野菊花高效液相色谱指纹图谱及质量评价方法的建立

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1、野菊花高效液相色谱指纹图谱及质量评价方法的建立刘婷娜朱恩圆侴桂新王峥涛【摘要】目的建立野菊花的高效液相色谱指纹图谱及质量评价方法，研究不同采集地和不同种野菊花药材的质量。方法利用RP-HPLC方法，分析了12批市售和8批采自不同产地的野菊花药材。流动相：A相为乙腈，B相为0.1％醋酸水溶液，梯度洗脱，流速：1.0ml·min-1；检测波长：326nm。结果在45min内建立了野菊花HPLC指纹图谱，确定了野菊花药材中的22个共有峰,归属了其中的黄酮类化合物，并对其中黄酮类成分进行主成分分析。结论野菊花药材的反相高效液相色谱指纹图谱，重复性好，在野菊花分类学上有一定

2、的指导意义，用于野菊花的质量评价可行。【关键词】野菊花高效液相色谱法指纹图谱质量评价Abstract：ObjectiveToevaluatethequalityofFlosChrysanthemiIndicibyHPLCfingerprintandtheponentanalysis.MethodsRP-HPLCinationoffingerprint.Theseparationn(250mm×4.6mm,5μm).Themobilephaseixtureofacetonitrile(A)and0.01％Aceticacid(B)ingradientelution,

3、theflol·min-1,andthedetection．ResultsTheHPLCfingerprintofFlosChrysanthemiIndiciinutesand22characteristicpeaksiIndici.ConclusionTheRP-HPLCfingerprintmethodisrepeatable,feasibleinthequalitycontrolofFlosChrysanthemiIndiciandcanbeusedtoidentifythedifferentspeciesofFlosChrysanthemiIndici．K

4、eyiIndici;HPLC;Fingerprint;Qualityevaluation野菊花是我国大部分地区民间常用中草药之一，有清热解毒、平肝明目的功效,秋冬二季花初开放时采摘，晒干或蒸后晒干入药〔1〕。2005版《中国药典》Ⅰ部规定，野菊花来源于菊科菊属植物野菊DendranthemaeindicumL.的头状花序。而在民间用药中，野菊变种及北野菊D.borealeMak．，菊花脑D.nankingenseHand.-Mazz或岩香菊(又称甘菊)D.lavandulaefolium(Fish)Mak．及其变种也做野菊花用〔2〕。目前，药材市场上流通的野菊花主

5、要来源于植物野菊和甘菊，或者野菊和甘菊两者混合品。野菊、甘菊两者植物形态相近，鉴定比较困难，质量上难以得到控制。2005版《中国药典》野菊花含量测定项下仅测定了野菊中蒙花苷的含量，不能对野菊花的质量进行全面准确地评价。本文采用高效液相色谱法对野菊花商品药材和自己采集的不同产地的野菊花药材进行指纹图谱研究，并对其主要活性成分黄酮类成分进行统计学分析，建立野菊花药材质量评价的分析方法，为野菊花药材的质量控制提供有效方法，对进一步提高野菊花的质量评价方法以及在野菊花植物化学分类学上具有一定的指导意义〔3～6〕。1仪器与材料DionexSummitP680DGPsyste

6、m型液相色谱仪，PDA100二极管阵列检测器，变色龙色谱工作站。对照品：绿原酸购自上海沪云医药有限公司；蒙花苷由上海中药标准化中心提供；木犀草素、木犀草素-7-O-葡萄糖苷（木犀草苷）芹菜素为自制(从野菊D.indicumL．中分离得到，经核磁和质谱鉴定后确定，采用归一化法计算含量，HPLC检测纯度>98％)；乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为纯净水。野菊花购自全国各药店12批和采集自不同产地的8批(采集的药材经过上海中医药大学吴立宏副研究员和安徽中医学院刘守金副教授鉴定，凭证标本存放于上海中药标准化研究中心药材标本室)。药材情况见表1～2。表112批市售野菊

7、花样品的来源2方法与结果〔2～6〕2.1色谱条件与系统适用性色谱柱Acclaim120C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：A相为乙腈，B相为0．1％醋酸水溶液，梯度洗脱，流动相变化比例见表3，流速：1.0ml·min-1；检测波长：326nm；柱温；30℃；进样量：10μl。以木犀草素的色谱峰(12号峰)计算理论塔板数不低于5000。表28批采集得到的野菊花样品的产地及植物来源表3梯度洗脱流动相的比例2.2对照品溶液的制备称取木犀草素、绿原酸、木犀草苷、蒙花苷、芹菜素对照品适量，精密称定，分别置于10ml量瓶中,精密加入乙腈-甲醇-水（2∶1∶1）

8、溶剂溶解稀