组胺h3 受体对垂体瘤att┐20细胞分泌acth的调节作用

《组胺h3 受体对垂体瘤att┐20细胞分泌acth的调节作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、组胺H3受体对垂体瘤AtT┐20细胞分泌ACTH的调节作用　　摘要:目的观察组胺受体激动剂对AtT-20细胞分泌ACTH的影响，并探讨G蛋白在组胺H3受体信号转导机制中的作用.方法选用文献报道的高表达组胺H3受体的垂体细胞瘤AtT-20作为观察系统，用放免分析法测定给予组胺受体激动剂后各时间点细胞上清液中ACTH分泌量的变化，并观察药物对细胞增殖的影响.结果组胺H3受体激动剂R-（α）-MeHA（0.1μmolL-1）作用8h能明显促进ACTH的释放，释放量为1920μgL-1，与同时间对照组（780μgL-1

2、）相比，明显增高（P<0.01）;H1和H2激动剂则无此作用.且R-（α）-MeHA引起CTH分泌的效应能被H3受体特异性拮抗剂thioperamide所拮抗，而H1受体和H2受体拮抗剂均不影响R-（α）-MeHA的效应.R-（α）-MeHA作用8和24h，对细胞增殖无明显影响.用G蛋白失活剂NEM预先处理细胞后，取消了R-（α）-MeHA增强AtT-20细胞ACTH分泌的效应.结论特异性激动组胺H3受体后能引起兴奋-分泌耦联过程，其信号转导过程中有G蛋白的参与.　　KeyineH3receptors;A

3、tT-20cells;adrenocor-ticotropin;Gprotein　　Abstract:AIMToinvestigatethesignaltransductionmech-anismofhistamineH3receptor.METHODSTheadrenocor-ticotropichormone（ACTH）levelsofsupernatantsonAtT-20cellsfromthepituitaryglandtumoreasuredbyra-dioimmunoassayatthegiven

4、timeafterhistamineagonistsinistratedandtheeffectsofR-（α）-methylhistamineonthecellsproliferationethylhistamineincreasedthereleaseofACTHintime-dependentmanner.Itincreasedsignificantlyafteradministratedreagents8hethylhistamineandtheH2agonistimpromidineore，thisr

5、esponseide，anH3re-ceptorspecificantagonist，butnotbytheH1andH2antago-nistchlorpheniramineandcimetidine.R-（α）-methylhis-taminehadnosignificantinfluenceoncellproliferationentaleimide（NEM）couldabolishtheeffectsofR-（α）-methylhistamineonthereleaseofACTH.CONCLUSION

6、SpecificactivationofH3receptorcouldevoketheexcitation-secretioncouplingprocess，andGproteinmightbeinvolvedinthesignaltransduction.0引言　　组胺H3受体是1983年发现的一种组胺受体新亚型［1］，作为突触前自身受体和异身受体，广泛分布于中枢与外周多种神经元末梢的突触前膜，负反馈性调节神经递质的释放2，3］.研究表明，激动H3受体可调节中枢和外周神经系统多种神经递质的释放［4-6］.H3

7、受体是一类对中枢和外周器官活动具有重要调节作用的受体体系.目前，H3受体信号转导的机制尚不明确［7］.根据文献［8］的报道，我们利用高表达组胺H3受体的垂体瘤AtT-20细胞作为观察系统，观察了三种组胺受体激动剂与拮抗剂对细胞分泌ACTH的影响.实验证明，此研究系统灵敏、准确、可靠，可作为研究组胺H3受体信号转导机制的有效研究系统.并在此基础上，初步探讨了G蛋白在组胺H3受体信号转导机制中的作用.　　1材料和方法　　1.1材料　　垂体细胞株AtT-20购自中国科学院上海细胞生物学研究所（从美国ATCC引进），R

8、PMI1640购自Gibco公司，新生牛血清（NBS）购自杭州四季青生物工程材料研究所，ACTH检测试剂购自天津德普生物技术和医学产品有限公司，H3受体激动剂R-（α）-Methylhistamine（R-（α）MeHA）购自Sig-ma公司.　　1.2方法　　复苏冻存的垂体细胞株AtT-20，以含100mLL-1新生牛血清的1640培养液接种于培养瓶中，置于950mLL-1空气和50