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时间:2018-07-07
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1、肌苷对海人藻酸引起纹状体损伤的保护作用论文【关键词】肌苷Protectiveeffectofinosineonintrastriatalkianicacidinjectioninducedlesionintherat【Abstract】AIM:Toestablishtheanimalmodelofintrastriatalkainicacid(KA)injectionandtoinvestigatetheeffectofsystematicadministrationofinosineonthestriatallesionsizeandthenumbero
2、fNADPHdpositiveneuronsinthismodel.METHODS:KAofrats.Tenratsinistration,(50gL-1,75mgkg-1),3timeseachday,from1daypriortooperationtoday3postoperativelyalsalineinsteadofinosine.NisslstainandNADPHdhistochemistryedtoinvestigatethedifferenceoflesionsizeandNADPHdpositiveneuronsbetberofNADP
3、Hdpositiveneurons.CONCLUSION:InosinecanattenuateKAinducedstriatallesionandsho.ThesefindingsprovideapontentialclinicaluseofinosineintheSdisease.【Key;NADPHdpositiveneuron【摘要】目的:建立大鼠纹状体内注射海人藻酸(KA)模型,并观察肌苷对纹状体损伤面积及NADPH脱氢酶(NADPHd)阳性神经元数目的影响.方法:采用纹状体内注射KA制备模型.10只大鼠分成2组(n=5),分别于手术前1d给予肌
4、苷或等量生理盐水(对照组),腹腔注射,每日3次,持续给药至手术后第3日结束,利用尼氏染色和NADPHd的组织化学方法,观察肌苷组和对照组纹状体损伤面积及NADPHd阳性神经元数目的差别.结果:肌苷可以使KA引起的纹状体损伤面积减小并增加NADPHd阳性神经元的数目.结论:肌苷可以减轻兴奋性毒素KA引起的纹状体损伤.freelgKg-1)或等量生理盐水腹腔注射,每日3次.持续给药至术后第3日结束.1.2方法1.2.1纹状体内注射KA模型动物用10gL-1戊巴比妥钠50mgKg-1,腹腔注射麻醉后,置于脑立体定位以上,常规皮肤消毒,正中矢状切开头皮,颅骨钻孔,
5、依图谱在尾壳核前部(AP,0.7~1.0mm;LP,3.0mm;V,4.0mm)5min内用微量进样器徐缓注入1.0gL-1的KA或生理盐水0.5μL,并留针5min后缓慢退出.1.2.2组织处理手术后,大鼠存活3d,将动物麻醉,经左心灌注生理盐水100mL,然后灌注0.1molL-1PBS配置的40gL-1多聚甲醛350mL.1.5h后取脑,并后固定3h,再放入200gL-1蔗糖平衡溶液中,置于4℃冰箱中过夜.组织沉底后,于恒冷箱内切片,片厚40μm,分为5套.1.2.3组化染色和计数从5套切片中随即取出两套,分别作Nissl染色和NADPH脱氢酶(NA
6、DPHd)组化染色.NADPHd组化染色是将切片洗涤3次后,放入含NADPHd1.0gL-1,硝基四氮唑蓝(NBT)100mgL-1和3gL-1TritonX100的10mmolL-1的PBS(PH=7.4)溶液中孵育1h,染好后用10mmolL-1的PBS中止反应[3].Nissl染色中的5个等距切片(200μm)被用来衡量KA的损伤面积,其中两个位于针道平面以前,两个位于之后,一个恰好位于针道平面.在BX60显微镜2倍目镜下采图,并于Photoshop6.0软件对其损伤区域进行描摹及计算.同样,NADPHd组化染色中的5个等距切片(200μm)被用来衡
7、量肌苷对纹状体NADPHd阳性细胞数目的影响,我们使用损伤侧占对照侧纹状体NADPHd阳性细胞数目的百分数比作为衡量存活的指标.被检平面按照其距针道平面的距离依次为-400,-200,0,200,400μm(Tab1).统计学处理:使用SPSS软件进行studentt检验.对于因方差不齐不能采用studentt的数据,使用,YouSengJH,JuG,DirectprotectionofinosineonPC12cellsagainstzincinducedinjury[J].Neuroreport,2002;13(4):477-479.[2]CoyleJ
8、T,SchodelforHuntingtonschorea[J].
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