溶液（70：30）,检测波长：375nm,流速：1.0ml.min-1,进样量：20μl。2.2供试液与标准液制备2.2.1供试液制备精密称取张家口、内蒙、甘肃三产地已粉碎的黄芪细粉1.0g，分别置索式提取器中加入100ml甲醇提取完全，提取液减压浓缩至干，以30ml甲醇溶解，加5ml25%盐酸水浴回流1h，水解液以甲醇定容至50ml，制得供试液。进样前过0.45μm滤膜。2.2.2山奈素标准液制备精密称取山柰素标准品1mg置25ml容量瓶中，用甲醇溶解，定容至刻度即得。2.3方法学考察2.3.1标准曲线将山奈素标准液用甲醇作

8、5个不同浓