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时间:2018-07-06
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1、罐疗提高盐酸川芎嗪透皮吸收的研究【摘要】 目的研究中医传统付罐疗法促进中药活性成分盐酸川芎嗪透皮吸收,优选最佳罐疗方法、条件。方法采用正交实验法,以中药活性成分盐酸川芎嗪24h累积渗透量为测评指标,比较不同罐法、压力、罐疗时间对盐酸川芎嗪透皮吸收的影响。结果最佳罐疗条件为:刮罐、高压力、15min。结论罐疗能显著地提高中药活性成分盐酸川芎嗪的透皮率,可以作为一种新的物理促进药物透皮渗透的方法。【关键词】罐疗盐酸川芎嗪透皮吸收正交实验 研究发现,罐疗作用下皮部产生均匀散在的龟裂样裂缝,经自然型电镜观察测定,可穿透角质层,经原子示
2、踪(In)测定,在内关穴处,可使透皮率提高3.8倍,为提高药物透皮率提供了一个物理方法:张力裂缝的方法。本项研究进一步证实了罐疗的此项作用,并结合中医传统罐法的留罐、颤罐、刮罐,在不同压力(低、中、高),不同罐疗时间(5,10,15min)下,通过正交实验,优选出最优的罐疗提高中药活性成分盐酸川芎嗪透皮率的条件,进一步证实了罐疗可以作为一种新的物理促进药物透皮渗透的方法,为大幅提高靶向透皮药物的透皮率,提供一套新型的、实用的、可靠的方法。 1仪器与材料 1.1仪器 TK-12B型透皮扩散试验仪(上海铠凯科技贸易有限公司);2
3、两种规格,每贴含盐酸川芎嗪150mg),氯化钠(成都金山化学试剂有限公司),甲醇(色谱纯,江苏汉邦科技有限公司),水为重蒸水。盐酸川芎嗪对照品(中国药品生物制品检定所批号:0817-9803),付罐:贵阳中医学院研制,可适于不同的罐疗法。 1.3动物日本种大白兔,雌雄兼用,体重2.1~2.3kg,由贵阳医学院动物房提供。 2方法与结果 2.1罐疗方法〔1〕 2.1.1留罐调定罐内压力,至规定时间时去罐。 2.1.2颤罐将付罐施于穴位处,用压力调节阀不断调节罐内压力,至规定时间去罐。 2.1.3刮罐调定罐内压力,来回移动
4、付罐,至规定时间去罐。 2.2透皮给药 2.2.1离体兔皮的制备先用剪刀剪去兔背部的毛,再用电动理发器除去兔背部的绒毛,处死,剥取背部皮肤,小心去除皮下脂肪等组织,然后置1/1000苯扎溴铵(新洁尔灭)溶液中浸泡30min防腐,取出后用生理盐水反复冲洗,直至洗液澄清为止,剪成适当的大小,最后置于密封袋中,加入适量的生理盐水,放入冰箱中(-20℃)冷冻保存(两周内用完)。 2.2.2扩散装置及介质采用TK-12B型透皮扩散试验仪。扩散池接收室中央部直径为1.93cm,面积2.92cm2,接受室容积为6ml;接受液为P=0.9
5、%NaCl溶液。 2.2.3透皮贴剂的体外透皮实验实验前从冰箱中取出备用皮肤隔日融冻(0~5℃),用生理盐水反复淋洗至洗液澄清,滤纸吸干,调定罐内压力,按不同罐法施于皮肤,至规定时间后去罐,将盐酸川芎嗪贴剂贴于该处兔皮上(留罐、颤罐后皮肤处贴8.76cm2贴剂,刮罐后皮肤处贴17.52cm2贴剂),接受室加满扩散介质,以37℃水浴保温,磁力搅拌子以200r/min的速度搅拌,间隔一定时间(1,2,4,6,8.12,16,24h)取出接收室中全部接收液,立即补加等量的新鲜扩散介质。接收液以0.45μm的微孔滤膜过滤,弃去初滤液,收
6、集续滤液1ml(必要时可将1ml续滤液用生理盐水稀释至10ml),进样测定。按下列公式计算单位面积累积渗透量: Q=Cn×V/ACn=C1十C2十……+Cj 式中Q为单位面积累积渗透量(单位:mg/cm2),A为接收池面积(单位:cm2),V为接收室体积(单位:ml),j=1,2,4,6,8,10,12,16,24h 再按列公式计算不同罐疗方法后盐酸川芎嗪贴剂24h累积渗透量(mg): 累积渗透量=Q×A 式中Q同上,A为盐酸川芎嗪贴剂面积(cm2)。 2.3正交实验设计采用L9(34)交表进行实验,以盐酸川芎嗪24h
7、累积渗透量为测评指标,考察罐法、压力、罐疗时间3个因素对盐酸川芎嗪透皮吸收的影响。因素水平详见表1。表1正交设计因素与水平(略) 由于不同的罐疗方法所对应的压力含义不同,所以 2.4含量测定 2.4.1色谱条件色谱柱为美国DikmaDiamonsilTMC18(5μm,250mm×4.6mm);流动相为甲醇:水(50:50,V/V);检测波长282nm;流速1.0ml/min;柱温30℃;灵敏度2AUFS;进样量:5μl。在此分离条件下,分离良好。 2.4.2标准曲线的绘制取盐酸川芎嗪对照品9.08mg置100ml容量瓶中
8、,用甲醇稀释至刻度摇匀,即得对照品储备液。分别取对照品储备液0.1,0.5,1,3,5,7ml于10ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。在上述色谱条件和色谱系统下,依次进样(包括对照品储备液),以盐酸川芎嗪峰面积为横坐标,浓度为纵坐标,绘制标准曲
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