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1、蝇蛆壳聚糖对高脂血症大鼠的降脂保肝作用:覃容贵吴建伟国果付萍【摘要】目的研究不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠的降脂保肝作用。方法采用酸碱化学法制备不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖,并用红外扫描鉴定其结构。取大鼠给高脂饲料造模的同时连续分别给予不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖8aggotchitosanonloentofPharmacognosy,PharmaceuticalCollege,GuiyangMedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China【Abstract】Objecti
2、veTostudyeffectsofdegreeofdeacetylationofhouseflymaggotchitosan(HMC)onloicalmethodinistrateddifferentdeacetylationHMCcontinuouslyfor8etime,thenthebloodlipideasured.Thelivertotalcholesterol(TC),triglyceride(TG),loiacontrolgroup(P<0.01),thecontentofhighdensityli
3、pidcholesterol(HDLC)iacontrolgroup(P<0.01).TheLIlevelsandTCcontentinliverofHMCgroupsodelgroup(P<0.01).PathologicalexaminationofthelivershoilderhepaticpathologyoffattydegenerationintheHMCgroupsthaninthemodelgroup.ConclusionsHMCcanmodulatethebloodlipidlevels
4、,amelioratethehepaticpathologyoffattydegenerationandloicrats,aggotchitosan;Deacetyiation;Hypercholesterolemia;LopusAU400全自动生化分析仪(日本Olympus公司)。 1.2实验动物SD大鼠,雄性,50只,体重180~205g,贵阳医学院实验动物中心提供。基础饲料由贵阳医学院实验动物中心提供。高脂饲料配制:用2%胆固醇,10%猪油,0.2%丙硫氧嘧啶,1%蛋黄粉,0.5%胆盐及86.3%基础饲料配制而
5、成。 1.3实验材料的制备及鉴定 1.3.1壳聚糖的制备分别称取3份蝇蛆甲壳素5.0g进行脱乙酰反应,NaOH浓度为60%,液固比为20ml/g,100℃下分别反应4、6、8h。反应至预定时间后,停止反应,用热蒸馏水反复冲洗至中性,烘干至恒重,可得到不同脱乙酰度的壳聚糖。 1.3.2壳聚糖脱乙酰度的测定参照文献〔3〕 1.3.3不同脱乙酰度壳聚糖的红外鉴定将壳聚糖干燥至恒重,与溴化钾(KBr)混合研磨、压片,在400~4000cm-1测红外光谱图。 1.4动物实验方法用基础饲料适应性喂养大鼠5d后,随机分为5组
6、,每组10只,分别为正常对照组:以基础饲料喂养;高脂模型组:以高脂饲料喂养;蝇蛆壳聚糖72.3%、80.5%、96.1%脱乙酰度组:给高脂饲料的同时分别灌胃给予不同脱乙酰度蝇蛆壳聚糖600mg/kg,连续给药8处,横切一块肝组织,用中性甲醛固定,常规脱水,石蜡切片,HE染色,光镜下观察肝脏病理形态学改变。于剩余肝脏中取组织,在蒸馏水中漂洗数次,滤纸吸干,称重1g,放入组织匀浆器,加3ml生理盐水匀浆10min,将浆液放入冰箱(-20℃)3~4h,进行肝脏脂质测定。 1.6统计学处理数据以x±s表示,采用SPSS13.0
7、统计软件进行t检验。 2结果 2.1产品脱乙酰度的测定碱浓度60%,100℃下分别反应4、6、8h,产物脱乙酰度分别为72.3%、80.5%、96.1%。 2.2不同脱乙酰度壳聚糖红外扫描壳聚糖在1595cm-1(NH2),1648cm-1(酰胺谱带1)和1424cm-1(酰胺谱带2)的特征吸收峰,在1480cm-1(COCH3中C=O)处吸收峰强度较弱,3个相似的吸收峰曲线显示不同脱乙酰度壳聚糖主链中的结构是相同的〔3〕。但高度脱乙酰壳聚糖在3430cm-1(OH和NH2)和1594cm-1(NH2)处的
8、吸收明显强于低度脱乙酰壳聚糖,这说明高度脱乙酰壳聚糖游离的NH2增多。 2.3不同脱乙酰度蝇蛆壳聚糖对血脂代谢的影响给高脂饲料8w后,高脂模型组大鼠血清TC、TG、LDLC含量显著升高,HDLC含量显著降低,表明高脂模型造模成功(P<0.01)。结果表明,壳聚糖可以明显抑制TC、TG及LDLC含量的升