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时间:2018-07-08
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1、丹参三七组方配比优选及信息综合评价商洪才*高秀梅郭利平张萌潘桂湘张伯礼(天津中医学院中医药研究中心,300193,天津)摘要:配伍配比是方剂的核心与灵魂所在,是中医药的特色和优势,它既不是简单的药物作用在数量上的相加,也不是机械的毒副反应的抵消,而是在辨证立法基础上,以法统方,立方遣药,有序组合而成的有制之师。本研究以复方丹参方中的丹参、三七为对象,采用整体动物模型和离体细胞模型,对二者的配伍配比进行了优选研究,并利用数学方法对实验所得生物信息进行综合评价,得到适宜配比,为中成药的二次开发建立了一种新模式。关键词:丹参三七配比优选信息综合评价
2、中图分类号:复方丹参方是经三十多年临床实践检验过的有效方剂,方中丹参为君,三七为臣,冰片为佐使。丹参和三七发挥了主要药效作用,而且两味药的临床和实验研究均具备了较深厚的基础,但目前的研究工作尚不足以解释治疗机制,其深层次的作用机理研究更少,二者的配比优选研究也未见报道,处方中的配比拟定没有科学的数据支撑,仅凭经验的积累。丹参和三七的主要药理作用是趋向一致,还是靶点各异?丹参、三七是否有一最佳配比,最佳配比剂量是否即为药典所述?中药的最佳配比仅是一个点,还是一个阈值(范围)?为阐明本研究的核心问题,建立了基线等比增减设计方法【1】,采用整体和细
3、胞两个层次的模型,着眼于全成分,结合药化分析,对丹参/三七的不同比例:10/0、10/1、10/3、10/6、10/10、1/10、0/10进行了多效应的药效学比较研究,同时开展了对高维数小样本多效应生物信息综合评价方法的研究,分述如下:1丹参三七配比优选研究1.1整体实验部分方法:在经典模型上加以改造,应用犬冠状动脉左前降支结扎法造成急性心肌缺血模型,并与血流动力学模型有机结合,着眼于全方组分、整体动物、多效应指标动态观察,对丹参/三七的不同比例:10/0、10/1、10/3、10/6、10/10、1/10、0/10进行了多效应比较药效学研
4、究。效应评价指标涉及到心外膜心电图(Σ-ST、N-ST)、心肌组织缺血区范围、心肌生化标志物(cTnI、CK-MB6)、冠脉血流量、心肌耗氧量、血流动力学、一氧化氮、内皮素、自由基等。结果:1.1.1丹参三七不同配比对模型犬心电及心肌组织染色的影响【2】以丹参为主的四个药对比例组,即10/6、10/3、10/1、10/0,有明显改善犬心肌缺血的作用,减轻由心外膜心电图所标测的心肌缺血程度,减少通过TTC染色所显示的缺血区。其中尤以10/6、10/3两组作用突出。1.1.2丹参三七不同配比对模型犬心肌生化标志物的影响【3】以丹参为主的药对比例组
5、对心肌钙蛋白的增高有明显的抑制作用,反映了丹参对心血管的直接作用强于三七。这与心外膜心电图、心肌染色所反映的结果基本一致。1.1.3丹参三七不同配比对模型犬冠脉循环指标的影响在对冠脉血流量有效增加的各组中,以丹参为主的药组(10/0、10/3、10/6)作用较强。消心痛组在给药后30min即发挥作用,但很快减弱;而中药组(10/0、10/3、10/6)作用平稳而持久、稳中有升,远后效应明显。1.1.4丹参三七不同配比对模型犬血流动力学的影响给药后,各中药比例组均表现出一定的作用;综合而言,10/6、10/3两组可以明显改善左室收缩及舒张功能,
6、增加心输出量及心脏指数,减少血管总外周阻力,而左室做功没有明显增加,心率、平均动脉压的波动较小。1.1.5丹参三七不同配比对模型犬内皮素、一氧化氮及自由基的影响0/10组(单纯三七)既促进NO的释放、保护SOD活性,又降低ET含量、减少MDA的产生,表现出较强的生物效应。1.1.6丹参三七不同配比对正常家兔血浆血小板聚集性、粘附性的影响【4】对正常家兔血浆血小板聚集性和粘附性的的抑制,丹参∶三七最佳配伍不同,前者为10∶3、后者为0∶10。而10∶3抗聚集最佳,粘附抑制率排列第三,0∶10,也就是单纯三七抗聚集最差,二者兼顾最佳配伍应为10∶
7、3。1.2细胞实验部分【5】方法:在正常、缺氧两种培养条件下,观察丹参、三七7种不同比例对心脏微血管内皮细胞MTT、NO、ET、LDH的影响。结果:61.2.1丹参三七不同配比对正常培养心脏微血管内皮细胞的影响正常培养条件下,丹参、三七各配比组均可降低CMEC的LDH水平(均P<0.01);对于CMEC释放NO和分泌ET都有降低趋势,但无统计学意义;然而在提高细胞活力方面,单纯丹参组(10∶0组)具有显著差异,较其它组为优,从趋势来看,单纯三七组(0∶10组)无效,10∶1~10∶10均有效,但随着丹参量的减少和三七量的加大,其效果逐渐减弱。
8、1.2.2丹参三七不同配比对缺氧损伤心脏微血管内皮细胞的影响在缺O2损伤作用下,各配比组均可显著降低CMEC释放LDH活性(均P<0.01);除10∶6组外,各配比
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