检验还原性糖、脂质和蛋白质

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1、实验三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质生本1201班刘艳芝教学设计一、教学目标知识目标：阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。能力目标：培养学生主动获取知识，应用知识分析现象，归纳总结的能力，培养学生实际操作的能力及从现象出发探求事物本质的能力。情感与价值目标：通过亲手实验体验严谨的科学态度，培养实事求是的世界观。二、教学重点：掌握检测生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。三、教学难点：实验内容较多，实验时间长，必须周密安排，才

2、能按时完成。学生要分工合作、教师指导演示。四、材料用具：实验材料：葡萄糖液、苹果组织液，植物油滴、浸泡过的花生种子或新鲜的花生种子，鸡蛋蛋白稀释液、黄豆组织液。实验材料的选择：（1）可溶性还原糖的鉴定实验：生物组织中的糖类有还原糖和非还原糖两类。常见的还原糖有葡萄糖、果糖和麦芽糖；蔗糖（甘蔗茎、甜菜的块根等）、淀粉（马铃薯、番薯的块茎等）是非还原糖。本实验最理想的实验材料是还原糖含量较高的植物组织，而且要求组织的颜色较浅或近于白色，如苹果和犁的果实，也可以用白色的甘蓝叶、白萝卜替代。经实验比较，颜色反应的明显程度依次为：苹果、梨、白色甘蓝叶和白萝卜。在双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖

3、形成后，合成为淀粉暂时储存在叶子内，因此最好不用双子叶的叶子作为实验的材料。有些单子叶植物，如韭菜，叶子内虽然含有大量的可溶性还原糖，但由于叶片中叶绿素颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着遮盖作用，导致实验现象不明显，一般也不选用。（2）脂肪的鉴定：所用材料的要求：一，脂肪含量高；二，大小适宜做徒手切片。花生种子符合上述要求，故选用花生种子。实验前要将花生种子浸泡3~4h，有利于切成薄片，但浸泡时间也不宜过长，否则组织太软，切下的薄片不易成形。（3）蛋白质的鉴定：实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官)，植物材料常用的是大豆种子，动物材料常用的是鸡蛋(卵白)。如用大豆种子，应当提前浸泡

4、并研磨成浆。若用鸡蛋清，应按要求进行稀释，否则影响实验效果，而且实验后易粘住试管壁不易洗刷。仪器：徒手切片刀，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。试剂：斐林试剂，苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂A、双缩脲试剂B，体积分数为50％的酒精溶液，蒸馏水。五、教学过程：（一）实验原理：还原糖的鉴定原理：生物组织中普遍存在的还原糖，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性化学基团（游离醛基或游离酮基等），因此叫做还原糖。蔗糖的分子内没有还原性化学基团，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。用斐林试剂只能检验生物组织中

5、还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。斐林试剂由质量浓度为0.1g／mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g／mL的硫酸铜溶液等体积混合配制而成。二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与葡萄糖在水浴加热的条件下，发生氧化还原反应，生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。其反应式如下：CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。脂肪的鉴定原理：脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色：苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶

6、解度大，当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时，酒精中的苏丹Ⅲ进入脂肪中，将脂肪染成橘黄色。脂肪也能够被苏丹Ⅳ染液染成橘红色。蛋白质的鉴定原理：鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲试剂进行检测和鉴定。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g／mL的氢氧化钠溶液（双缩脲试剂A）和质量浓度为0.01g／mL的硫酸铜溶液（双缩脲试剂B）。在碱性溶液(NaOH)中，蛋白质能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，从而使待测溶液呈紫色。淀粉的鉴定原理：淀粉溶液遇碘变蓝。（二）操作指导：1.实验成功的关键在于实验材料的选择。[1]在做可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含还原糖糖量较

7、高，且组织的颜色较浅（最好是白色或近于白色）的植物组织。否则，材料自身颜色对实验过程中颜色变化的的观察会产生掩盖，而不利于观察。[2]在做脂肪的鉴定实验中，我们选用富含脂肪的花生种子做实验材料。做徒手切片时，提醒学生注意安全，切片要求薄且平整。[3]在蛋白质的实验时，选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋。[4]做鉴定还原糖和蛋白质的实验前，可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色做比较