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1、奶牛生产疾病的早期诊断及其监测 奶牛生产疾病(productiondiseases)是奶牛不能满足高产代谢需求所引发疾病的统称。奶牛生产疾病以往主要是指低钙血症、酮病、脂肪肝和低镁血症等主要的代谢病,现已将瘤胃酸中毒、真胃变位、胎盘停滞和蹄叶炎等疾病也纳入生产疾病范畴。 过渡期(围产期)是奶牛生产疾病的高发期。因此,生产疾病对奶牛的健康、生产性能和经济效益至关重要。就目前而言,即便在饲养管理规范的奶牛场,奶牛生产疾病的发病率较比几十年前并没有大的减少,甚至呈现只增不减的趋势。目前,奶牛生产疾病大多以亚临床的形式发生,如亚临
2、床酮病、亚临床低钙血症的发病率往往是临床型病例的几倍甚至十几倍,过渡期奶牛亚急性瘤胃酸中毒的发病率也很高。 患亚临床生产疾病的病牛大都不表现明显的临床症状,使得该类疾病的临床诊断很困难。因此,建立亚临床生产疾病早期诊断方法和技术,开展奶牛群体营养代谢状监测,预测预报牛群生产疾病的发生,是防治奶牛生产疾病的有效技术手段。 1奶牛生产疾病的早期诊断 选择奶牛生产疾病早期诊断指标的基本原则是灵敏、特异、简便、实用、价廉。 1.1酮病早期诊断技术和方法 传统的奶牛酮病诊断主要依赖临床症状和尿、乳酮体的检测。尿、乳酮体检查主要
3、是检测乙酰乙酸,因其化学性质不稳定易于氧化,且含量不如β-羟丁酸(β-hydroxybu-tyricacid,BHBA)高,以致尿液酮体检查的结果敏感性高但特异性差,存在假阳性;而乳汁酮体检查特异性高但敏感性低,存在假阴性。为弥补尿、乳酮体检查的不足和缺陷,国外研发了检测乳汁BHBA的试纸条,在一定程度上提高了酮病诊断的准确性。 2008年我们实验室研制出检测乳汁BHBA的奶牛亚临床酮病诊断试纸条,特异性、敏感性、重复性和稳定性符合国家标准,达到了国外同类产品的水平,但其价格仅为国外同类产品的1/3,已获
4、国家发明专利授权。 与尿、乳酮体检查相比,测定血清BHBA诊断酮病的准确性和敏感性更高。近年来,国外兽医临床提出酮病诊断的金标准:BHBA>1.2mmol/L,葡萄糖(Glucose)<2.5mmol/L。临床酮病血清BHBA>1.5mmol/L,亚临床酮病血清BHBA=1.2~1.4mmol/L。Imol/L时,其检测的敏感性分别为88%和96%,特异性分别为96%和97%,优于2种常用的化学试纸条(KetostixandKetolac),但其检测尿液和乳汁的阳性和阴性预测值很低。认为应用电子BHBA测定
5、仪检测全血BHBA可用于亚临床酮病的诊断。 由于采血检测BHBA在生产实际受到一定限制,寻找新的诊断标志物和建立更便于牛旁检测(coinfrared(FTIR)spectroscopy)检测乳汁酮体和BHBA浓度,结果表明仅凭乳中酮体和BHBA的浓度诊断酮病价值有限,因有较大比例的假阳性。在整个泌乳期间,乳汁高丙三醇磷酸胆碱(glycerolphosphocholine,GPC)值与低酮病发病率关联。泌乳1个月时,GPC/PC摩尔比等于或大于2.5指示发生酮病的危险性很低。乳汁GPC和PC(phosphocholine)的浓
6、度可反映降解磷酸胆碱作为脂肪酸以满足泌乳早期能量需求增加的能力。也有人提出乳汁柠檬酸盐可能是能量负平衡的生物标志物,但其临床诊断价值还有待进一步确定。迄今为止,尚未有比检测血清BHBA诊断亚临床酮病准确性更高的方法和技术。 1.2脂肪肝早期诊断技术和方法 肝组织活检技术是目前奶牛脂肪肝诊断唯一可靠的方法。根据肝组织甘油三酯(TG)的含量(%湿重)可判断脂肪肝的轻重: TG含量1%~5%为轻度,5%~10%为中度,>10%为重度。由于肝组织活检属介入性诊断技术很难为奶牛场的管理者所接受,在很大程度上限制了其应
7、用。寻找适合兽医临床需要的非介入性诊断方法和技术已成为奶牛脂肪肝研究的热点。 可用于脂肪肝检验诊断的血液生化指标主要包括以下几类:①能量代谢指标,如NEFA、BHBA、葡萄糖等;②蛋白代谢指标,如白蛋白、总蛋白、尿素氮(BUN)、VLDL等;③肝机能指标,如GGT、AST、SDH等肝特异性酶,胆红素、胆酸等胆汁流动指标。 Kalaitzakis等认为血清鸟氨酸氨基转移酶(orni-thinecarbamoyltransferase,OCT)和谷氨酸脱氢酶活性,及NEFA/胆固醇比值是脂肪肝良好的指征。 血清apoB-10
8、0,apoA-ⅠandapoC-Ⅲ浓度降低,卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin:cholesterolacyl-transferase,LCAT)活性降低,及触珠蛋白和血清淀粉样蛋白A浓度增加与脂肪肝和脂肪肝相关疾病的发生密切相关。因此,测定载脂蛋白和酶活性有助于这些疾
