1672例血液样本rpr法及tp-elisa法检测结果研究

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1、1672例血液样本RPR法及TP-ELISA法检测结果研究【摘要】目的:使用ELISA法及RPR法检测梅毒,评价两种梅毒检测方法在血液筛查中降低漏检率,保证血液质量的应用效果。方法:1672例献血者的血液样本同时采用ELISA及RPR两种方法检测献血者标本中的梅毒指标结果检测的1672份样本中,RPR阳性10份,TP-ELISA证实阳性9份,排除生物假阳性1份。结论RPR法梅毒筛查有生物假阳性,ELISA法更适合献血者血液筛查为RPR阳性的样本,用敏感性高、特异性强的TP-ELISA进行检测,防止实验室梅毒检测的漏检。【关键词】血液样本;RPR;TP-ELISA;检测【中图分类号

2、】R454【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2011)07-0150-01新疆博州中心血站2007年1-3季度,对1672名无偿献血者血液进行检验,其中梅毒检测采用非梅毒螺旋体抗原试验(RPR)及梅毒螺旋体抗体试验(TP-ELISA)。现将检测结果报告如下:1材料与方法1.1样本来源博州中心血站2007年1-3季度健康体检合格的1672位无偿献血者的血液样本。51.2检测试剂RPR筛查试剂和TP-ELISA检测试剂,均由上海科华生物工程股份有限公司提供。梅毒质控血清由卫生部临检中心提供,均在有效期内。1.3检测仪器IMarK酶标仪、BIO-RAD1575洗板机、孵育

3、器、旋转仪。1.4检测原理1.4.1RPR原理是梅毒患者血清中存在着能与VDRL抗原发生凝集反应的反应素,用吸附于活性炭颗粒表面的VDRL抗原,检测血清中的反应素,是否发生凝集反应来判断有无梅毒感染。1.4.2ELISA原理是以基因重组梅毒螺旋体抗原包被酶联反应板孔内。待检血清中的抗TP抗体与包被的TP抗原和辣根过氧化物酶标记的TP抗原结合,形成包被抗原-抗体-酶标抗原复合物,加底物(TMB)显色。1.5检测方法对血液样本同时用两种检测方法检测,每板均设阴、阳性对照及卫生部临床检测中心发放的质控血清,严格按照使用说明书。1.6结果判断1.6.1RPR结果判断纸卡圆圈中出现凝集反应

4、为阳性,无凝集反应为阴性。1.6.2ELISA结果判断样本OD值≥cut-off(CO)为阳性,否则为阴性。CO=0.2+阴性对照平均OD值,如果阴性对照均值<0.05,则按0.05计算。52结果1672名血液样本非梅毒螺旋体特异性试验(RPR)阳性10例,梅毒螺旋体特异性抗体试验(TP-ELISA)阳性9例,排除生物假阳性1例。被证实的9例梅毒感染者,其中,男性5人,女性4人,平均年龄41岁。见表13讨论3.1梅毒属于一种性传播疾病,主要通过性接触直接传染,接吻、手术、哺乳、输血、接触污染物也可被传染,母婴也可垂直传播。梅毒螺旋体感染机体可产生两种抗体,一种是抗心磷脂抗体既所谓

5、反应素(非特异性抗体),另一种是抗梅毒螺旋体抗体(特异性抗体)。梅毒血清学检测根据使用抗原不同可分为,非梅毒螺旋体抗原试验和梅毒螺旋体抗原试验两大类。3.2RPR是非梅毒螺旋体抗原试验的一种方法,为非特异性血清学实验,常出现生物学假阳性或假阴性结果,且手工操作,结果易于判断目测判断结果,因操作简单不需要仪器设备,适用于样本量较少的实验室梅毒筛查。已逐渐不适应血站工作的发展需要,RPR也可用于评价抗梅毒治疗的效果,接受治疗的梅毒病人,一般情况下,患者的RPR血清学定量试验表现为滴度随治疗进程逐渐下降。53.3TP-ELISA是梅毒螺旋体特异性抗体试验,由于其特异性强、敏感性高,结果

6、便于保存,目前被列为梅毒证实试验的一种新方法。血站已开始广泛采用。一旦本试验结果出现阳性,将伴随终生。治愈的梅毒患者,本试验仍可为阳性。该试验需要仪器设备,适用于实验室大批量的梅毒血清学检测。用于筛查试验可提高梅毒感染的检出率,但不能用来判断抗梅毒治疗效果及判愈,也不能判断其传染性。3.4献血人员梅毒监测,主要靠实验室血清学检测,其目的是防止造成血液传播。因此,用非梅毒螺旋抗原试验(RPR)筛查出的阳性样本,一旦被梅毒螺旋体抗体试验(TP-ELISA)阳性,如果RPR血清学滴度定量高,说明传染性强,RPR血清学滴度定量低,说明传染性弱。否则,用梅毒螺旋体抗原试验(TP-ELISA

7、)进行梅毒筛查,检出的阳性样本,建议用非梅毒螺旋体抗原试验(RPR)进行血清学定性和滴度定量检测,如果RPR定性阴性或滴度定量较低,一般说明无传染性或传染性较弱。所以,临床使用两类试验结合,可取长补短,减少梅毒的漏检或误诊。3.5综上所述,从以上检测结果表明,59例梅毒感染者,RPR血清学滴度定量有2例为1:16,说明这2例梅毒感染者传染性强,其余7例RPR血清学滴度定量均在1:4以下,一般说明传染性弱。RPR滴度的高低,与检测的抗心磷脂抗体既所谓反应素含量相关,反应素含量高,则

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