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1、龙腾胶囊有效提取物对实验动物炎症和免疫反应的影响论文【关键词】龙腾胶囊EffectsofeffectiveextractiveofLongtengCapsuleoninflammationandimmunereactioninrats【Abstract】AIM:TostudythetherapeuticeffectsoftheeffectiveextractiveofLongtengCapsuleoninflammationandimmunereactioninrats.METHODS:Threetypesofinflammatory
2、animalmodelsmatoryedemaofpaa.Tcellsubpopulationinratseasuredbyfloetry.ELISAassaysedtodetermineserumIL1βandIL2.RESULTS:Theextractiveinhibitedtheedemaofinflammatorytissue,relievedadjuvantarthritisandinhibitedchronicgranuloma.ArthritisscoreIL1βandIL2levelseimmunosuppressiv
3、eandantiinflammatoryeffectsontheexperimentalmodelsusedinourstudy,possiblybyreducingthereleaseofcytokinessuchasIL1βandotherinflammatorymediators.【Keymation;immune;IL1β;IL2【摘要】目的：研究龙腾胶囊的有效提取物在炎症动物模型水平的抗炎和抑制免疫反应的作用.方法：制作三种不同的炎症模型：大鼠足爪肿胀，棉球肉芽肿，佐剂性关节炎，运用ELISA，流式细胞术，物理检测等方法，检
4、测用药后对IL1β，IL2.freela公司；吲哚美辛购自Sigma公司；弗氏完全佐剂(FCA)；RATCD82PE和RATCD42FITCmAb(美国BeckmanCoulter公司);大鼠IL1β和IL2ELISA试剂盒(北京邦定生物技术有限公司);卡介苗购自上海生物制品公司；MK2500型足爪容积测量仪(日本产)；流式细胞计数仪(BectonDickinson公司).1．2方法大鼠180只,每种模型分为6组：正常组(模型不予处理);阴性对照组：生理盐水;阳性对照组：吲哚美辛;高中低剂量组.龙腾胶囊提取物0.5,1.5和4.5g/
5、kg,ig,.freelL,致炎后1～5h，每小时用窄带尺分别测量左右踝关节周径，以其差值作为肿胀度；致炎前1.5hig给药1次.②大鼠棉球肉芽肿,乙醚麻醉，肩胛部皮肤碘酊消毒，乙醇脱碘，肩胛间切一1cm的切口，止血钳钝性分离两侧皮肤与皮下组织，切口两侧皮下各植入消毒棉球（20mg）1个，缝合切口；术后当日开始给药，连续7d.③佐剂性关节炎,取无水羊毛脂与液体石蜡,比例为4∶6.加温搅拌、高压消毒后,保存备用.使用时加入卡介苗(上海生物制品厂),使每mL含灭活的结核杆菌10mg,而制成完全弗氏佐剂.SD大鼠乙醚麻醉下用750mL/L的
6、乙醇消毒后,在尾根部皮下分3～4点注射完全弗氏佐剂,清醒后单笼饲养,自由进食和饮水,每日观察和记录注射部位、尾部和肢体关节部位的变化,并测量其体质量［3］.于佐剂注射后1g/kg,针对不同模型，给药方案同上.造模后28d摘眼球取血,分离血清.采用双抗夹心ELISA法检测IL1β，IL2含量.用小鼠脾细胞检测对淋巴细胞体外增殖的影响：流式细胞术(floetry,FCM)检测T淋巴细胞亚群大鼠脾淋巴细胞悬液200μL,2000r/min离心5min,弃上清,压积细胞中加入CD42FITC和CD82PEmAb各20μL,另设非特异性染色对照
7、,置4℃反应30min.流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群.观察模型3踝关节局部的病理变化，同时观察胃黏膜的变化.滑膜病理学检测:给药24d处死动物,打开膝关节腔取出滑膜,切片HE染色.按滑膜病理评分法(炎细胞浸润,0:无炎性细胞;+:稀疏散在;:较密集;:大量.纤维组织增生,0:无纤维组织增生;+:少量增生;:中等增生;:大量.滑膜细胞增生,0:无滑膜细胞增生;+:单层细胞肿胀密集;:二层细胞肿胀密集;:三层细胞肿胀密集.巨噬样A细胞增生,0:无巨噬样A细胞;+:稀疏散在;:较密集;:大量)进行评分并对每组各项评分进行累加.胃黏膜炎症分级
8、积分参照Raug和(62.0±6.1)mg，而高中低剂量治疗组分别为(38.4±3.6),(39.6±4.1)和(46.6±4.9)mg；吲哚美辛组为(37.6±5.6)mg.龙腾胶囊治疗组肉芽肿质量较阴性治疗组和正常组
