组胺hr1拮抗剂对变应性鼻炎il12及dcs的影响

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1、组胺HR1拮抗剂对变应性鼻炎IL12及DCs的影响：燕志强，章如新，余少卿，温武，吴革【摘要】目的：通过观察组胺HR1拮抗剂干预后对变应性鼻炎（AR）大鼠血清中IL12，以及鼻黏膜中树突状细胞（DCs）的变化和影响,并探讨其作用机制.方法：实验大鼠随机分为正常对照组，AR无干预组，ARHR1拮抗剂干预组，观察致敏以及组胺HR1拮抗剂干预后大鼠血清IL12含量及鼻黏膜中DCs数量的变化.结果：与正常对照组相比，AR无干预组血清IL12含量下降(P<0.01)，鼻黏膜中DCs数量则增加（P<0.01）；而ARHR1拮抗剂干预组经组胺HR1拮抗剂干预后

2、，血清IL12含量回升(P=0.042)，鼻黏膜中DCs数量则下降（P=0.003）.结论：AR时IL12含量减少以及DCs数量增加是AR发病的重要因素；组胺HR1拮抗剂可以抑制IL12，DCs的变化，是其在AR治疗中发挥作用的机制之一.【关键词】鼻炎，变应性，常年性；白细胞介素12；树突状细胞；组胺；受体；拮抗剂0引言组胺是变应性鼻炎（allergicrhinitis,AR）中主要的炎性介质.随着分子生物学技术的发展，组胺及其受体系统功能在AR等变态反应性疾病中的作用尤其对免疫系统的影响逐步引起重视.组胺HR1拮抗剂是目前AR的主要一线治疗药物之一，对于控

3、制AR的速发症状有良好的作用.我们通过建立AR动物模型，并在给予组胺HR1拮抗剂干预后，观察大鼠血清IL12及鼻黏膜中树突状细胞（DCs）水平的变化，以探讨组胺HR1拮抗剂在AR中的作用机制，旨在为新的治疗策略提供理论依据.1材料和方法1.1材料6in给予氯雷他定混悬液灌胃（10mg/kg），1次/d，累计9d.在鼻腔激发第14日鼻腔激发后1h，开始收集标本，于最后1次激发后1h，戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉（40mg/kg），麻醉成功后采集实验用标本.采血离心后取上清夜-20℃保存，然后取鼻黏膜一部分中性甲醛固定制备石蜡切片,取部分切片HE染色常规病理学检查.1.

4、2.2标本检测1.2.2.1S100标记DCs细胞取中性甲醛固定的鼻黏膜,经脱水、透明、浸蜡、包埋后切片（片厚4μm），然后烤片、脱蜡至水；PBS溶液洗涤（3min×3）,用3mL/LH2O2封闭内源性过氧化物酶（室温20min）；PBS溶液洗涤（3min×3）,加适量0.01mol/L(pH6.0)CBS溶液,微波抗原修复（Ⅲ档，10min×2）；顺序加S100一抗工作液1∶50，37℃，2h；S100二抗工作液，37℃，30min，PBS溶液洗涤（3min×3）；最后行DAB显色（10min）及苏木素复染,风干后中性树脂封片、烤片.S100免疫组化方法对

5、DCs进行定位及相对定量研究,光学显微镜下记数5个高倍视野下平均每个高倍视野下S100阳性DCs细胞数.1.2.2.2ABCELISA法测定血清中IL12含量将标准样品稀释液或待测样品100μL依次加入微孔板孔中，其中前7孔为梯度稀释的样品稀释液，第8孔为空白对照，37℃放置120min；洗涤液将反应板充分洗涤4次后,每孔中加入一抗体工作液100μL,充分混匀后37℃静置60min；再次用洗涤液充分洗涤反应板,反复4次；然后每孔加酶标抗体工作液100μL，37℃静置60min；同前洗涤反应板,每孔加底物工作液100μL，37℃暗处反应5～10min,出现黄色；

6、每孔加1滴反应终止液混匀，颜色加深,492nm处读取A值.根据标准品稀释液测定结果并绘制标准曲线，根据标准曲线得出待测样品IL12浓度.统计学处理：采用SPSS11.0软件包进行统计学处理.数据以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析及LSDt检验.P<0.05为差异具有统计学意义.2.2鼻黏膜S100阳性树突状细胞变化在正常对照组大鼠的鼻黏膜中存在S100免疫活性DCs，与AR组大鼠鼻黏膜中S100免疫活性DCs数量相比较有所增加（P<0.01），经组胺HR1抗拮抗剂干预后，S100免疫活性DCs数有所减少（P=0.003，表1，图2）.表

7、1各组大鼠鼻黏膜S100阳性DCs细胞数，血清IL12含量结果比较2.3三组大鼠血清IL12含量测定与正常对照组大鼠相比较，AR组大鼠血清IL12含量有所减少(P<0.01)，而经氯雷他定处理后IL12水平较AR组增高(P=0.042，表1).3讨论DCs是体内最重要、功能最强的抗原递呈细胞,处于启动特异免疫反应的中心地位,是机体内目前所知的唯一能激活初始型T细胞产生特异性免疫应答的APC而倍受关注.DCs在AR等变态反应性疾病中的作用日益受到重视，其可以影响Th0细胞分化从而影响Th1/Th2反应的平衡状态，其中DCs所分泌的细胞因子IL12