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时间:2018-07-07
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1、紫苏提取物抗氧化活性及酚性成分的研究论文冯蓉洁,吕佩惠,盛振华,吴巧凤【摘要】目的研究紫苏体外抗氧化活性。方法在测定紫苏各酚性成分含量基础上,采用体外抗氧化实验,研究其DPPH清除能力、总还原力和抗脂质体氧化能力。结果75%乙醇和50%丙酮提取物具有良好的抗氧化活性;紫苏提取物中总黄酮、原花色素含量与其抗氧化能力之间呈正相关。结论紫苏有显著的抗氧化活性,呈一定的量-效关系。其抗氧化活性可能与黄酮类化合物有关。紫苏提取物可作为一种良好的天然抗氧化剂应用于临床。【关键词】紫苏总黄酮原花色素抗氧化活性紫苏为唇形科紫苏属Perillafrutescen
2、s(L.)Britt.一年生草本植物,是传统的药食两用中药.freela公司。其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1供试品溶液的制备取5g紫苏药材粉末,分别按表1加入20倍量提取溶剂,70℃水浴提取2次,1h/次,合并滤液,浓缩至干,临用前配成所需浓度,作为供试品溶液。2.2紫苏酚性物质的含量测定[4~6]采用FeCl3-K3Fe()6比色法,以没食子酸为标样制作标准曲线,测定紫苏中总酚酸含量;采用香草醛/硫酸比色法,以儿茶素为标样制作标准曲线,测定其原花色素含量;采用碱式铝盐比色法,以芦丁为标样制作标准曲线,测定其总黄酮含量。2.3抗氧化活性
3、实验[7~9]2.3.1清除自由基活力取提取物适量,加入25μg/ml的DPPH甲醇溶液3.5ml,快速混匀,30min后测定在516nm处的吸光度。计算DPPH清除率:清除率(%)=(1-[DPPH]t/[DPPH]t=0)×100%。其中[DPPH]t表示30min时体系的吸光度;[DPPH]t=0表示0时刻体系的吸光度。2.3.2还原力测定取提取物适量,加入磷酸缓冲液(0.2mol/L,pH6.6)2.5ml及1%铁氰化钾溶液1.5ml,50℃保温20min后,加入10%三氯乙酸1.5ml,混匀后取2.5ml,加入蒸馏水2.5ml及0.1
4、%三氯化铁0.3ml。在700nm处测定反应液吸光度值。吸光度值越大,表示还原力越强。2.3.3脂质体氧化法将大豆卵磷脂分散于去离子水中,20kHz超声波处理30min,周围以冰水冷却,制得大豆磷脂浓度为0.8%的人工脂质体。取20ml脂质体,加入提取物,以10mmol乙酸铜20μl催化氧化反应,混匀后放置于回转式恒温水浴振荡器上,于暗处37℃、100r/min进行开口氧化实验,每隔一定时间测定共轭二烯氢过氧化物及丙二醛生成量。共轭二烯氢过氧化物(CD)的测定:取1ml氧化液,溶于3ml甲醇,于234nm处测定其吸光度,以摩尔消光系数ε=260
5、00L·mol-1·cm-1计算脂质体体系中共轭二烯氢过氧化物的生成量(mmol/kg卵磷脂)。丙二醛(MDA)的测定:取1.5ml氧化液,加入1mlMDA溶液,测定在532nm处的吸光度,以摩尔消光系数ε=1.56×105L·mol-1·cm-1计算丙二醛的生成量(mmol/kg卵磷脂)。抗氧化效果用抑制率表示:抑制率(%)=(1-处理氧化产物生成量/空白氧化产物生成量)×100%结果见表1及图1~4。表1紫苏酚性物质组成及抗氧化作用结果(略)图1紫苏提取物的还原力图2紫苏提取物对DPPH的清除作用(略)图3丙二醛的生成(略)由表1和图1~4
6、可知,紫苏各提取物均具有较强的抗氧化活性,可提高自由基的清除率,促进Fe3+的还原和抑制卵磷脂氧化产物的生成。其中,75%乙醇提取物自由基的清除率最强,50%丙酮提取物的还原力最强,两者均可显著抑制自由基的产生,延长CD生成的峰值时间,减少同期各时段MDA的生成量。图4共轭二烯氢过氧化物的生成(略)2.4酚性物质组成与抗氧化活性相关性分析以原花色素(X1)、总黄酮(X2)和总酚酸(X3)含量为横坐标,还原力(Y)为纵坐标,采用SPSS11.5软件对表1结果进行线性关系考察,得方差分析结果(见表2)和回归标准残差正态P-P图(图5)。表2方差分析
7、表(略)由表2和图5可知,P0.01,自变量(Xn)与因变量(Y)服从正态分布,证明紫苏各酚性物质含量与还原力之间存在显著的线性关系。进而作多元线性回归分析,得回归系数分析。结果见表3。图5回归标准残差正态P-P图(略)表3回归系数分析(略)由表3可知,紫苏酚性物质含量对还原力的总体回归方程为:Y=0.160-0.534X1+0.02492X2+0.01829X3。为消除度量单位的影响,进一步采用标准化计算,得标准化回归方程:Y=-0.491X1+0.468X2+0.056X3。在95%可信区间内,线性相关系数r=0.9828。证明回归方程真实
8、、可靠,具有统计学意义。可用于替代实验点对实验结果进行分析,并对回归方程各项作显著性检验。其中,总酚酸含量对还原力的影响P0.05,无显著性差异。而原
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