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时间:2018-07-06
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1、新疆紫草止血作用研究:努尔艾买提江·阿布来提,买尔旦·马合木提,古丽仙·胡加,古孜力努尔·依马木【摘要】目的研究新疆紫草的止血作用。方法分别给小鼠连续灌胃给予新疆紫草正己烷、醋酸乙酯、95%乙醇和水提取物7d,采用断尾法考察对小鼠出血时间的影响,确定有效部位。在此基础上,用新疆紫草醋酸乙酯提取物分别给小鼠和大鼠连续灌胃给药14d,测定小鼠凝血时间(CT)、出血时间(BT)和血小板计数,大鼠活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)含量的改变。结果新疆紫草醋酸乙酯提取物能显著缩短CT、BT、升高血小板
2、数量、缩短凝血酶时间(TT)、提高纤维蛋白原含量(FIB)。结论新疆紫草醋酸乙酯提取物具有较好的止血作用,其机理可能与增加纤维蛋白原含量,促进纤维蛋白原转变为纤维蛋白的过程,升高小鼠血小板数量,影响抗凝和纤溶系统有关。【关键词】新疆紫草;止血作用;凝血时间;凝血酶时间;纤维蛋白原;血小板 中药紫草为紫草科植物新疆紫草ArnebiaeuchromaJohnst.,紫草LithospermunerythrorhizonSieb.etZucc.或内蒙紫草ArnebiaguttataBunge的干燥根。具有凉血、活血、解毒透疹等功效[1]。在中医和维吾尔医均用
3、于治疗许多难治性疾病如肿瘤、艾滋病、过敏性紫癜、银屑病等。紫草含有多种生物活性成分。现代药理学研究发现这些成分具有抗肿瘤、抗菌消炎、保肝、抗病毒及真菌、抗生育、降血糖、抗免疫缺陷、抗凝血、止血、抗前列腺素生物合成及抗脂质过氧化等作用[2]。杨荣等[3]研究了软紫草ArnebiaeuchromaJohnst.,黄花软紫草A.guttataBge.,紫草LithospermunerythrorhizonSieb.etZucc.),滇紫草OnosmapaniculatumBur.etFranch.,露蕊滇紫草O.excertumHemsl.和密花滇紫草O.C
4、onfertumth.水提物和醇提物对小鼠断尾出血的作用,发现这6种紫草的水提液和醇提液均有不同程度的止血作用。其中软紫草的水提液和黄花软紫草的醇提液作用较好。新疆紫草在新疆分布广泛,品质最佳。在以往的研究中,课题组研究了新疆紫草的提取物的保肝作用[4~7]。为进一步深入研究新疆紫草的止血作用和有效部位,我们初步考察了新疆紫草的正己烷、醋酸乙酯、95%乙醇和水提取物对小鼠出血时间的影响,发现这些提取物均可缩短断尾小鼠出血时间,其中醋酸乙酯提取物的作用优于其它提取物。因此,本文报道了新疆紫草醋酸乙酯提取物对小鼠出血时间(BT)、凝血时间(CT)、小板计数
5、以及大鼠血液凝集参数的影响,为进一步开发利用新疆紫草奠定基础。 1材料与仪器 1.1药材与试剂新疆紫草(新疆参茸药业有限责任公司,批号07112701,由新疆医科大学药学院生药学教研室进行品种鉴定);云南白药(云南白药集团股份有限公司,批号20081208);戊巴比妥钠(化学纯,北京通县育才精细化工厂,批号950427);正己烷、醋酸乙酯、95%乙醇等均为分析纯,醋酸泼尼松片(浙江仙琚制药股份有限公司,批号080977)。水为纯净水。APTT、TT、PT、FIB试剂盒DianstaticaStago。 1.2动物昆明种小鼠,体质量18~22g,E
6、XCA-7000全自动血凝仪(日本);DK-S24电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司);BS224s电子分析天平(Sartorins公司);旋转蒸发器RE-52(上海亚荣生化仪器厂);SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科教仪器有限公司),内径1mm的毛细玻璃管、灌胃管、注射器、血细胞计数板、显微镜。手术刀,眼科弯镊,秒表,载玻片,滤纸等。 2方法 2.1供试品的制备称取紫草粉末(过40目筛)500g,分别用正己烷、醋酸乙酯、95%乙醇、水,于70,77,80,95~100℃下回流提取3次(2,2,1h),料液比为1∶5,合并回流液,过滤,
7、经减压回收溶剂浓缩成浸膏,分别得提取物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ,备用。临用前用0.5%羧甲基纤维素钠配制成所需浓度的混悬液备用,药物量以按原药材计算。 2.2止血有效部位的筛选采用断尾法考察以上4个提取物对小鼠出血时间的影响。取小鼠50只,随机分为空白(0.5%CMC-Na)对照组;给药组:高剂量(20g·kg-1)、中剂量(10g·kg-1)和低剂量(5g·kg-1);阳性对照组:云南白药(0.8g·kg-1),每组10只。各组每日分别灌胃给药Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ1次,连续7d。末次给药后60min,将小鼠固定,露鼠尾于外,用手术刀片于小鼠尾尖1/2处横断(严格控
8、制切割深度),待血液自行溢出开始计时每隔30s用滤纸吸去血滴1次,直至血流自然停止(滤纸吸时无
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