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时间:2018-07-07
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1、山仙颗粒对荷瘤小鼠免疫功能影响的实验研究论文【摘要】目的观察山仙颗粒对荷瘤小鼠免疫系统的影响。方法纯系BALB/c小鼠30只,用U14瘤细胞荷瘤建立动物模型,随机平均分为3组:山仙颗粒治疗组、环磷酰胺治疗组、生理盐水对照组。观察山仙颗粒对荷瘤小鼠NK细胞活性、淋巴细胞转化率、TNF-α等免疫指标的影响。结果山仙颗粒能够显著提高治疗组小鼠的NK细胞活性、淋巴细胞转化率和血清中TNF-α,IL-2的含量。结论山仙颗粒能够显著提高荷瘤小鼠免疫系统的活性。【关键词】山仙颗粒小鼠肿瘤免疫Abstract:Obj
2、ectiveToobservetheeffectofShanxianGranuleonimmunesystemintumor-bearingmice.MethodsMMTmethodatecelltoxicactionofShanxianGranule.AftertheanimalmodelofmousebearingtumorsationefficiencyoflymhocyticcellandthecontentofTNF-α.ResultsShanxianGranulecouldsignific
3、antlyincreasetheNKcellactivityandtransformationefficiencyoflymphocyticcell,elevatethecontentsofTNF-α,IL-2intumorbearingmice.ConclusionShanxianGranulecanenhancetheactivityofimmunesystemintumor-bearingmice.Keyor;Immunity正气亏虚,血行淤滞是肿瘤发生与转移的基本病机。癌症患者常常免疫功能低下
4、,加之放、化疗对全身免疫系统的损伤,患者血中吞噬细胞的活性与吞噬杀伤作用均有不同程度降低,此即中医所说的正气亏虚。由于免疫功能低下,免疫细胞难以识别和杀灭存在于血液循环中的具有转移能力的癌细胞而使癌细胞扩散.freell的混悬液待用。1.1.3瘤株U14(小鼠腹水型宫颈癌细胞)、YAC-I(小鼠淋巴瘤细胞)购自陕西省中医研究院动物中心。1.1.4试剂与仪器RPMI-1640;Gibco刀豆蛋白A(ConA);sigma产四甲基偶唑蓝(MTT);Flu-ka产PCH-100电脑CO2孵育培养箱;TNF-
5、α,IL-2试剂盒,上海森雄科技实业有限公司产品;奥地利产SUTSPECTRA2酶标仪。1.2方法取U14瘤株生长最佳状态的传代细胞,按细胞数1×106/ml,0.2ml/小鼠腹腔注射,24h后随机分组。山仙颗粒组0.4ml/d灌胃,1次/d,连续7d;生理盐水(NS)组用无菌NS,途径、剂量、方法、次数同山仙颗粒组;环磷酰胺(CY)组用环磷酰胺0.4mg/ml,途径、剂量、方法、次数同山仙颗粒组。于接种瘤株后第12天各组小鼠分别摘除眼球取血,之后再脱颈处死取脾进行下一次实验。1.2.1NK细胞杀伤活
6、性的测定小鼠脱颈处死后无菌取脾,制成单个脾细胞,用无菌三蒸水休克红细胞30s,迅速加入等量的1.7%无菌盐水恢复等渗,台朌蓝拒染计数活细胞在95%以上,与YAC-1一起加入96孔培养板(效靶比20∶1),各设3个复孔,MTT法检测NK细胞活性。NK细胞活性(%)=靶细胞对照孔A值(实验孔A值-效应细胞孔A值)/靶细胞对照孔A值×100%。1.2.2淋巴细胞增殖反应的测定按上述方法制备脾细胞,浓度为5×106/ml,.freellConA20l,对照孔加培养液20l,置37℃CO2孵育培养箱中培养68h
7、,离心取上清100lMTT测A值,计算淋巴细胞增殖率。淋巴细胞增殖率(%)=实验孔A值/对照孔A值×100%1.2.3荷瘤小鼠血清TNF-α含量测定用TNF-αELISA试剂盒,采用双夹心酶联免疫检测法,λ=450nm,根据标准A值绘制曲线,从标准曲线上查出待检标本的TNF-α含量。1.2.4荷瘤小鼠血清IL-2含量测定用IL-2ELISA试剂盒,采用双夹心酶联免疫检测法,λ=450nm,根据标准A值绘制曲线,从标准曲线上查出待检标本的IL-2含量。1.3统计方法两两比较,采用方差分析中的SND-q检
8、验,结果以±s表示。2结果2.1山仙颗粒腹水型荷瘤小鼠,NK细胞活性及淋巴细胞增殖率的影响结果见表1。结果表明山仙颗粒组荷瘤小鼠NK细胞活性及淋巴细胞增殖率显著高于NS组及CY组(P0.01),CY组NK细胞活性及淋巴细胞增殖率显著低于NS组(P0.05)。2.2山仙颗粒对腹水型荷瘤小鼠血清中TNF-α,IL-2含量的影响结果见表2。表1山仙颗粒腹水型荷瘤小鼠,NK细胞活性及淋巴细胞增殖率的影响(略)表2山仙颗粒腹水型荷瘤小鼠血清中TNF-α,IL-2含
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