脑脊液细胞学检查规范

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1、脑脊液细胞学检查和诊断规范脑脊液细胞学是针对脑脊液细胞的形态学研究,它是在腰椎(或其他部位)穿刺获取标本后,用显微镜观察脑脊液中细胞形态的一种检查方法。如果我们将脑脊液视为一种组织,那么脑脊液细胞学检查既是对蛛网膜下腔的组织活检,又反映了蛛网膜下腔的病变情况,且许多中枢神经系统疾病的病理生理改变,往往只反映在脑脊液中。因此,脑脊液细胞学检查就显得尤为重要,在脑脊液的诸多检查项目中,其重要性不可替代。它不仅能够为多种神经系统疾病的病因诊断提供帮助,而且在鉴别诊断、病情监测、疗效评价及预后判断方面也具有很高的临床价值。近年来越来越多的扩展到中枢神经系统肿瘤、白血病、寄生虫、脑血管病以及神经细胞

2、免疫功能的诊断、治疗、预后判断及监测等,成为临床工作不可缺少的有力帮手;结合流式细胞术及免疫组化技术,使一些棘手的神经科疾病得到了确诊。但是我国目前脑脊液细胞学诊断发展仍不平衡,实验室操作和报告不够规范。临床和实验技术人员经过系统培训上岗还不够普及。为了更加规范脑脊液细胞学检查和诊断,制定一个简单而便于操作的脑脊液检测和临床应用规范是非常必要的。一、脑脊液细胞学检查的发展历史脑脊液细胞学检查已有百年历史,20世纪50年代之前只能进行简单的细胞计数和分类。在Sayk和Watson等相继发明了“玻片细胞沉淀法”和“细胞玻片离心沉淀法”后,该方法才有了飞速的发展,成为了一门新型学科—脑脊液细胞学

3、。我国的脑脊液细胞学研究开始于20世纪60年代,侯熙德教授和粟秀初教授先后建立了脑脊液细胞学检查室,并研制成功了侯氏自然沉淀器和粟氏FMU-5微型脑脊液细胞玻片离心沉淀仪,在此基础上,对脑脊液细胞的分类、染色和肿瘤细胞检查等进行了大量研究,并制定了脑脊液细胞学检查的一系列规范,举办了多起学习班,出版了多部专著。这些工作为我国脑脊液细胞学的建立与发展奠定了坚实的基础。1986年孔繁元教授引进Cytospin-2玻片离心沉淀仪并国产化,近期第四军医大学西京医院又对原粟氏沉淀仪进行了改进,新一代FMU-6细胞涂片离心沉淀仪已经问世并投入使用。1985年,在粟秀初教授的召集与主持下,由第四军医大学

4、主办召开了我国第一届脑脊液细胞学学术经验交流大会,会上成立了全国脑脊液细胞学联络协作小组。1991年,经中华医学会批准,在原全国脑脊液细胞学联络协作小组的基础上成立了中华医学会神经病学分会脑脊液细胞学学组,2006年学组又更名为感染性疾病与脑脊液细胞学学组。学组的成立与更名对我国脑脊液细胞学研究的发展起到了引领和推动作用。一、脑脊液细胞学检查步骤(一)、脑脊液标本的收集和处理l、腰椎穿刺术,收集脊髓蛛网膜下腔脑脊液标本;2、留取脑脊液标本:可按需要缓慢放出脑脊液,依次分别置于3—4个消毒过的无菌小瓶(试管)中送检,每管1-2ml,若需特殊检查脑脊液可留取3-5ml。各种检验所需的脑脊液量见

5、表;表各种检验所需的脑脊液量检查项目所需脑积液量(ml)细胞计数总蛋白糖、氯化物蛋白电泳结核涂片和培养、其它细菌涂片和培养肿瘤细胞检验脑脊液细胞学系列:MGG染色墨汁染色阿里新兰染色免疫组化染色0.51.53.03.0-5.03.0-5.03.0-5.02.03.0-5.020.0.51.02.03、留取的脑脊液标本第一管用于细菌培养,第二管用于生化或免疫学检查,第三管用于脑脊液细胞学系列检查,第四管可用于脱落细胞学检查等;4、注意事项:(1)留取脑脊液标本后应尽快送至脑脊液细胞室进行细胞的收集和固定,否则细胞将会变形、变性和自溶,影响结果的观察与判断,一般不超过2小时;(2)注意标本送检

6、时宜平稳运送,不宜摇晃,常温为宜,避免高温、冷冻等;(3)若脑脊液初压过高则不宜放液,仅取其测压管内的脑脊液送检即可;(二)、脑脊液细胞的收集:是脑脊液细胞学检查的前提和重要环节,只有收集到大量形态完整的细胞才能进行染色和分类诊断。目前,脑脊液细胞收集技术以细胞玻片离心沉淀法应用较广,其效果较理想。1、国内目前常用的细胞玻片离心沉淀器:(1)FMU-5型脑脊液细胞玻片沉淀器:由第四军医大学研制,设备简单、价格低廉、操作方便、细胞收集效果满意,适用于基层医疗单位。(2)Cytospin-2或4型细胞玻片离心沉淀仪:由英国Shandon公司制造。细胞收集损失少、结构清晰,标本范围小,便于观察;

7、离心时间、速度和加速度可自控;运转稳定不受电压变化影响;标本置于密闭槽内不污染环境。缺点是价格较昂贵,且不便于携带;(3)FCS型离心沉淀仪:由宁夏医科大学研制,为两用式(即可收集细胞核离心体液),细胞收集率高,分布均匀、清晰,全部材料国产化,价格便宜,适用于基层医疗单位。2、无论使用哪一种细胞收集器,必须符合以下要求:(1)能够收集标本中较多的细胞,损失少;(2)所需脑脊液标本量不宜太多;(3)收集过程既要快速又不损害

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