新鲜羊膜和保存羊膜在碱烧伤眼表重建中的作用比较

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1、新鲜羊膜和保存羊膜在碱烧伤眼表重建中的作用比较：赵琳，王峰，孙乃学，熊全臣，王建明【摘要】目的观察比较新鲜羊膜和保存羊膜移植在兔角膜急性碱烧伤眼表重建中的作用，并探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血小板源性生长因子(PDGF)的疗效。方法建立兔角膜急性碱烧伤模型，设左眼为对照组，右眼为治疗组，并于24h内行新鲜羊膜或保存羊膜移植术(12眼/组)。术后观察双眼形态及角膜新生血管变化，酶联免疫吸附法检测房水中TNF-α的含量，免疫组化法检测角膜组织中PDGF-BB蛋白的表达情况。结果与对照组比较，治疗组炎症反应轻，角膜溃疡范围小，上皮再生速度

2、快，新生血管长度短(P<0.05)。治疗组房水中TNF-α含量低于同期保存羊膜移植组和对照组，且下降速度快，角膜组织中PDGF-BB蛋白表达升高(P<0.05)。与保存羊膜移植组比较，新鲜羊膜移植组炎症反应更轻，TNF-α下降速度更快(P<0.05)，PDGF-BB表达水平更高(P<0.05)。结论在角膜急性碱烧伤眼表重建中，新鲜羊膜较保存羊膜效果更好，其作用与抑制TNF-α水平、促进PDGF表达有关。【关键词】碱烧伤;羊膜移植术;肿瘤坏死因子-α;血小板源性生长因子　ABSTRACT:ObjectiveTopar

3、ethetherapeuticeffectoffreshamnioticmembranetransplantation(f-AMT)andpreservedamnioticmembranetransplantation(p-AMT)inocularreconstructionofearlycornealalkaliburnsmodelandtoexploretheroleoftumornecrosisfactorα(TNF-α)andplateletderivedgroodelsmol/Lsodiumhydroxide.Torp-AMTe

4、dintherighteyes(12eyes/group,therapygroup),andthelefteyesservedascontrols.Themorphologicchangesoftheeyesandtheneovascularization(V)lengthatthetopofcornealsurfaceorfromtheanteriorchambereasuredbyenzymelinkedimmunosorbentassaymethodafterAMTprocedure.Also,thePDGF-BB(amarkero

5、fPDGF)proteinexpressionofcornealtissuemunohistochemistrymethod.Resultsparedoderatecornealinflammation,distinctiveulcerboundary,quickepitheliumregenerationandshorterVlength.Intherapygroup,TNF-αconcentrationorequicklythanthatincontrolgroup(P<0.05).ThePDGF-BBproteinexpres

6、sionincreasedafterATMprocedure.apredilderinflammatoryreaction,lonioticmembranetransplantationisbetterthanpreservedamnioticmembranetransplatationinocularreconstructionofearly-stagecornealalkaliburns,ayberelatedtoitsinhibitionofTNF-αconcentrationandincreaseofPDGFexpression.

7、　　KEYEM培养液中，-80℃封闭保存，保存期2月。实验所用羊膜已征得产妇知情同意并经单位伦理委员会批准后使用。　　1.3碱烧伤模型的制备5g/L盐酸丙美卡因表面麻醉，置开睑器，充分暴露眼表，以浸有1mmol/LNaOH溶液、直径6mm的单层圆形滤纸片置于兔角膜表面中央，70s后取下，立即用40mL生理盐水连续冲洗眼角膜表面2min。　　1.4羊膜移植方法角膜碱烧伤后24h内行移植手术，步骤如下：氯胺酮50mg/kg和异丙嗪25mg/kg等量混合共4mL背部皮下注射全身麻醉。铺孔巾，开睑器打开右眼。刮除角膜表面坏死组织，沿角膜缘360°

8、环形剪开球结膜，暴露前部巩膜床3mm。将备好的羊膜上皮面向上，平铺于角膜表面，边缘超出角膜缘3mm，10-0无损伤缝线间断缝合羊膜与球结膜，并固定于角膜缘外2mm处浅层巩膜，使羊膜紧贴于角膜创