黄褐毛忍冬质量标准研究

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1、黄褐毛忍冬质量标准研究林廷龙,葛渝,刘志海,范红梅,邵红弱【摘要】  目的对黄褐毛忍冬进行鉴别、浸出物、含量测定特征研究,提高黄褐毛忍冬质量控制标准。方法采用薄层色谱法对黄褐毛忍冬中的绿原酸、咖啡酸进行鉴别;采用50%乙醇作溶剂,热浸法测定黄褐毛忍冬浸出物含量;以50%甲醇作溶剂,超声处理30min制备样品溶液,采用高效液相色谱(HPLC)法,选用Luna〔5μm,C18(2),250mm×4.6mm〕色谱柱,体积流量1.0ml/min,柱温30℃,检测波长327nm,流动相为乙腈-0.4%磷酸(13:87)测定黄褐毛忍冬中绿原酸含量。结果采用薄层色谱法有效鉴别黄褐毛忍冬中

2、的绿原酸、咖啡酸;采用50%乙醇热浸能控制黄褐毛忍冬浸出物含量;HPLC法测定黄褐毛忍冬中绿原酸含量,绿原酸在10.49~125.9μg/ml范围内呈良好线性,R2=0.9999,通过方法学考察,精密度、稳定性、重复性、回收率实验、耐用性实验RSD值均小于2.0%。结论建立了黄褐毛忍冬鉴别、浸出物、含量测定方法,能有效用于黄褐毛忍冬质量控制,为黄褐毛忍冬质量标准提高提供实验依据。【关键词】黄褐毛忍冬;绿原酸;鉴别;浸出物;高效液相色  Abstract:ObjectiveToimprovethequalitycontrolstandardofLonicerafulvotom

3、entosabymeanofstudyontheidentifyingcharacterandsoakingscharacterandcontentsdeterminingcharacterofLonicerafulvotomentosa.Methods1)IdentifyingthechlorogenicacidandcoffeeacidinLonicerafulvotomentosabythinlayerchromatography;2)DeterminingtheextractcontentsofLonicerafulvotomentosainingthechloro

4、genicacidcontentsinLonicerafulvotomentosainutestreatedbyultrasonictothesamples,chromatographiccolumnLuna(5μm,C18(2),250mm×4.6mm),thevolumeflol/min,thecolumntemperature,identifyingandthemobilephaseatographycouldidentifythechlorogenicacidandcoffeeacidinLonicerafulvotomentosaeffectively;2)The

5、hotsoakingentosa;3)BE),电热恒温水浴锅(HH.SY11-Ni),高效液相色谱仪(BE),电热恒温水浴锅(HH.SY11-Ni),绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所110753-200413)、咖啡酸对照品、甲醇(色谱纯),乙腈(色谱纯),磷酸(分析纯),娃哈哈纯净水。其余试剂为分析纯。黄褐毛忍冬样品由贵州飞龙雨公司提供。  2方法与结果  2.1黄褐毛忍冬绿原酸、咖啡酸成分〔6〕  鉴别研究取黄褐毛忍冬粉末0.2g,加甲醇5ml放置12h,滤过,滤液作为供试品溶液。另取绿原酸、咖啡酸对照品分别加甲醇制成每毫升含1mg的溶液作为对照品溶液,照薄层色谱法

6、试验〔3〕,吸取两种溶液各10μl,分别点于同一聚酰胺薄膜薄层板上,以乙酸丁酯-甲酸-水(7:2.5:2.5)的上层溶液为展开剂,展开,取出晾干,置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点(图1)。  2.2黄褐毛忍冬浸出物含量  研究考虑黄褐毛忍冬的药用方法和制剂提取的常规方法,参考《中国药典》2005版Ⅰ部附录ⅩA浸出物的测定方法,考察了水、50%乙醇、75%乙醇、95%乙醇4种溶剂的冷浸、热浸两种方法。测定10批样品,测定结果受两组变量A(浸出方法)、B(浸出溶剂)的影响,将浸出物含量、浸出方法、浸出溶剂应用SPSS统

7、计软件进行方差分析。结果显示,应用水、50%乙醇、75%乙醇热浸,P=0.264>0.05,结果无显著性差异,考虑各种因素,采用50%乙醇作溶剂,热浸法测定黄褐毛忍冬浸出物含量。  2.3黄褐毛忍冬中绿原酸含量测定〔7〕研究  2.3.1色谱条件  色谱系统由,C18(2),250mm×4.6mm〕,流动相为乙腈-0.4%磷酸(13∶87),检测波长327nm,柱温30℃,流速1ml/min。测定方法:分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5~10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。  2.3.2对照品溶液的制备  取

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