扶正固肾驱邪合剂对小鼠免疫学影响的实验观察

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1、扶正固肾驱邪合剂对小鼠免疫学影响的实验观察【摘要】目的观察中药制剂扶正固肾驱邪合剂对反复呼吸道感染小鼠免疫学的影响。方法60只小鼠随机分为正常组,模型组,玉屏风组,扶正固肾驱邪合剂高、中、低剂量组。正常组和模型组分别灌服生理盐水0.5mL;扶正固肾驱邪合剂高、中、低剂量组分别灌服扶正固肾驱邪合剂0.5mL/只,分别含生药4g/mL,2g/mL,1g/mL;玉屏风组灌玉屏风口服液0.5mL/只。每日1次,4周后处死。对各组小鼠的体质量、白介素-2、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD3+、脾脏指数、胸腺指数进行统计比较。结果扶正固肾驱邪合剂能明显提高小鼠的体质量、白介素-2、CD4

2、+、CD4+/CD8+、CD3+、脾脏指数、胸腺指数,降低CD8+,差异有统计意义(P<0.05或P<0.01)。结论扶正固肾驱邪合剂对以免疫功能低下为主要病因的小儿反复呼吸道感染的治疗有着广阔的前景。【关键词】扶正固肾驱邪合剂小鼠免疫功能实验研究反复呼吸道感染(RRTI)是指在单位时间内上、下呼吸道反复感染发作次数超过规定次数而言的一种临床综合征,是目前儿科的常见病及多发病,具有反复发作、病程较长、缠绵难愈的特点。现代医学认为RRTI的发病机制多集中在免疫功能缺陷、微量元素和维生素缺乏等方面。为了验证中药在调节免疫功能方面的效果,我们用扶正固肾驱邪合剂对小鼠做了免疫学方面影

3、响的实验研究,现将结果报道如下。1实验材料与方法1.1实验动物清洁级雄性ICR小鼠60只,体质量16~18g,由浙江中医药大学动物中心提供,符合一级实验动物标准。1.2实验药品扶正固肾驱邪合剂(黄芪10g、党参10g、焦白术10g、熟地黄10g、制首乌10g、五味子3g、紫河车3g、茯苓10g、麦冬10g、防风5g、蝉蜕3g、山楂10g、淮山药10g),按比例投药煎煮,由浙江中医药大学配制。玉屏风颗粒,广东环球制药有限公司生产,生产批号20070111,5g/包,12包/盒。氢化可的松注射液,上海现代哈森(商丘)药业有限公司生产,生产批号20070223。0.9%生理盐水,金华市泰来医药

4、有限责任公司生产,生产批号20070111。1.3实验器材K3酶标仪,芬兰LARYSTSGSI公司生产;FA1604电子天平,南京庚辰科学仪器有限公司生产;44LXJ-2离心沉淀机,上海医用分析仪器厂提供;FACSCan流式细胞分析仪,杭州众维科学仪器有限公司生产。1.4主要试剂小鼠白介素-2(IL

5、2)ELISA试剂、小鼠CD3+抗体、CD4+抗体、CD8+抗体,由北京精美生物公司提供。1.5动物造模反复呼吸道感染模型复制参照《实用中医证候模型学》使用的方法。小鼠腹腔注射氢化可的松0.04mL/只,连续12d,造成免疫功能低下(肾虚)小鼠模型。小鼠出现疲乏、自主活动明显减少、嗜睡、反应

6、迟钝、尿量增多等肾阳虚的表现。1.6实验分组与给药适应性喂养5d,确认健康后,随机分为正常组、模型组、玉屏风组、扶正固肾驱邪合剂高剂量组(简称高剂量组)、扶正固肾驱邪合剂中剂量组(简称中剂量组)、扶正固肾驱邪合剂低剂量组(简称低剂量组)6组,每组10只。高、中、低剂量分别相当于临床儿童用量的12倍、6倍和3倍。人鼠剂量换算按章元沛主编的《药理学实验》[1]人和动物的体表面积计算法计算。于造模后第2d开始,正常组和模型组分别灌服生理盐水0.5mL/只;高、中、低剂量组分别灌服扶正固肾驱邪合剂0.5mL/只,分别含生药4g/mL,2g/mL,1g/mL;玉屏风组灌玉屏风口服液0.5mL/只。

7、每日1次,4周后处死。1.7标本收集与指标检测末次给药后,次日称取小鼠体质量。摘眼球取血后,颈椎脱臼法处死小鼠,剪开胸腔、腹腔取胸腺、脾脏,用无菌试纸吸干水分,在天平上称重,按公式“胸腺指数=胸腺质量/体质量(mg/g)”“脾脏指数=脾脏质量/体质量(mg/g)”分别计算胸腺和脾脏的指数。用双抗夹心法和流式细胞仪检测IL

8、2和CD3+,CD4+,CD8+的含量。1.8统计学处理所有数据均用SPSS11.5windows统计软件进行处理。数据以均数±标准差(±s)表示,用F方差分析,检验前先进行正态性分布及方差齐性检验,若呈正态性分布、方差齐,则用t检验,否则行t′检验。2实验结果2.1扶

9、正固肾驱邪合剂对小鼠体质量及小鼠血清IL

10、2的影响模型组体质量低于正常组,差异有统计意义(P<0.05),说明造模成功。治疗后中药各剂量组和玉屏风组体质量显著上升,但与正常组比较差异有统计意义(P<0.05)。高、中、低剂量组与玉屏风组比较,差异无统计意义(P>0.05)。中剂量组体质量高于高、低剂量组,差异有统计意义(P<0.05)。模型组血清IL

11、2的含量明显低于正常组,差异有高度统计意义(P<0.

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