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时间:2018-05-07
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1、工艺控制的复方丹参片对麻醉犬冠脉结扎所致心肌缺血的影响:黄琳,林青,肖晓丽,方泰惠【摘要】 目的控制工艺条件制备了有效成分含量不同的复方丹参片,观察其对麻醉犬冠脉结扎所致心肌缺血的影响。方法结扎麻醉犬冠脉复制心肌缺血模型。观察给药后ST段偏移总和(Σ-ST)、ST段抬高≥2mV以上的个数(N-ST)和乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)的变化。通过TTC染色,观察心脏梗塞范围。结果工艺A、B、C组均可显著减少冠脉结扎所致的Σ-ST抬高和N-ST增加,工艺A组和工艺B组可减少血清中LDH和CK的释放,缩小心肌梗塞范围。结论复方丹参片能明显减轻心肌缺血程度。工艺参数的调整影响复方丹参片有
2、效成分的含量,有效成分含量越高持续作用时间越长。【关键词】复方丹参片;麻醉犬;心肌缺血 复方丹参方是《中国药典》方,主要由丹参、三七、冰片3味药组成。其中丹参为君,三七为臣,冰片为佐使药,具有活血化瘀、理气止痛的功能,用于气滞血瘀所致的胸痹,症见胸闷、心前区刺痛;冠心病心绞痛见上述证候者。本文采用麻醉犬冠脉结扎所致心肌缺血的动物模型,研究工艺相同,调整工艺参数进行制备的复方丹参片(有效成分含量有差异)抗心肌缺血的作用效果。 1材料与仪器 1.1药物与试剂工艺A:浅褐色粉末,实验时用蒸馏水配制成所需浓度。工艺B:棕褐色粉末,实验时用蒸馏水配制成所需浓度。工艺C:浅褐色粉末,实验时用蒸馏水
3、配制成所需浓度。工艺A组复方丹参片:80~90℃下提取、浓缩、干燥,加热时间总计65h(72h以内),含丹参酮ⅡA1.08mg/g,丹酚酸B21.25mg/g;工艺B组复方丹参片:70~80℃下提取、浓缩、干燥,加热时间总计30h(36h以内),含丹参酮ⅡA1.76mg/g,丹酚酸B34.83mg/g;工艺C组复方丹参片:80~90℃下提取、浓缩、干燥,加热时间总计80h,含丹参酮ⅡA0.84mg/g,丹酚酸B13.34mg/g。所有供试品药粉,每克相当于丹参原生药0.95g,三七生药0.3g。为实验统一给药剂量,稀释为人用量4.25g/d,相当于原生药5.32g/d,由广州白云山和记黄埔中
4、药有限公司提供,丹参批号0601002、三七粉批号C6C001、冰片批号0604007。 1.2动物杂种犬,体质量7~10kg,雌雄兼用,均由南京中医药大学动物中心收购自市郊的杂种犬,试验前在该中心驯养,经检疫及驱虫后,用于该项实验。 1.3仪器RM-6000八道生理记录仪及其附件,日本NIHONKOHDEN公司产品;DH140人工呼吸器,浙江医科大学医学仪器实验厂产品;BT01-100型恒流泵,保定兰格恒流泵有限公司产品;日立7020全自动生化分析仪,苏州日立电器有限公司产品。 2方法[1] 2.1实验分组与剂量取杂种犬25只,随机分为5组,每组5只动物,雌雄兼用。分别为:假手术组
5、(给予等容积蒸馏水);蒸馏水组(给予等容积蒸馏水);工艺A组(0.12g生药/kg);工艺B组(0.12g生药/kg);工艺C组(0.12g生药/kg)。将各组动物所用药物溶于蒸馏水中,给药容积为1ml/kg。采用组间t检验法与蒸馏水组进行统计学比较。 2.2实验过程试验犬由前肢小隐静脉用3%戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉后,背位固定于手术台上。将针状电极插入犬四肢皮下,记录心电图(ECG)。分离气管并插入气管插管。分离左侧股静脉插入静脉插管,缓慢恒速输入蒸馏水(约1ml/min);于左侧第四、五肋间开胸,暴露心脏,并接人工呼吸机。打开心包膜,缝于胸壁,做成荷包摇篮。用0号丝线结扎左冠状
6、动脉前降支中下1/3处,假手术组只穿线不结扎。于梗塞区附近12个标测点缝置心外膜电图电极,并在远离梗塞区选1对照点,手持绝缘金属点状电极按标测点顺序进行标测,经传感器(JB-642G)、放大器(AB-621G),用八道生理记录仪记录心外膜电图(EECG)(定标:1mm=1mV)。结扎15min后经十二指肠给药,记录结扎前、结扎后15min和给药后30,45,60,90,120,150,180min的EECG。统计各标测点EECG的ST段偏移Σ-ST,以及ST段抬高≥2mV以上的个数N-ST。各组分别于结扎前,结扎15min,给药60min后股静脉取血,用试剂盒测定血清CK、LDH值。实验结束
7、后,立即取出心脏,用蒸馏水洗去血液后,称取全心重和心室重量,并把心室横切成5片,置于37℃1%TTC溶液中染色15min,剪去各心肌片被染色的非梗塞区,把未染色的梗塞区心肌称重,除以全心重或心室重分别得到梗塞范围占全心重或占心室重的百分率。 2.3统计学处理数据以±s表示。所有数据采用student-t检验。 3.2对麻醉犬冠脉结扎所致心肌梗塞N-ST的影响复方丹参片工艺A、工艺B、工艺C组可降低冠脉结扎
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