蒜氨酸+蒜酶共同作用对环磷酰胺处理小鼠免疫功能的调节作用论文

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1、蒜氨酸+蒜酶共同作用对环磷酰胺处理小鼠免疫功能的调节作用论文陈锋，顾丹今，陈坚，许晏【摘要】目的观察蒜氨酸+蒜酶对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的调节作用。方法环磷酰胺造模法制作免疫抑制小鼠模型，给药10d，测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率、血清溶血素、脾淋巴细胞增殖功能及血清IL-2含量，观察蒜氨酸+蒜酶对小鼠免疫功能的影响。结果与模型组比较，蒜氨酸+蒜酶在中、高剂量可明显提高环磷酰胺所致免疫低下小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬率.freelgarliconimmunologicalfunctioninimmunosuppressivemodelmi

2、cecausedbycyclophosphamide.MethodsTheISmodelinNIHmiceide:Miceinisteredacrophare,serumhemolysinconcentration,thespleenlymphcellstransformationandthelevelofIL-2inserumeasured.ResultsTheresultsshoiddleandhighdosecouldcauseasignificantincreaseofthephagocyticrate,theproliferat

3、ionofspleenocyteesandtheserumhemolysin,alliin+alliinaseathighdosecouldincreasethelevelofIL-2.ConclusionAlliin+alliinasecanstimulatetheimmunologicfunctionofISmiceKeyide;Immunologicalfunction大蒜是百合科葱属多年生草本植物，作为药食两用历史悠久。现代医学证明大蒜主要具有抗感染、抗肿瘤和防治心脑血管疾病等3大功效。目前公认大蒜的生物活性成分主要是蒜酶（all

4、iinase)催化蒜氨酸产生的大蒜辣素(allicin)、阿霍烯(ajoene)等系列含硫有机化合物［1］。大蒜的抗肿瘤作用与其免疫调节作用有关。大蒜不同制剂对机体免疫功能的影响已有广泛报道。本实验研究了蒜氨酸+蒜酶对环磷酰胺所致免疫受抑小鼠免疫功能的调节作用。1材料1.1动物NIH小鼠，(20±2)g，雌雄兼用，购自新疆医科大学动物实验中心。1.2药物蒜氨酸及蒜酶单体由新疆医科大学药学院采用新疆地产大蒜提取并纯化。蒜氨酸与蒜酶以2∶1比例经双蒸水混合,35℃水浴反应30min，形成纯品大蒜辣素(称做蒜氨酸+蒜酶)，根据预实验结果确定(1

5、25+63)，(250+125)，(500+250)mg·kg-1等低、中、高3个剂量。1.3试剂环磷酰胺(CP)购自上海华联制药有限公司;绵羊红细胞悬液(SRBC):由新疆医科大学动物实验中心提供。Alsever's血球保存液:按常规配制。都氏试剂:NaHCO31.0g，K0.05g，高铁氰化钾0.2g，加水至1L。4℃保存。豚鼠补体:多个豚鼠心脏采血，分离血清，混合。按血清:绵羊红细胞=20∶1的比例加入压积SRBC中，4℃放置20min。2000r/min，离心10min，吸取上清液，生理盐水稀释8倍。2方法2.1分组随机将50只N

6、IH小鼠分成蒜氨酸+蒜酶(低，中，高剂量)剂量组及正常对照组和模型组，共5组，每组10只。正常对照组每日用生理盐水(20mg·kg-1)灌胃，共10d；模型组每日用生理盐水(20mg·kg-1)灌胃，共10d，并在第7天开始同时腹腔注射环磷酰胺(17.5mg·kg-1)，共4d；各给药组分别用不同剂量的蒜氨酸+蒜酶给相应各组小鼠灌胃，持续10d，并在第7天开始同时腹腔注射环磷酰胺(17.5mg·kg-1)，共计4d。第11天测定各项免疫指标。2.2小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定［2］小鼠腹腔注射1%鸡红细胞，1ml/只；30min后，再腹

7、腔注射生理盐水1ml/只，断颈处死小鼠，吸取腹腔液、涂片，1∶1丙酮甲醇固定5min，Gimesa染色，油镜观察。每份标本油镜下观察200个巨噬细胞，计算吞噬鸡红细胞的巨噬细胞百分率。吞噬率（%）=(吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/200个巨噬细胞)×100%。2.3对小鼠淋巴细胞增殖的影响应用MTT法［3，4］。处死小鼠用75%酒精浸泡5min，无菌操作取脾,置hank's液中于200目网中研磨,用完全1640培养液配成5×106/ml细胞悬液。每份标本设3个平行孔。每孔加100μl细胞悬液和100μlConA/LPS，并设细胞对照。37℃,

8、5%CO2孵育68h，加MTT(5mg/ml)20μl/孔。继续培养3h,离心,1500rm/min，5min，弃上清，每孔加100μl二甲基亚砜(DMSO)振荡15min，于酶标仪570nm