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时间:2018-07-08
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1、氧化锆全瓷材料生物安全性评价论文杨洪涛吕隆鲲刘晓敏【摘要】目的评估氧化锆全瓷材料组织相容性及生物安全性。方法用氧化锆全瓷材料试件的浸提液分别进行四氮唑盐比色法(MTT)体外细胞毒性试验和溶血试验。结果氧化锆全瓷材料组织相容性的细胞毒性评分小于I级,溶血率为2.16%(P0.05),无急性毒性反应,无溶血反应。结论氧化锆全瓷材料具有良好的组织相容性及生物安全性,作为种植体基台材料具有极高的临床应用价值及发展前景。【关键词】氧化锆口腔种植溶血实验【Abstract】ObjectiveToevaluatethehistopatibilityandbiological
2、safetyofzirconiaceramicmaterials.MethordsUsingtheleachliquorofzirconiaceramicmaterialsspecimenstoconducttheexternalcytotoxicitytestandthehemolysistestseparately.ResultsThescoreofhistopatibilitycytotoxicityofZirconiaceramicmaterialsislessthanlevelI.Hemolysisrateis2.16%(P0.05).Thereis
3、noacutetoxicityreactionandnohaemolyticreaction.ConclusionsZirconiaceramicmaterialshavegoodhistopatibilityandbiologicalsafety,andhavehighvalueofclinicalapplicationanddevelopmentprospecttobedrillbaseofimplants.【Keyplantologyhemolysistest牙种植修复技术作为牙列缺损﹑缺失修复的主要方法之一,目前广泛应用于临床。牙种植体基台作为种植义齿
4、露在粘膜外的部分,起着将种植体与上部结构连接在一起的作用。其材料的好坏直接影响种植修复的结果。近年来,国内外有大量的学者对氧化锆陶瓷材料作为种植牙基台材料进行研究.freell介质的比例,放入小牛血中;以5g材料/10ml介质的比例,放入生理盐水中,分别制备成氧化锆陶瓷材料小牛血清浸提液和生理盐水浸提液,过滤除菌,4℃冰箱保存备用。1.2细胞毒性试验1.2.1实验方法采用L929细胞(青岛大学遗传实验室馈赠)经复苏、传代后,将细胞培养基配制1×104个/ml细胞悬液分注于96孔塑料培养皿中,每孔100μl,每组每观察期至少8孔,细胞培养箱内培养24h。然后弃去
5、原培养基,用PBS洗涤2次,试验组加入100μl小牛血清浸提液,阴性对照组加入100μl小牛血清,阳性对照组加入64g/L苯酚溶液,培养2、4d和7d。弃去培养皿中的浸提液和培养基,加入20μl/孔的MTT液,继续培养6h,吸去原液,加入150μl/孔二甲亚砜,振荡10min,在BECKMANDU640紫外分光光度计以500nm波长测定吸光度OD值,并计算细胞的相对增殖度(RGR)。RGR=(试验组OD值-空白OD值)/(阴性对照组OD值-空白OD值)。1.2.2细胞毒性分级与判定RGR≥100%评为0级;RGR在75%~99%之间评为I级;RGR在50%~7
6、4%之间评为II级;RGR在25%~49%之间评为Ⅲ级;RGR在1%~24%之间评为Ⅳ级;RGR为0时评为V级)。实验结果为1或0级反应为合格,实验结果为Ⅱ级反应时需结合细胞形态综合评价,实验结果为Ⅲ~V级反应为不合格。1.3溶血试验1.3.1制备新鲜稀释血抽取20ml新鲜兔全血中加入lml2%(20g/L)草酸钾生理盐水溶液,调整生理盐水用量,使稀释后的抗凝兔血0.2ml在10ml蒸馏水中于紫外分光光度仪545nm处的吸光度值为0.8±0.3。1.3.2实验方法取10ml生理盐水浸提液,滴加0.2ml新鲜抗凝兔血,混匀,置37℃恒温水浴箱中保持60分钟。所有
7、试管经3000r/min750g离心5min,取上清液,于紫外分光光度仪下以545nm波长测定光吸收度,并计算溶血率。溶血率计算公式:溶血率=(实验组吸光度-阴性对照组吸光度)/(阳性对照组吸光度-阴性对照组吸光度)×100%。其中,阴性对照为生理盐水,阳性对照为蒸馏水。实验重复三次。1.3.3结果评定溶血率5%为合格;溶血率≥5%为不合格。2结果2.1细胞毒性试验氧化锆陶瓷材料试验组及阴性对照组,随着培养时间延长,OD值均有增加,阳性组OD值无增加。实验组与阴性对照组同一时间OD值比较差异无显著性(P0.05),与阳性对照组比较差异有显著性(P0.01)。氧
8、化锆陶瓷材料小牛血清浸提液对L929细
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