浅谈lg胶囊中灵芝多糖的含量测定研究

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1、浅谈LG胶囊中灵芝多糖的含量测定研究论文摘要:目的建立保健食品LG胶囊中灵芝多糖含量测定的方法。方法以葡萄糖为对照品，采用蒽酮-硫酸比色法，在625nm处测定LG胶囊中灵芝多糖的含量。结果葡萄糖浓度在0.01002～0.06012mg/ml之间有良好的线性关系(r=0.9996)，平均回收率为97.06%，RSD=1.81%。结论该方法简便、快速、准确，可用于LG胶囊的质量控制。关键词:LG胶囊;灵芝多糖;蒽酮-硫酸比色法　LG胶囊是由灵芝多糖及多种营养成分配伍制成的一种保健食品。灵芝多糖有广泛的药理活性，能提高机体免疫力，提高机体耐缺氧能力，消除自由基，抑制肿

2、瘤，抗辐射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力，延长寿命，灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性的特性。在处方中，灵芝多糖用量较大，而且在发挥处方疗效中起主要作用。因此，选择灵芝多糖作为指标性成分对此保健食品进行质量控制。目前比色法为灵芝多糖的常用分析方法，主要有蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法[1，2]。本研究采用蒽酮-硫酸比色法对LG胶囊中灵芝多糖的含量进行了测定。　　1材料　　752型紫外-可见分光光度计，SHIMADZUAY220型电子天平(准确到0.1mg)，SartotiusBP211D型电子天平(准确到0

3、.01mg)。D-无水葡萄糖对照品(购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号10833-200302)。试剂均为分析纯。LG胶囊(自制，批号分别为20100118、20100119和20100120)。　　2方法与结果　　2.1供试品溶液的制备　　取本品内容物粉末约0.1g，精密称定，置索氏提取器中，加水50ml，电加热器加热回流提取至提取液无色，提取液转移至100ml量瓶中，用少量水洗涤容器，洗涤液并入量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取10ml，加入乙醇150ml，摇匀，4℃放置12h，取出，离心，倾去上清液，沉淀加水溶解并转移至50ml量瓶中，加水稀释

4、至刻度，摇匀，即得。　　2.2对照品溶液的制备　　精密称取105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖对照品适量，加水制成毎1ml中含0.1mg的溶液，摇匀，即得。　　2.3显色剂的制备　　精密称取蒽酮0.1g，加80%的硫酸溶液100ml使溶解，摇匀，即得。　　2.4测定方法　　分别精密吸取对照品溶液1ml与供试品溶液2ml，置10ml具塞试管中，加水至2.0ml，精密加入显色剂硫酸蒽酮溶液6ml，摇匀，置水浴中加热15min，取出，放入冰浴中冷却15min，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(2005年版中国药典一部附录VA)，在625nm波长处测定吸收度。　

5、　2.5方法学考察　　2.5.1标准曲线　　分别精密吸取对照品溶液0.2ml,0.4ml,0.6ml,0.8ml,1.0ml,1.2ml，置10ml具塞试管中，照“2.4”项下方法操作，在625nm波长处测定吸收度。以吸收度为纵坐标，浓度(mg/ml)为横坐标，绘制标准曲线。得到回归方程为：Y=9.3641X+0.0943(r=0.9996)，线性范围为0.01002～0.06012mg/ml。2.5.2精密度试验　　取浓度为0.04008mg/ml的葡萄糖对照品溶液，照“2.4”项下方法操作，连续测定6次，RSD为0.21%。结果表明该方法精密度良好。　　2.

6、5.3重复性试验　　取批号为20100118的本品内容物粉末，照“2.1”项下的方法依法制得供试品溶液6份，照“2.4”项下方法操作。结果6份样品中灵芝多糖的平均含量为91.00mg/g，RSD为2.82%。　　2.5.4稳定性试验　　取“2.5.4”项下第一份溶液，照“2.4”项下方法操作，间隔若干时间测定1次，2h内的RSD为0.40%。结果表明显色后溶液在2h内稳定。　　2.5.5加样回收率试验　　取批号为20100118的本品内容物粉末6份，毎份约0.05g，精密称定，分别精密加入葡萄糖对照品5mg，照“2.1”项下的方法依法制得供试品溶液6份，照“2.

7、4”项下方法操作。结果平均回收率为97.06%，RSD为1.81%。结果见表1。表1加样回收试验结果　表2多糖含量测定结果　　2.5.6含量测定　　取批号为20100118的本品内容物粉末，照“2.1”项下的方法依法制得供试品溶液6份，照“2.4”项下方法操作。结果见表2。　　3讨论　　本标准的制订主要参考《中国药典》(2005版一部)灵芝项下多糖含量测定方法，根据本产品中多糖的含量，调整供试品取样量为0.1g。　　本方法中蒽酮的配制要求为80%的硫酸，硫酸浓度必须符合要求，否则蒽酮不易溶解。