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时间:2018-07-07
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1、观察复方丹参片对糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用【关键词】复方丹参片;,,糖尿病周围神经病变;,,山梨醇 摘要:目的观察复方丹参片对糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用,并分析其作用机制。方法采用链脲佐菌素诱发DM大鼠模型。造膜1周后开始用不同剂量的复方丹参片进行治疗。用药4周后观察各组大鼠血糖(FBG)、糖化血清蛋白(GSP)、体重()常见的慢性并发症之一。高血糖引起糖基化终末产物(advancedglycosylationendproducts,AGEs)形成增加、多元醇代谢异常是导致糖尿病周围神经病变的重要原因之一。本实验用链脲佐菌
2、素制成大鼠DM模型,观察复方丹参片对实验性糖尿病大鼠糖化血清蛋白、坐骨神经和红细胞山梨醇水平的影响,并探讨其作用机制。 1器材与方法 1.1药品与试剂复方丹参片,由宁夏启元药业有限责任公司提供,批号051029(每片含丹参酮ⅡA0.38mg,丹参酚酸B5.0mg),实验前粉碎,过80目筛,溶于新鲜蒸馏水中,配成适当浓度贮存于4℃冰箱中备用;链脲佐菌素,(streptozotocin,STZ)、山梨醇为美国Sigma公司产品。 1.2仪器美国贝克曼公司DU640紫外/可见分光光度计,南京产大白鼠恒温手术台,美国罗氏公司稳豪型全微量血
3、糖检测仪,成都泰孟公司BL420生物机能实验系统,德国Herml2g/kg(溶于0.1mol/L枸橼酸缓冲液中,pH4.5,配成1%的浓度,新鲜配制),72h后由尾静脉采血测血糖,凡血糖值大于16mmol/L即为糖尿病模型鼠。 1.4给药方法造膜后,复方丹参片按生药量计算,以临床常用剂量折成大鼠近似等效剂量,大剂量组灌胃4.13g/kg,中剂量组灌胃2.08g/kg,小剂量组灌胃1.04g/kg〔1,2〕;阳性对照组和正常对照组灌胃相同体积的蒸馏水;5组均灌胃1次/d。以上处理方法每2周根据体重变化随时调整。饲养期间饮水和饲料不加限制
4、,连续给药4周。末次给药后禁食12h,苯巴比妥腹腔注射麻醉,心腔取血检测相应指标。 1.5指标测定一般性指标测定。每2周测定1次大鼠24h进食量、饮水量及体重。采用浙江东瓯生物工程有限公司的试剂盒检测糖化血清蛋白含量。 1.5.1红细胞、坐骨神经山梨醇含量测定参照〔3〕方法,采用化学法测定。红细胞样品处理:肝素抗凝血,3000r/min离心15min,弃血浆,留取红细胞用10倍体积生理盐水洗涤3次,压积红细胞用生理盐水1∶3稀释,取0.5ml红细胞稀释液,加等量双蒸水破膜,然后加2.3ml预冷6%过氯酸沉淀蛋白,4000r/min离
5、心5min,取上清液则定。结果以μmol/g组织表示,血红蛋白定量采用氰化高铁血红蛋白法〔4〕。坐骨神经样品处理:大鼠腹腔注射苯巴比妥麻醉后,俯卧位固定,分离并取出双侧坐骨神经,用生理盐水洗净血液,加4%预冷过氯酸1.5ml匀浆,3000r/min离心,10s,3次,取上清液测定。结果以μmol/g组织表示〔4〕。 1.5.2坐骨神经传导速度测定参照文献〔5〕方法,采用成都泰孟BL420生物机能实验系统处理,结果以动作电位出现的潜伏期与动作电位传导的距离比值(m/s)表示。 1.6统计学处理数据用SPSS11.5统计学软件处理,各样
6、本均数比较采用单用因素方差分析。 2结果 2.1复方丹参片对STZ糖尿病大鼠血糖、体重的影响造膜前各组动物体重均无明显差异,造膜后1周与正常对照组相比,阳性对照组动物血糖明显升高,体重明显减轻(P<0.05)。治疗4周后,治疗组大鼠血糖虽较DM组低,体重增加,但无统计学意义(P>0.05)。 2.2复方丹参片对STZ糖尿病大鼠神经传导速度的影响结果显示,与正常对照组相比,阳性对照组大鼠神经传导速度减慢(P<0.05)。治疗4周后,神经传导速度改善,与DM组相比,复方丹参片大剂量组、中剂量组神经传导速度明显增快(P<0.05)。
7、2.3复方丹参片对STZ糖尿病大鼠糖化血清蛋白的影响结果显示,与正常对照组相比,阳性对照大鼠糖化血清蛋白含量明显升高(P<0.05)。治疗4周后,各治疗组糖化血清蛋白含量明显低于DM组(P<0.05)。结果见表1。 表1复方丹参片对糖尿病大鼠糖化血清蛋白的影响(略) 与正常对照组比较,*P<0.05,△P<0.01;与DM组比较,#P<0.05 2.4复方丹参片对STZ糖尿病大鼠红细胞、坐骨神经山梨醇含量的影响结果显示,阳性对照组大鼠红细胞、坐骨神经山梨醇含量与正常对照组相比明显升高(P<0.05)。治疗4周后,治疗组红细胞、坐骨
8、神经山梨醇含量明显低于DM组(P<0.05)。结果见表2。 表2复方丹参片对糖尿病大鼠红细胞、坐骨神经山梨醇含量的影响(略) 与正常组比较,*P<0.05;与糖尿病组比较,△P<0.05 3讨论 持
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