二苯并噻吩脱硫菌的筛选及脱硫特性研究

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1、中图分类号：X172单位代码：10425学号：S12030565二苯并噻吩脱硫菌的筛选及脱硫特性研究StudyontheScreeningofDibenzothiopheneDesulfurizingBacteriaandBiodesulfurizationCharacteristics学科专业：环境科学与工程研究方向：环境污染控制技术作者姓名：王晓晓指导教师：赵朝成教授二〇一五年五月StudyontheScreeningofDibenzothiopheneDesulfurizingBacteriaandBiodesulfurizationCharacteristicsATh

2、esisSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：WangXiaoxiaoSupervisor：Prof.ZhaoChaochengCollegeofChemicalEngineeringChinaUniversityofPetroleum(EastChina)关于学位论文的独创性声明工作所取得的本人郑重声明：所呈交的论文是本人在指导教师指导下独立进行研宄经加以标注和致谢外，。，除文中己成果，论文中有关资料和数据是实事求是的尽我所知本论文不包含其他人己经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得中国石油一大学（华东）或其

3、他教育机构的学位或学历证书而使用过的材料。与我同工作的同志对研究所做的任何贡献均己在论文中作出了明确的说明。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。学位论文作者签名：日期：ｐ／Ｓ年６月曰摘要二苯并噻吩及其衍生物是高硫原油的重要组成，它的存在不仅降低了原油品质，而且燃烧时排放二氧化硫，二氧化硫进入到外环境会造成环境质量的严重下降，并潜在威胁着生态系统及人体健康。本文以二苯并噻吩（DBT）作为模型化合物，从长期被石油污染的土壤中分离出专一性脱硫菌AS-21，采用16SrDNA序列法对菌株进行了鉴定，并对AS-21的培养条件和脱硫条件进行了优化；在此基础上，将AS

4、-21接种到原油采出液中，考察该AS-21的脱硫效果；最后将AS-21制成休止细胞，考察不同浓度休止细胞的脱硫效果。本论文从不同油田区采集受污染的土样，进行初筛、复筛、分离纯化，得到两株脱硫菌AS-21和AS-26。该两株菌培养三天后，脱硫率分别达到73%和69%；脱硫菌AS-21为革兰氏阴性菌，且菌体为短杆形，对该菌株进行DNA提取，并经PCR扩增后测序，利用Blast程序将该菌的16SrDNA序列分析结果与GenBank中数据进行比对，比对结果显示该AS-21脱硫菌与红假单胞菌属Rhodopseudomonas16SrDNA序列同源性最高，达到99%，故将AS-21初步鉴

5、定为红假单胞菌属；通过对单因素影响研究和分析，得到菌株AS-21的最优培养条件和脱硫条件：培养温度为30℃，培养基初始pH为7.5，碳源为10g/L的甘油，氮源为2g/L的氯化铵，初始DBT浓度为100mg/L；通过响应曲面法研究确定生长温度为29.70℃，pH为7.43，DBT浓度为105.47mg/L时可得到最大脱硫率74%及最大菌株生长量2.49g/L；AS-21对采出液中所投放的DBT的脱硫实验结果表明，当向采出液中加入一系列营养物质后，脱硫率最高可为18.38%，由AS-21的生长曲线可知，0~15h为AS-21的生长停滞期，15~50h为AS-21的生长对数期，此

6、后其生长进入稳定期，将对数末期的菌液制成休止细胞，对休止细胞脱硫效果进行考察，其脱硫率可达81%，高于普通菌株。关键词：生物脱硫，二苯并噻吩，脱硫率，筛选，条件优化iScreeningofDibenzothiopheneDesulfurizingBacteriaandInspectionofBiodesulfurizationCharacteristicsWangXiaoxiao（EnvironmentScienceandEngineering）DirectedbyProf.ZhaoChaochengAbstractDibenzothiopheneanditsderivati

7、vesareanimportantcomponentofhigh-sulfurcrudeoil,itspresencenotonlyreducestheoilquality,andalsoincreasedsulfurdioxideemissionswhenburned,whichwilldeclineenvironmentalquality,andpotentiallythreatenedtheecologysystemsandhumanhealth.Inthisarticle,DBThasbeenu