卵巢上皮性癌中酪氨酸激酶受体b的表达及意义

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1、卵巢上皮性癌中酪氨酸激酶受体B的表达及意义作者：粟连秀,黎勇明,陈红秋单位：广西贵港市人民医院,广西医科大学第八附属医院,广西?贵港【摘要】目的:研究酪氨酸激酶受体B(TrkB)在卵巢上皮性癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法对10例正常卵巢组织、17例卵巢良性上皮性肿瘤组织、21例卵巢交界性上皮性肿瘤组织、60例卵巢上皮性癌进行TrkB检测。结果TrkB在卵巢上皮性癌中的阳性率与正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤及交界性卵巢肿瘤相比差异均有显著性(P<0.05)。在卵巢上皮性癌中，TrkB的表达与肿瘤的

2、临床分期、组织的分化程度及有无淋巴结转移有关，临床分期越晚、组织分化越差，TrkB表达越高，有淋巴结转移组的表达率高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论TrkB在卵巢上皮性癌的发生发展中起着重要作用。【关键词】卵巢肿瘤;癌，原位;TrkB;免疫组织化学　卵巢癌是女性生殖器官的三大恶性肿瘤之一，其发病率仅次于宫颈癌和子宫内膜癌，其病死率居各类妇科肿瘤的首位[1]。卵巢上皮性癌发生、发展的机制尚不完全清楚。研究表明[2，3]，酪氨酸激酶受体B(tyrosinekinasereceptorsB，TrkB)可促进细胞增殖，并可

3、促进肿瘤细胞的浸润和转移。我们采用免疫组织化学的方法检测TrkB在卵巢上皮性癌中的表达，探讨其表达与卵巢上皮性癌的发生及其与各临床病理因素间的关系。　　1资料和方法　　1.1一般资料收集我院病理科2000年3月～2008年11月手术切除的存档蜡块，其中正常卵巢组织10例，卵巢良性上皮性肿瘤17例(其中浆液性囊腺瘤10例，黏液性囊腺瘤7例)，交界性卵巢上皮性肿瘤21例(其中交界性浆液性囊腺瘤14例，交界性黏液性囊腺瘤7例)，卵巢上皮性癌60例。卵巢上皮性癌患者年龄35～74岁，平均47岁。按FIGO2000年标准分期：Ⅰ期16例

4、，Ⅱ期6例，Ⅲ期30例，Ⅳ期8例;组织学分级：高分化15例，中分化13例，低分化32例;组织学类型：浆液性癌33例，黏液性癌15例，透明细胞癌7例，子宫内膜样癌5例。所有患者术前均未接受任何放、化疗。所有标本均经病理证实。　　1.2主要试剂兔抗人TrkB多克隆抗体购自上海太阳生物技术公司。即用型快捷免疫组化MaxVisionTM试剂盒及DAB显色剂均为福州迈新生物技术公司产品。　　1.3方法采用快捷免疫组织化学MaxVisionTM法。严格按照产品的操作说明操作。具体染色步骤：①石蜡切片脱蜡和水化后，用PBS(pH7.4)冲洗

5、3次，每次3min。②高温高压抗原修复。③3%H2O2室温下孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3次，每次3min，除去PBS液。④分别滴加TrkB一抗工作液，室温下孵育60min。⑤PBS冲洗3次，每次5min，除去PBS液，每张切片加1滴即用型MaxVisionTM试剂，室温下孵育15min。PBS冲洗3次，每次3min。⑥除去PBS液，每张切片加2滴新鲜配制的DAB溶液，显微镜下观察5min。⑦自来水冲洗，苏木素复染，自来水冲洗返蓝，梯度酒精脱水干燥，中性树胶封固。用试剂公司提供的TrkB阳性的组织切

6、片做阳性对照，以PBS代替-抗做阴性对照。　　1.4结果判断TrkB免疫染色阳性物质呈黄-棕黄色颗粒，TrkB在胞浆与胞膜均着色，结果评分采用双盲法(两名病理医生独立阅片)，在10×40倍光镜下随机选取5个视野，每个视野计数100个细胞，以阳性细胞的百分数及染色强度来判定[4]：①无阳性细胞染色为0分;1分(阳性细胞占1%～10%);2分(阳性细胞>10%～50%);3分(阳性细胞>50%～75%);4分(阳性细胞>75%～100%)。②以阳性细胞染色强弱：细胞染色强度分为0分(阴性)，1分(弱，

7、淡黄色)，2分(中，棕黄色)，3分(强，棕褐色)。两项的乘积≥2分定为阳性，0～1分为阴性。　　1.5统计学分析用SPSS13.0统计软件包进行分析，各组之间率的比较采用χ2检验及四格表确切概率法检验，P<0.05表示差异有显著性。　　2结果　　2.1TrkB表达情况在正常卵巢组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织、卵巢交界性上皮性肿瘤组织和卵巢上皮性癌中，TrkB阳性率分别为0%、0%、19.05%(4/21)和71.67%(43/60)。TrkB在卵巢癌组中的阳性率与交界性肿瘤组、正常卵巢组和良性肿瘤组相比，差异

8、均有高度显著性(χ2分别为17.68、15.68、27.59，P<0.01);交界性肿瘤组与正常卵巢组和良性肿瘤组相比差异无显著性(χ2分别为0.28、0.11，P>0.05);而正常卵巢组与良性肿瘤组织未见TrkB的表达(P>0.05)。