硝酸亚铈对小鼠睾丸细胞能量代谢相关酶活性、细胞周期及凋亡的影响

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1、硝酸亚铈对小鼠睾丸细胞能量代谢相关酶活性、细胞周期及凋亡的影响：赵海军，王宝贵，张桂英，张惠，周静，凌丰，陈敏华【摘要】　　目的探讨硝酸亚铈对于小鼠睾丸细胞能量代谢相关酶类活性、细胞周期以及凋亡的影响。方法100只雄性小鼠随机分为阴性对照组、环磷酰胺组及硝酸亚铈15、30、60mg/kg组，各组动物用相应受试物连续灌胃60d。采用酶化学方法检测乳酸脱氢酶(LDH)、山梨醇脱氢酶(SODH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)的活性；采用流式细胞仪检测睾丸细胞的细胞周期及细胞凋亡。结果与环磷酰胺组比较，

2、15mg/kg硝酸亚铈能促进LDH、SODH、SDH及G6PD活性(P<0.05)，30mg/kg硝酸亚铈有促进SDH活性的作用(P<0.05)；15mg/kg和30mg/kg硝酸亚铈均能延长睾丸细胞G0/G1期，缩短S期和G2+M期，抑制细胞凋亡(P<0.05)。与阴性对照组比较，60mg/kg硝酸亚铈对LDH、SDH、G6PD均有显著性抑制作用(P<0.05)，且能缩短睾丸细胞G0/G1期，延长S期和G2+M期，细胞凋亡明显增加(P<0.05)。结论低剂量的硝酸亚铈对小鼠睾丸细胞能量代谢

3、相关酶活性和细胞增殖有促进作用,而高剂量硝酸亚铈则表现出明显的抑制作用。【关键词】硝酸亚铈；细胞周期；凋亡；生殖毒性　　ABSTRACT:ObjectiveToexploretheeffectofceriumnitrateonactivityoftheenzymerelatedtoenergymetabolism,cellcycleandapoptosisoftesticuluscellinmalemice.MethodsAtotalof100malemicelyintonegativecontrolgroup,cytoxa

4、ngroup,ceriumnitrategroupsinlog/kg),mediumdose(30mg/kg),highdose(60mg/kg).ofcellcycle,inhibitapoptosisparedg/kgceriumnitratecouldinhibittheactivityofLDH,SDHandG6PDoftesticuluscellnitratepromotesactivityofenzymerelatedenergymetabolismandproliferationoftesticuluscel

5、l,nitrateshonitrate;cellcycle;apoptosis;reproductiontoxicity　　中国是稀土资源最多的国家。在所有的稀土元素中铈占稀土总组分的28%，居第一位，发展和利用价值非常高。随着应用的增多，越来越多的铈进入环境，继而通过生物链，导致生物体内和人体内铈的增加，并且铈的摄入具有长期性。因此，摄入后近期、远期的生物安全性就成为一个值得探讨的问题。生殖系统是对有毒有害物质较为敏感的系统之一，所以对生殖系统的影响更值得我们关注。但是，目前国内外有关铈对雄性生殖系统影响的研究较少。本研究

6、以昆明种小白鼠为研究对象，探讨了硝酸亚铈对小鼠睾丸细胞酶活性、细胞周期以及细胞凋亡的影响。　　1材料与方法　　1.1试剂与仪器　　硝酸亚铈(天津市德兰精细化工厂)；环磷酰胺(上海华联制药有限公司)；氧化型辅酶Ⅰ(上海生物化学试剂商店)；氧化型辅酶II(中国科学院生物化学研究所)；山梨醇(上海化学试剂厂)；葡萄糖6磷酸二钾盐(中国科学院上海生物化学研究所)；乳酸脱氢酶(LDH)测试盒、琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒(南京建成生物工程研究所)；Tris(Sigma公司)；722型分光光度计(上海第三分析仪器厂)；小型三用恒温水

7、箱(北京医疗设备厂)；流式细胞仪(BectonDickinson，美国)；低速离心机LD42型(北京医用离心机厂)。　　1.2动物分组及处理方法　　健康昆明种小鼠，雄性100只，体重15～19g，由吉林大学实验动物中心提供。随机分为5组：阴性对照组，给予蒸馏水；3个硝酸亚铈组，剂量分别为15、30、60mg/kg；环磷酰胺组，13mg/kg。每组20只。连续经口灌胃染毒60d。于第61天，脱颈椎处死小鼠，取其睾丸和附睾待测。　　1.3睾丸细胞酶活性的测定　　将小鼠脱颈椎处死后，剪开腹腔，立即取出睾丸并去除被膜，每克睾丸加3

8、mL0.5mol/LTris/HCl缓冲液，在冰浴下用玻璃匀浆器制成匀浆，4℃、12000r/min离心15min，取上清液[1]。LDH和SDH活性按照南京建成生物工程研究所提供的方法进行检测，山梨醇脱氢酶(SODH)和葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)活性按照文献给出的方法进行检测[