观察复方丹参片对糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用

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1、观察复方丹参片对糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用【关键词】复方丹参片；,,糖尿病周围神经病变；,,山梨醇　　摘要：目的观察复方丹参片对糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用，并分析其作用机制。方法采用链脲佐菌素诱发DM大鼠模型。造膜1周后开始用不同剂量的复方丹参片进行治疗。用药4周后观察各组大鼠血糖（FBG）、糖化血清蛋白（GSP）、体重（）常见的慢性并发症之一。高血糖引起糖基化终末产物（advancedglycosylationendproducts,AGEs）形成增加、多元醇代谢异常是导致糖尿病周围神经病变的重要原因之一。本实验用链脲佐菌

2、素制成大鼠DM模型，观察复方丹参片对实验性糖尿病大鼠糖化血清蛋白、坐骨神经和红细胞山梨醇水平的影响，并探讨其作用机制。　　1器材与方法　　1.1药品与试剂复方丹参片，由宁夏启元药业有限责任公司提供，批号051029（每片含丹参酮ⅡA0.38mg，丹参酚酸B5.0mg），实验前粉碎，过80目筛，溶于新鲜蒸馏水中，配成适当浓度贮存于4℃冰箱中备用；链脲佐菌素，（streptozotocin,STZ）、山梨醇为美国Sigma公司产品。　　1.2仪器美国贝克曼公司DU640紫外/可见分光光度计，南京产大白鼠恒温手术台，美国罗氏公司稳豪型全微量血

3、糖检测仪，成都泰孟公司BL420生物机能实验系统，德国Herml2g/kg（溶于0.1mol/L枸橼酸缓冲液中，pH4.5，配成1%的浓度，新鲜配制），72h后由尾静脉采血测血糖，凡血糖值大于16mmol/L即为糖尿病模型鼠。　　1.4给药方法造膜后，复方丹参片按生药量计算，以临床常用剂量折成大鼠近似等效剂量，大剂量组灌胃4.13g/kg，中剂量组灌胃2.08g/kg，小剂量组灌胃1.04g/kg〔1，2〕；阳性对照组和正常对照组灌胃相同体积的蒸馏水；5组均灌胃1次/d。以上处理方法每2周根据体重变化随时调整。饲养期间饮水和饲料不加限制

4、，连续给药4周。末次给药后禁食12h，苯巴比妥腹腔注射麻醉，心腔取血检测相应指标。　　1.5指标测定一般性指标测定。每2周测定1次大鼠24h进食量、饮水量及体重。采用浙江东瓯生物工程有限公司的试剂盒检测糖化血清蛋白含量。　　1.5.1红细胞、坐骨神经山梨醇含量测定参照〔3〕方法，采用化学法测定。红细胞样品处理：肝素抗凝血，3000r/min离心15min，弃血浆，留取红细胞用10倍体积生理盐水洗涤3次，压积红细胞用生理盐水1∶3稀释，取0.5ml红细胞稀释液，加等量双蒸水破膜，然后加2.3ml预冷6%过氯酸沉淀蛋白，4000r/min离

5、心5min，取上清液则定。结果以μmol/g组织表示，血红蛋白定量采用氰化高铁血红蛋白法〔4〕。坐骨神经样品处理：大鼠腹腔注射苯巴比妥麻醉后，俯卧位固定，分离并取出双侧坐骨神经，用生理盐水洗净血液，加4%预冷过氯酸1.5ml匀浆，3000r/min离心，10s，3次，取上清液测定。结果以μmol/g组织表示〔4〕。　　1.5.2坐骨神经传导速度测定参照文献〔5〕方法，采用成都泰孟BL420生物机能实验系统处理，结果以动作电位出现的潜伏期与动作电位传导的距离比值（m/s）表示。　　1.6统计学处理数据用SPSS11.5统计学软件处理，各样

6、本均数比较采用单用因素方差分析。　　2结果　　2.1复方丹参片对STZ糖尿病大鼠血糖、体重的影响造膜前各组动物体重均无明显差异，造膜后1周与正常对照组相比，阳性对照组动物血糖明显升高，体重明显减轻（P＜0.05）。治疗4周后，治疗组大鼠血糖虽较DM组低，体重增加，但无统计学意义（P＞0.05）。　　2.2复方丹参片对STZ糖尿病大鼠神经传导速度的影响结果显示，与正常对照组相比，阳性对照组大鼠神经传导速度减慢（P＜0.05）。治疗4周后，神经传导速度改善，与DM组相比，复方丹参片大剂量组、中剂量组神经传导速度明显增快（P＜0.05）。　　

7、2.3复方丹参片对STZ糖尿病大鼠糖化血清蛋白的影响结果显示，与正常对照组相比，阳性对照大鼠糖化血清蛋白含量明显升高（P＜0.05）。治疗4周后，各治疗组糖化血清蛋白含量明显低于DM组（P＜0.05）。结果见表1。　　表1复方丹参片对糖尿病大鼠糖化血清蛋白的影响（略）　　与正常对照组比较,*P＜0.05,△P＜0.01;与DM组比较,#P＜0.05　　2.4复方丹参片对STZ糖尿病大鼠红细胞、坐骨神经山梨醇含量的影响结果显示，阳性对照组大鼠红细胞、坐骨神经山梨醇含量与正常对照组相比明显升高（P＜0.05）。治疗4周后，治疗组红细胞、坐骨

8、神经山梨醇含量明显低于DM组（P＜0.05）。结果见表2。　　表2复方丹参片对糖尿病大鼠红细胞、坐骨神经山梨醇含量的影响（略）　　与正常组比较,*P＜0.05;与糖尿病组比较,△P＜0.05　　3讨论　　持