egcg对体外培养的人毛囊和毛乳头细胞生物学活性的影响及hif-1α在人毛囊和毛乳头细胞中的表达的研究-皮肤病性病学专业论文

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1、优秀毕业论文南京医科大学硕士学位论文缩略语EGCGepigallocatechin··3-·gallateDPCdermalpapillacell毛乳头细胞MTTmethylthiazolyltetrazolium3一(4，5一二甲基噻唑一2)一2，5一二苯基四氮唑溴盐DMSOdimathylsulfoxide二甲基亚砜DMEMDulbecco’sModifiedEagle’sDMEM培养基MediumFBSfetalbovineserum胎牛血清FGFfibroblastgrowthfactor成纤维细胞生长因子VEGFvascu

2、larendothelialgrowthfactor血管内皮细胞生长因子GAPDHglyceraldehydesphosphate磷酸甘油醛脱氢酶dehydrogenasePIproliferationindex细胞增殖指数HⅡhypoxiainduciblefactor缺氧诱导因子KDkilodalton千道尔顿DEPCdiethypyrocarbonate焦碳酸二乙酯PBSphosphatebufferedsaline磷酸缓冲液EBethidiumbromide溴化乙啶HRPhorseradishperoxidase辣根过氧化物

3、酶10精品参考文献资料优秀毕业论文南京医科大学硕士学位论文论文独创性声明本论文垦堡鳗墅签丛生羞丝厶垂塞查垂塾羞鱼丝丝丝堂堑丝丝受煎盈旦堡!垡蕉厶垂塞叠垂塾羞鱼丝主丝盔垄丝盈霾是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均在论文中作了明确的声明并表示了谢意。专业：趣蝤滥堂作者签名：趁墨日期：趟：旦查：!艺论文使用授权声明本人完全了解南京医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许

4、论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名：丕盛叁导师签名：期：皇夕孑．6．扣精品参考文献资料优秀毕业论文南京医科大学硕士学位论文EGCG对体外培养的人毛囊和毛乳头细胞生物学活性的影响及HIF．1仅在人毛囊和毛乳头细胞中的表达的研究中文摘要毛囊是哺乳动物特有的一种结构复杂的皮肤附属器官，是一个富含干细胞，由神经外胚层和中胚层交互作用形成的系统。一生不断经历生长期、退行期和休止期的周期性循环．毛乳头对诱导和维持毛囊的周期性循环必不可少，其大小决定

5、了毛囊的大小和生长期的长短。毛乳头细胞具有确定和维持毛母质细胞增殖分化的作用，而毛球部毛母质细胞的增殖分化是毛囊周期性生长调控的关键。与其他组织器官的再生一样，上皮细胞与相应间质细胞间的相互作用在毛囊的周期性生长调控中具有重要意义。绿茶是一种全世界受到广泛欢迎的饮料，EGCG是绿茶茶多酚的主要活性成分之一，具有广泛的生物学活性，已有大量研究表明其具有清除氧自由基抗氧化、抗肿瘤及对紫外线辐射的光保护等作用【11．但EGCG对毛发生长及毛乳头细胞增殖的影响国内还未见报道。低氧诱导因子一l(hypoxiainduciblefactor-1

6、，HIF．1)是1992年由Semenza[2]在Hep3B细胞株中发现的一种DNA结合蛋白，可调控多种基因的表达。其中HIF．1a是专一调节02的HIF．1亚单位，决定了HIF．1的活性，它与靶基因结合，促进其转录，使机体产生一系列低氧适应反应。现已证实HIF有调节红细胞生成、铁代谢、血管形成和葡萄糖代谢等多种作用，同时随着对HIF．1a研究的进展，发现其与精品参考文献资料优秀毕业论文南京医科大学硕士学位论文细胞生长的各种应答机制有密切的关系【3】。由于毛囊生长的关键部位(毛球部)深埋于真皮深层，皮肤表面的局部用药很难渗透到毛球部

7、，而成纤维细胞紧邻表皮下方，并包裹在毛囊周围。我们研究小组前面的研究中已经做到将目的基因HIF．10t通过脂质体直接导入成纤维细胞，导入后在毛囊周围的成纤维细胞表达弄口分泌某些关键因子，如VEGF,FGF等，从而发挥促毛发生长的作用，达到治疗毛发疾病的目的。作为该课题的一部分，本实验证明了HIF—lot在毛囊和培养的毛乳头细胞中的表达，进一步为研究HIF．1a促进毛发生长的机理提供了理论依据。本课题的研究主要包括以下两部分：(一)EGCG对体外培养的人毛囊和毛乳头细胞生物学活性的影响显微分离人毛囊，在加入不同质量浓度EGCG(0～2

8、50me／L)的WilliamsE培养基中培养，观察毛囊生长情况；利用两步酶法分离培养人毛乳头细胞，加入不同质量浓度的EGCG(0～500me／L)，48h后，利用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期。结果显示与空白