海水中致病性弧菌分离及抗菌药物敏感性分析论文

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1、海水中致病性弧菌分离及抗菌药物敏感性分析论文韩善桥虞积耀姜涛王大鹏【摘要】目的了解我国东南沿海海水中致病性弧菌的分布情况及其对抗菌药物的敏感性。方法用海水采样器采集海水，经增菌培养和细菌分离，进行细菌鉴定和抗菌药物敏感性试验。结果从160份海水中分离出弧菌科细菌339株，其中弧菌属295株（87.0%）,气单胞菌属42株(12.4%),邻单胞菌属2株（0.6%）。药敏试验结果显示，150株致病性弧菌对亚胺培南及头孢哌酮/舒巴坦的药物敏感率为100%，对头孢哌酮、复方磺胺甲噁唑、庆大霉素、奈替米星、头孢噻肟、头孢他啶和左氧氟沙星的药物敏感率在90.0%～98.7

2、%，对头孢唑啉和氨苄西林的敏感率较差，仅为28.0%和30.0%。结论海水中致病性弧菌分离及抗菌药物敏感性分析.freelicrobialsusceptibilityinbrineofSoutheastChinaSeaarea.MethodsPathogenicvibriofromdifferentregionsofstraitsedethod.ResultsAmong339bacteriastrainsisolatedfrombrine,295strains(87.1%)onas,2strains(0.6%)onas.Thesusceptibilitieso

3、fthebacteriato18kindsofantibioticsipenemandcefoperazone/sulbactamethoprim/sulfamethoxazole,gentamicin,ilmicin,cefotaxime,ceftazidimeandlevofloxacinpicillinicrobialagent;Antimicrobialsusceptibilitytest弧菌广泛分布于海水和海产品中，人们常常因接触海水或食入被弧菌污染的食物而引起感染。为了解我国东南沿海海水中致病性弧菌的分布情况及弧菌对抗菌药物的敏感性，以提供预防致病

4、性弧菌感染的流行病学依据。2001年4月～2006年5月，我们对东南沿海码头、港口、海边及近海海水采样进行致病性弧菌的分离与鉴定，并对150株致病性弧菌做了抗菌药物敏感性试验，现将结果报告如下。1材料与方法1.1海水采集1.1.1海水采集地点（1）港口、码头和海边：从福州到厦门采集40个点海水。（2）近海：距福建沿海岸边约5Km，从福建三都岛到东山岛采集40个点的海水。1.1.2海水采集方法用无菌海水采样器采集海水（采样器由国家海洋局天津海洋技术研究所生产），取水面下30cm～100cm深处的海水，每个点取2份，每份500ml，共160份海水。1.2培养基和试

5、剂1.2.1增菌培养基碱性蛋白胨水、嗜盐菌增菌液和营养肉汤（英国Oxoid公司产品）。1.2.2分离培养基TCBS琼脂、血琼脂和麦康凯琼脂（英国Oxoid公司产品）。1.2.3生化反应试剂英国Oxoid公司产品。1.2.4诊断血清霍乱弧菌O1群及O139群诊断血清（中国疾病预防控制中心传染病预防控制所产品）。1.2.5Muller–Hinton(MH)琼脂法国生物梅里埃公司产品。1.2.6药敏纸片英国Oxoid公司产品。1.3VITEK2pact全自动微生物分析仪法国生物梅里埃公司产品。1.4方法1.4.1细菌分离（1）无菌手续取海水25ml，加入225ml碱

6、性蛋白胨水增菌液中，35℃增菌培养6～8h，取表面培养物分别接种TCBS琼脂、血琼脂和麦康凯琼脂，35℃培养18～24h，观察菌落特征，挑取可疑菌落进行细菌分纯。（2）无菌手续取海水25ml，加入225ml嗜盐菌增菌液中，35℃增菌培养8～16h，取培养物分别接种TCBS琼脂和血琼脂，35℃培养18～24h，观察菌落特征，挑取可疑菌落进行细菌分纯。（3）无菌手续取海水25ml，加入225ml营养肉汤中，35℃增菌培养16～18h，取培养物分别接种TCBS琼脂、血琼脂和麦康凯琼脂，35℃培养18～24h，观察菌落特征，挑取可疑菌落进行细菌分纯。1.4.2细菌鉴定

7、取分纯平板细菌涂片革兰染色，做氧化酶、氧化发酵和O/129敏感性试验，确定为弧菌科细菌后进行手工及全自动微生物分析仪鉴定，按文献1，2进行细菌属、种和型的鉴定。注意麦氏弧菌氧化酶试验为阴性，与肠杆菌科细菌鉴别可用硝酸盐还原试验。对生化反应疑似霍乱弧菌的细菌分别做O1和O139群血清凝集试验。1.4.3药敏实验采用琼脂扩散（K-B）法：取分纯平板细菌制成菌悬液，涂布于MH琼脂上，放置药敏纸片，35℃培养18～24h，测定抑菌圈大小，按临床和实验室标准协会（CLSI）标准判断药敏结果。2结果2.1致病性弧菌的检出情况160份海水分离出弧菌科细菌3属16种339株，

8、见表1。表1弧菌科细菌种类检出结果2.