11月科室学习资料

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1、亚甲蓝光化学疗法血浆病毒灭活技术的应用核心提示:目的:通过对血浆病毒灭活前后血浆总蛋白和HBV-DNA的测定比较,判断亚甲蓝光化学疗法病毒灭活效果和对血浆蛋白浓度的影响。方法:血浆总蛋白测定采用双缩脲法;HBV-DNA定量测定采用荧光定量PCR技术。结果:亚甲蓝光化学病毒灭活前后血浆总蛋白平均水平相同,  【摘要】目的:通过对血浆病毒灭活前后血浆总蛋白和HBV-DNA的测定比较,判断亚甲蓝光化学疗法病毒灭活效果和对血浆蛋白浓度的影响。方法:血浆总蛋白测定采用双缩脲法;HBV-DNA定量测定采用荧光定量PC

2、R技术。结果:亚甲蓝光化学病毒灭活前后血浆总蛋白平均水平相同,都符合≥50g/L的国家标准;HBV-DNA阳性血浆在经亚甲蓝光化学病毒灭活后血浆HBV-DNA转为合格。结论:亚甲蓝光化学病毒灭活技术对血浆HBV病毒有杀灭作用,对血浆蛋白浓度无影响。【关键词】病毒灭活;亚甲蓝;HBV-DNA亚甲蓝(MB)光化学疗法血浆病毒灭活技术作为一种新型的血液安全保障技术正在被逐步应用于血浆制备过程中,临床上血浆病毒灭活方法多采用MB加可见光灭活病毒的方法[1]。亚甲蓝(MB)光化学疗法血浆病毒灭活技术其原理是,亚甲蓝

3、(MB)作为一种光敏剂,与可见光协同作用产生单态氮,后者可作用于核酸链上的鸟嘌呤,引起脱嘌呤和核酸链的断裂,使DNA复制受阻[2]。为保证血液质量,提高输血安全,购置病毒灭活箱和配套耗材开展亚甲蓝(MB)光化学疗法血浆病毒灭活技术,取得了良好的效果,有效降低了输血风险,现报告如下。1 材料与方法 1.1 标本:本站采集的无偿献血者血液经PCR检测证实HBV-DNA为阳性3袋,成分制备分离血浆,置专用冰箱待测。1.2 材料:HBV-DNA荧光定量PCR检测试剂和设备均由杭州博日公司提供;血浆蛋白测定试剂为上

4、海名典生物工程公司生产的总蛋白测定试剂盒TP-KIT,仪器是山东高密分析仪器厂的723可见分光光度计;亚甲蓝光化学疗法血浆病毒灭活设备和耗材由上海输血技术公司提供。1.3 方法:将HBV-DNA阳性血浆3袋留取试管样本,分别用双缩脲法和荧光定量PCR技术测定血浆总蛋白、HBV-DNA,对3袋血浆进行亚甲蓝光化学疗法血浆病毒灭活,之后再次留取血浆样本,测定血浆总蛋白、HBV-DNA,比较灭活前后两次测定结果。1.4 统计学处理:采用两样本均数t检验。2 结果2.1 亚甲蓝血浆病毒灭活前后血浆总蛋白含量比较详

5、见表1。表1亚甲蓝血浆病毒灭活前后血浆总蛋白含量比较(g/L)注:与灭活前比较:P>0.502.2 亚甲蓝血浆病毒灭活前后血浆HBV-DNA浓度比较见表2。3 讨论3尽管血液检测的水平在不断提高,但受"窗口期"等因素的影响,血液的输注仍然存在着风险。血浆占全血的55%,血浆的输注在各种血液成分的输注中占有很大的比例,且其在血液成分中传播病毒的危险性仅次于白细胞,因此如何减少血浆输注的风险,提高血浆输注的安全性,一直是输血医学关注的课题。亚甲蓝光化学灭活血浆病毒的方法能有效灭活血浆中的脂质包裹病毒和部分非脂

6、质包裹病毒[3],灭活血浆病毒效果可靠,对血浆中有效成分无明显不良影响,对人体无伤害,被认为是一种安全、有效、实用的血浆病毒灭活方法,目前已成功地用于单袋血浆病毒灭活[4],是唯一获准用于临床的光化学血浆病毒灭活技术。本文对血浆在亚甲蓝光化学病毒灭活前后分别检测血浆总蛋白和HBV-DNA,从表1中看到亚甲蓝光化学病毒灭活前后血浆总蛋白平均水平相同,都符合≥50g/L的国家标准;从表2中看到HBV-DNA阳性血浆在经亚甲蓝光化学病毒灭活后血浆HBV-DNA转为合格,由此可见,亚甲蓝光化学单袋血浆病毒灭活技术

7、,在保证血浆蛋白浓度不变的情况下,可以有效破坏血浆中乙型肝炎病毒(HBV),该项技术的应用可进一步降低输注血浆传染病毒的危险性,达到安全有效的输血治疗目的,给临床用血增加了一道安全防护屏障,是一项值得推广的血浆病毒灭活技术。为什么推广临床使用病毒灭活血浆病毒灭活血浆就是经过病毒灭活工艺处理后的血浆。人类在输血过程中存在很多病毒性疾病传播的危险,如乙肝(HBV)、丙肝(HCV)、艾滋病毒(HIV)和SARS)等,即使对血液进行初检和复检,但由于受检测试剂灵敏度和病毒感染窗口期等问题的制约,导致检验方法有一定

8、局限性,从而不能完全剔除携带致病病毒的血液。另外还有一些未列入必检项目的病毒(如淋巴细胞白血病病毒、巨细胞病毒等)及现在医学手段不能检测的新病毒,都有可能引起输血感染各种病毒性疾病。因此为了从根本上控制和杜绝血源性传染病,除采供血机构加强筛选外,必须对血浆进行病毒灭活处理,才能达到输血安全的目的。近年来的研究证明,亚甲蓝(MB)光化学灭活血浆病毒是一种最安全、有效的适合于临床用单袋血浆病毒灭活的方法。其原理:MB是一种光敏剂,

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