乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶9在胃癌中的表达及临床意义

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1、乙酰肝素酶和基质金属蛋白酶9在胃癌中的表达及临床意义【关键词】胃肿瘤;乙酰肝素酶;基质金属蛋白酶9;免疫组织化学[ABSTRACT]Objective:Toinvestigatetheclinicopathologicalsignificanceoftheexpressionofheparanase(Hpa)andMMP9,anditsrelationshiptoprogressingingastriccarcinoma.Methods：TheexpressionofHpaandMMP9munohistochemistrySABC

2、in65gastriccarcinomacasesand20adjacentnonneoplastictissues.ThepositiveratiosofHpaandMMP9atissuesandadjacentnonneoplastictissuesasphnodemetastasis.ThecorrelationanalysisofHpaandMMP9expressioningastriccarcinomatissueatissuethanthatinadjacentnonneoplastictissue(P<0.0

3、1),andtheirexpressionscorrelatedtotheinvasiondepthandlymphaticmetastasis(P<0.05),andalsoHpaexpressionatissue(rs=0.531，P=0.000).Conclusion：HpaandMMP9mayplayanimportantroleintheinvasionandmetastasisofgastriccarcinomaandcanbeaprognosticindicator.　　[KEYatrixmetalloprotein

4、ase9;Immunohistochemistry　　肿瘤细胞的侵袭和转移是一个复杂的多步骤过程。乙酰肝素酶(Hpa)是目前已确定的唯一能够降解硫酸乙酰肝素蛋白多糖基因(HSPG)的蛋白酶,通过特异性降解HSPG发挥其促进肿瘤细胞侵袭和转移的作用;基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinases9，MMP9)是一种锌离子依赖性内肽酶，主要降解细胞外基质和基底膜中的胶原蛋白，在破坏细胞外基质和基底膜的屏障作用、促进肿瘤细胞侵袭和转移的过程中同样具有作用。HpamRNA的检测在多种肿瘤中已有研究报道，但目前联合检测Hp

5、a和MMP9在胃癌中的表达少有报道，本实验对65例胃癌切除标本Hpa和MMP9的表达进行了检测，现报道如下。　　1材料与方法　　1.1研究对象　　选取河源市人民医院2003～2005年胃癌手术切除标本65例，男性47例，女性18例，年龄35～78岁，中位年龄60岁，其中有淋巴结转移者40例。所有病例术后均经病理证实。另取癌旁非瘤组织20例作为对照，癌旁组织距离肿瘤边缘不小于5cm。　　1.2Hpa、MMP9的检测　　采用免疫组化SABC法进行检测。Hpa抗体、即用型SABC免疫组化染色试剂盒及DAB显色试剂盒购于武汉博士得生物工程有

6、限公司;兔抗人MMP9多克隆抗体为北京中山生物技术有限公司产品，均在4℃冰箱保存。用已知的阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。　　1.3结果判定标准　　1.3.1HpaHpa以细胞膜和/或细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性判断标准，以染色强度和阳性细胞比例评定阳性表达。参照Friedmann等[1]的方法，每张切片随机观察5个视野，每个视野观察100个肿瘤细胞，计数500个肿瘤细胞中阳性染色的细胞数，阳性细胞记数仅限于肿瘤细胞染色。染色强度分级如下：无着色为0，淡黄色为1，黄色及更深颜色为2;阳性细胞数分级为:阳性细胞数小于50

7、%为0，50%～75%为1，>75%为2。染色强度分级与阳性细胞数分级两项得分相乘结果≥2为阳性表达。　　1.3.2MMP9MMP9以细胞浆和/或细胞膜内出现棕黄色颗粒为阳性判断标准，参照Liaball等[2]的方法，每张切片随机观察5个视野，每个视野观察100个肿瘤细胞，计数500个肿瘤细胞中阳性染色的细胞数，阳性细胞计数仅限于肿瘤细胞染色，10%及以上细胞阳性染色的切片为阳性，10%以下阳性染色的切片为阴性。　　1.4统计学处理　应用SPSS10.0统计软件，行χ2检验或精确概率法及Spearman相关性检验，检验水准α=0

8、.05。　　2结果　　2.1Hpa的表达　　Hpa蛋白阳性表达主要位于细胞浆和/或细胞膜，肿瘤间质中的血管内皮细胞、巨噬细胞和淋巴细胞也偶有阳性表达，胃癌中Hpa的阳性表达率为60%(39/6