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《枳实提取物中类黄酮的高效液相色谱法测定及其抗氧化作用研究 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、枳实提取物中类黄酮的高效液相色谱法测定及其抗氧化作用研究【摘要】 目的建立了枳实中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦丁、槲皮素含量的测定方法，同时测定了枳实提取物的抗氧化作用。方法采用HPLC法，色谱柱：PhenomenexGeminiC18柱(150mm×4.6mm，5μm)，柱温37℃，流动相为乙腈-磷酸溶液，检测波长280，365nm，流速1.0ml/min。采用DPPH·测定枳实提取物的自由基清除能力。结果进样量范围：柚皮苷为1.143～5.717μg，橙皮苷为0.092～0.459μg，新橙皮苷为1.179～5.
2、895μg，芦丁为0.024～0.118μg，槲皮素为0.079～0.395μg。柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的平均回收率分别为99.604%，100.150%，100.249%。RSD分别为0.515%，4.390%，0.774%。枳实提取物对DPPH·清除作用是柚皮苷的17.6倍。结论HPLC测定法简便、准确，可用于测定枳实类黄酮含量，同时枳实提取物具有较强的自由基清除作用。【关键词】枳实；类黄酮；高效液相色谱法；抗氧化作用 Abstract：ObjectiveToestablishanHPLCmethodforde
3、terminationofnaringin,hesperidin,neohesperidin,rutinandquercetininCitrusaurantiumL.,andtostudyantioxidantactivity.MethodsThesamplesatographicconditionsenexGeminiC18column(150mm×4.6mm,5μm),columntemperatureat37℃,mobilephaseofacetonitrile-phosphatesolution,detecti
4、onor365nm,flol/min.Inaddition,DPPHradical-scavengingployedtomeasureantioxidantactivities.ResultsThecalibrationcurvesL.flavoniodsesofnaringin.ConclusionThemethodissimple,accuratefordetectingflavoniodsinC.aurantiumL.,andtheC.aurantiumL.extracthasantioxidantactivit
5、ies. KeyL.；Flavoniods;Highperformanceliquidchromatography;Antioxidantactivity 枳实为芸香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培变种或甜橙CitrussinensisOsbeck的干燥幼果，具有破气除痞、化痰消积的功效，是中医临床常用药物〔1〕。 关于测定枳实类黄酮的HPLC法大部分报道是测定柚皮苷、橙皮苷〔2，3〕，而对于新橙皮苷、芦丁、槲皮素的测定，少有报道，同时对于枳实类黄酮的抗氧化作用未见报道。本研究采用HPLC测定
6、枳实中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦丁、槲皮素的含量，同时测定了枳实类黄酮对DPPH自由基的清除作用，为枳实药用的深入研究提供基础。 1材料、试剂与仪器 枳实购买自成都荷花池中药材市场（经鉴定为酸橙幼果CitrusaurantiumL）；芦丁(生物制品检定所，批号100080-200306)、柚皮苷、新橙皮苷(sigma）；槲皮素、橙皮苷（Fluka）；2,2-二苯代苦味酰基（2,2-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）（sigma）。乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。enexGeminiC
7、18(150mm×4.6mm，5μm)，柱温37℃，流动相A：100%乙腈，B:0.075%磷酸溶液，梯度洗脱：0%～15min，A（15%～20%）；15～20min,A(20%～80%);20～23min,A(80%～100%);23～24min,A(100%～15%);24～30min,A(15%)。流速1.0ml/min，检测波长分别是280，365nm，进样量10μl。 2.3DPPH·的清除作用〔4〕准确称取2,2-二苯代苦味酰基标准品20mg，无水乙醇溶解定容至500ml，得浓度为0.04mg/ml溶液
8、。取此溶液3ml，加入不同浓度的试样溶液1ml，室温，30min，测定吸光度值A515nm，空白组以1ml无水乙醇代替试样，并按下式计算清除率： DPPH·清除率（%）=（1-A试样/A空白）×100% 3结果 3.1线性关系的确定分别精密称取柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、芦丁及槲皮素对照品142.920，147.375，11.
