生物化学实验报告

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1、生物化学实验报告总结实验结果及记录，写出实验报告。实验报告应包括实验名称、实验日期、目的要求、原理、试剂配制、仪器设备、操作方法；实验结果、讨论等项内容。书写实验报告时，目的和要求、原理以及操作方法部分应作简单扼要的叙述，但对实验条件和操作的关键环节必须写清楚。对于实验结果部分，应根据实验的要求，把所得的实验结果和数据进行整理、归纳、分析和对比，并尽量总结成各种图表，如标准曲线图以及实验组与对照组实验结果的比较表等。还应针对实验结果进行必要的说明和分析。讨论部分不是对结果的重述，而是对实验方法，实验结果和异常现象进行探讨和评论，以及

2、对于实验设计的认识、体会和建议。一般实验，要有结论，结论要简要扼要，说明本次实验所获得的结果。1.实验报告的书写包括哪些内容？2.玻璃仪器的清洗有哪些基本要求？3.请分别叙述分光光度技术、层析技术、电泳技术原理、及实验注意事项4.血液样品、尿液样品及组织样品制备的常用方法有哪些？实验八血清乳酸含量的测定（乳酸脱氢酶法）实验目的掌握血清乳酸含量测定的原理，了解血清乳酸测定的常用方法。实验原理乳酸脱氢酶（LD）在辅酶I(NAD)存在下将乳酸氧化成丙酮酸，同时伴有NAD转化成还原型辅酶I（NADH），其反应式如下：L－乳酸＋NAD＋LD丙

3、酮酸＋NADH＋H＋在pH值为9.8时，平衡偏向乳酸氧化为丙酮酸一方。加入肼或氨基脲与丙酮酸生成产物而使丙酮酸不断被除去，使反应进一步向右移动，从而驱动反应完成。通过分光光度法（γ＝340nm）或荧光法测定NADH的生成量来测得样本中乳酸得量。NADH吸光度的升高速率与样品中乳酸浓度成正比，故用连续监测法测定乳酸浓度。实验器材1.分光光度计2.试管3.移液管4.恒温水浴箱5.注射器6.离心机实验试剂1.Tris－EDTA－肼缓冲液将三羟甲基氨基甲烷（Tris）60.5g和乙二胺四乙酸（EDTA）4g溶解于800ml水中，加水合肼11

4、ml，调pH值到9.8，再定容到1000ml。4℃保存。2.0.1mmol/L辅酶I称辅酶I65.4mg，加塞保存于－20℃。用前加3ml水溶解。3.乳酸脱氢酶纯化的乳酸脱氢酶硫酸铵悬液，比活力约为550u/mg。4.应用基质液取缓冲液27ml，辅酶I液3ml，乳酸脱氢酶液40ul混匀。4℃可稳定24h.5.20mmol/L乳酸储存标准液称取乳酸锂192mg溶于100ml水中，4℃可稳定6个月。6.乳酸应用标准液分别取20mmol/L乳酸储存液1.0和2.5ml，各用水在10ml容量瓶中定容至10ml，其浓度分别为2和5mmol/L

5、.4℃下可稳定2个月。实验步骤1.标本采集：为了避免血液乳酸在采血时发生变化，受试者应处于空腹休息状态，最好不用止血带以防止前臂缺氧而致乳酸含量增加。进针后不立即采血，等几分钟后再采血，然后放入预置有碘乙酸钠的标本管中，碘乙酸钠的最终浓度为0.05％。待凝固后分离血清。2.取10X100cm小试管3只，分别写清测定管，标准管和空白管，然后按下表进行操作。表中所用试剂适合于自动化仪器操作，如用手工法而又无小比色皿可适当放大标本及试剂量。血清乳酸脱氢酶法测定乳酸操作表（单位：ml）结果分析血清中乳酸量＝?As/minX标准管乳酸浓度（m

6、moml/L）安静状态下，健康人静脉血内乳酸含量为0.5~2.2mmoml/L，动脉血乳酸水平低于静脉血。餐后比基础水平高20％～50％。脑脊液乳酸水平预血乳酸水平无关，16岁以下儿童得脑脊液乳酸水平为1.1～2.8mmoml/L乳酸是糖酵解的最终产物，在生理条件下，大多数组织以有氧氧化为主，但少数组织如皮肤，视网膜，肾髓质和血细胞等组织在有氧时也能进行糖酵解，其中以皮肤的糖酵解速度最快。成熟的红细胞仅靠糖酵解获得能量。在病理情况下，如严重贫血、大量出血、呼吸障碍及心血管疾患等所引起的机体缺氧时，致使糖酵解过度，造成乳酸生成过多，导

7、致机体产生乳酸酸中毒。运动时乳酸主要在骨骼肌中生成，然后透过细胞膜进入血液。在正常情况下，乳酸在生成和消除处于动态平衡中，血乳酸浓度为1-2mmol/L，运动员血乳酸安静值与常人无差异，但是在赛前情绪紧张时，血乳酸浓度安静值有可能升高到3mmol/L左右，这与肾上腺分泌增多有关。运动时血乳酸浓度上升，上升的起始运动强度约在50%-60%VO2max，耐力运动员由于有氧代谢能力强，升高的起始强度推迟到60%-70%VO2max。运动时血乳酸浓度的变化与运动强度有关。剧烈运动时，肌肉内糖的无氧分解加强，血乳酸浓度显著升高。运动时血乳酸浓

8、度的变化与所动用的能量系统有关。以磷酸原系统供能为主的运动，血乳酸生成量较少，血乳酸一般不超过4mmol/L；以糖酵解系统供能为主的运动，血乳酸可达15mmol/L以上；而以有氧氧化系统供能为主的运动，血乳酸在4mmol/L左右。速度