‘中秋酥脆枣’组培技术研究

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1、‘中秋酥脆枣’组培技术研究陶爱群（湖南环境生物职业技术学院园林系，湖南衡阳421005）摘要：为建立‘中秋酥脆枣’的组培快繁体系，对外植体消毒时间长短和种类选择、不定芽诱导、不定芽增殖、不定根诱导进行研究。结果表明：最佳外植体是水培枝枣头；该外植体用升汞处理5min后，接种于MS（改良）+6-BA2.5mg/L+NAA0.15mg/L，不定芽诱导率达94%；最适增殖培养基为MS（改良）+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L，平均不定芽达6.5；1/2MS（改良）+NAA0.15mg/L为最适生根培养基，不定芽平均生

2、根3.6个。.jyqkail：[email protected]。收稿日期：2014-05-14，修回日期：2014-11-05。0引言‘中秋酥脆枣’是祁东糖枣的一个芽变品种，适应南方高温高湿气候，抗性强适应性广，早果丰产性好，品质优良，成熟期恰逢中秋、国庆，填补了鲜枣的市场空白，经济价值极高[1]。‘中秋酥脆枣’已在湖南、江西、广西、云南、重庆等多个南方省市推广种植，但其育苗采用嫁接方式，所需的繁殖材料多，且从砧木苗的培育至嫁接苗出圃，至少需要3年以上，耗时长，管理较为困难，使‘中秋酥脆枣’在南方的广泛推广种植

3、受到了影响。早在1994年王玉国等[2]就对‘骏枣’组织与快繁技术进行了研究。迄今为止已有‘骏枣’[2]、‘吕西枣’[3]、‘桐柏大枣’[4]等多个枣树品种成功再生出完整植株，‘金丝小枣’[5]、‘苹果枣’[6]、‘台湾印度枣’[7]、‘毛叶枣’[8]等品种建立了组培快繁体系。枣类组培外植体选用了休眠枝、水培芽[5]、带腋芽茎段[7-8]、叶片、一年生枝、二次枝、枣头芽[6]，培养基主要为MS、S、H、等[5,9]，启动培养选用不同浓度的IBA、IAA、NAA、BA、KT[5,8]等，继植物生长调节剂影响枣的代增殖过程[5

4、,8,10]，亦有研究发现NG在‘临泽小枣’继代过程中可代替植物生长调节剂起作用[11]。生根则多采用不同浓度IBA、NAA[5-7]。虽对枣树组培快繁有较多的研究，但所有的研究对象均为北方枣品种，对南方广泛栽种的‘中秋酥脆枣’组培技术研究目前没有报导。为了能在短期内大量生产‘中秋酥脆枣’苗，解决苗木生产受季节、场地限制的问题，笔者拟建立‘中秋酥脆枣’组织培养技术体系，为探索其苗木生产的新途径奠定基础。1材料与方法1.1试验时间、地点研究田间试验于2010年在祁东县新丰果业公司进行，室内试验在2011年5月至2013年10

5、月在湖南环境生物学院组培基地进行。1.2外植体筛选与消毒1.2.11年生枝条水培枝试材采自祁东新丰果业公司采穗圃。于2010年12月选取生长健壮的1年生枝条放置于气调库中贮藏或埋于湿砂中至翌年4月枣芽萌发前取出，放入纯净水置于人工气候室中培养，每3天换水1次。采下长1cm的枣头、枣股，用洗衣粉水浸泡0.5h，无菌水冲洗后转入超净工作台，用70%的酒精浸泡30s，分别用0.1%升汞溶液浸泡1、2、3、4、5min后无菌水冲洗4~5遍，接种于不含生长调节剂、蔗糖含量为3%的培养基上，每种材料不同消毒时间均接种40个，20天后统

6、计材料的污染率。1.2.2野外1年生枝条2011年5月在祁东新丰果业公司采穗圃选取生长健壮的当年生枣头、枣股、二次枝，用流水冲洗后1h后，再用无菌水浸泡0.5h。后带入超净工作台上，用70%的酒精浸泡30s，分别用0.1%升汞溶液2、4、6、8、10min后无菌水冲洗4~5遍，接种于不含生长调节剂、蔗糖含量为3%的培养基上，接种数量同水培枝，20天后统计污染率。1.2.3最优外植体的筛选将1年生水培枝新萌发的枣头、枣股，1年生枣头、枣股及二次枝按最优消毒方式处理后，每种外植体选50个接种在改良MS+NAA1.00mg/L的

7、培养基上，30天后统计褐化率和启动率。1.3不定芽诱导1年生水培枝上选取生长健壮的枣头（长约1cm）作为外植体，Y1~Y5培养基以改良MS[1-2]培养基为基本培养基，生长素和细胞分裂素浓度如表1，每种培养基接种10瓶，每瓶5个，30天后统计启动率，60天后统计不定芽产生率。1.4增殖培养初代培养出的不定芽，接种于6-BA和NAA浓度（见表1Z1~Z5）的培养基进行增殖培养。每种培养基接种10瓶，每瓶5个，30天后统计不定芽的再生频率和生长状况。1.5不定梢生根选取长2~3cm，有一定粗度的不定梢接种于表2S1~S6培养基

8、上，10天后转入不含生长素的1/2MS和1/4MS基本培养上，每种处理接种25瓶，每瓶2个，40天统计不定梢的生根率、生根数和平均根长。1.6其他本研究中，培养条件均为光照与黑暗16h/8h，光强为2000lx，培养基中均添加7.5g琼脂和30g蔗糖，pH6.0。2结果与分析2.1外植体消毒与筛选结果2