无菌室标准化规程1

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1、一.无菌室标准化规程1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。.7.工作人员进入无菌室前，必须

2、用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。.11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养

3、物。.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。.14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。.15.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。.16.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板

4、3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。二p2微生物实验室要求：1、符合BSL-2实验室建设要求。2、实验室门口带锁并可自动关闭。实验室的门有可视窗。3、有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实验室工作区域处还有供长期使用的存储空间。4、在实验室的工作区域处应有存放个人衣物的条件。6、在实验室所有的建筑内配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合

5、要求。7、在实验室内配备生物安全柜。8、设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。9、考虑机械通风，如使用窗户自然通风，有防虫纱窗。10、有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源。11、实验室出口有在黑暗是可明确辨认的标识。三万级无菌室是微生物里面的指标要求达到一个点，比如尘埃粒子，沉降菌，气压，温度，湿度，光照度，等等四P2（二级生物安全）实验室消毒隔离要求1要求1.1实验室相对独立，通过隔离门与公共部位相隔。实验核心区应包括实验室间及与相连的缓冲走廊，明确划分为清洁区、半污染区和污染区。1.2实验室内所有物品应专用，需带出

6、时必须严格消毒。1.3实验室工作人员进入实验室应穿戴好个人防护用品1.4培养基、组织、体液等必须放入防漏密闭的容器内储运。1.5血清学试验、致病菌检测、样品处理及分装应在II级生物安全柜内进行。1.6样本离心时，离心机应放在排毒柜内或生物安全柜内进行，以防产生气溶胶或溅出。1.7实验过程中使用的器材、实验废弃物均应按规定进行消毒、灭菌处理。1.8实验完毕，先消毒物体表面，再按规定程序脱下个人防护用品，并进行空气消毒。1.9离开实验室前，必须按有关规定清洁消毒双手。1.10仪器设备运出实验室前必须按有关规定进行严格消毒。2消毒方法2.1实验室内空气消毒2.1.1可使

7、用送排风系统加强通风。2.1.2紫外线灯管、灯车适用于无人室内空气、物体表面的消毒。常用的室内悬吊式紫外线灯对室内空气消毒时安装的数量为平均1.5W/m3（照射强度≥70MW/cm2），照射时间不少于60分钟。2.2实验室表面消毒2.2.1地面实验室地面要湿式拖扫，禁止干拖干扫。需消毒时，可用有效氯为500-1000mg/L的含氯消毒液喷洒或拖地，消毒液用量不小于100ml/m3。污染区和清洁区拖把应专用，不得混用。使用后，用上述消毒液浸泡30分钟，再用水清洗干净，悬挂晾干，最好在阳光下晒干后备用。2.2.2物体表面的消毒实验台、桌、椅、凳、门把手等可用有效氯为5

8、00-10