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1、评估氟西汀治疗形觉剥夺弱视模型猫的疗效 根据引起弱视的病因,常见的弱视可分为:斜视型弱视、屈光不正型弱视、屈光参差型弱视及形觉剥夺型弱视,其中以形觉剥夺型弱视治疗效果最差. 弱视的发病机制十分复杂,目前弱视发病机制的分子神经生物学研究方面取得了一些进展,尤其弱视发展中各级神经元间突触连接的可塑性变化的理论为治疗效果差的形觉剥夺性弱视提供了新的治疗契机. 基于此,本工作使用氟西汀粉剂,配置合适浓度,使用新生猫制作形觉剥夺型弱视模型,采用视觉诱发电位检测,观察视觉诱发电位(P-VEP)峰的潜伏期和波幅的变化,来评估氟西汀治疗形觉剥夺弱视模型猫的疗效. 材料和
2、方法 实验动物及分组健康清洁级新生猫(出生2周,性别不限)18只和母猫3只,新生猫出生时常规体检无异常眼疾;随机分为正常对照组3只,形觉剥夺组猫(5组,每组3只,共15只). 建模:眼睑缝合操作[1]:自内眦到外眦剪除上下睑缘1.5mm,皮肤及皮下行分层水平褥式缝合,封闭睑裂,点左氧氟沙星眼液,每日3次,共7天.正常对照组:不行眼睑缝合. 幼猫均在正常同等环境下散养,在进行视觉诱发电位前剪开缝合眼,并再次点左氧氟沙星眼液3次.所有幼猫用美多丽眼液扩大瞳孔,行视X膜检影,矫正屈光.12周后形觉剥夺弱视猫模型建成,开始使用氟西汀(Fluoxetine)药粉(浓
3、度:20μmol/l,2mg/kg)给猫灌胃,每天1次,连续4周. 视觉诱发电位检测采用德国Roland公司生产的RETIScan3.20视觉电生理仪,P-VEP波形图中的P波,及其前、后出现的2个的N1和N2波,主要以P波的潜伏期及波幅为分析指标.分别在使用氟西汀4周后、8周后、12周后、16周后、20周后行猫的视觉诱发电位检测.P-VEP记录[1]:幼猫经氯氨酮(15mg/kg)腹腔麻醉,剃净幼猫额部、枕部及右耳背毛,在电屏蔽暗室内进行实验.采用自制钢针电极,将引导电极插入枕骨中线凹陷正上方2cm处颅骨下,参考电极置于鼻根部上方lcm处皮下,接地电极
4、为右耳尖,单极引导.作用电极与参考电极间阻抗<5KΩ;采样时间250ms,波形进行128次叠加平均. 数据分析:分析时用RETIScan3.20自带程序分析N1P1,N2P2波的潜伏期及波幅.有关数据用RETIScan3.20自带程序分析处理后,将初步分析结果输入Excel,统计分析采用SPSSll.0软件.采用t检验,以P<0.05为有统计学意义. 结果 正常猫P-VEP分析(表1)正常猫单眼P-VEP,由1个明显的正波P波和其前较小的负波N波组成,P波波幅均大于N波.P波的波形及出现的时间较恒定,N波变异较P波大,通常记录不到N
5、2波.本实验正常对照组PVEP定量分析表明,P波的平均潜伏期为48.33±3.51ms,平均波幅为55.69±3.52μV. 单眼剥夺猫P-VEP分析(表1)本实验组单眼形觉剥夺猫P-VEP定量分析表明,P波的潜伏期延长,平均值为58.23±4.62ms,波幅增加,平均值为38.24±2.96μV.组间比有统计学意义(P<0.05).喂氟西汀治疗后单眼剥夺猫图形视觉诱发电位分析(表2、表3). 治疗4周、8周后,P波的潜伏期稍缩短,波幅稍增加,组间比较无统计学意义.治疗12周后,P波潜
6、伏期缩短,波幅增加,与治疗前、后组之间相比有统计学意义(P<0.05),但仍低于正常对照组猫.治疗16周、20周后,P波潜伏期进一步缩短及波幅进一步增加,与未经治疗组相比有统计学意义(P<0.05,n=3). 讨论 弱视是常见眼病,患病率约为3%,我国目前人口14亿,儿童弱视患者估计达3千万,为数相当可观.若弱视治疗未愈,对这些儿童将来的学习和求职生涯产生巨大的影响,对这些家庭造成不必要的压力.在弱视的发病机制研究中,主要有中枢病因学说与外周病因学说.中枢病因学说认为,弱视患者的主要受损部位在视皮层. 由于各种原因使视觉信息传入减少,致视皮层双
7、眼性神经元发育障碍,视功能发育延迟而发生弱视.外周病因学说认为,弱视是由于视X膜X型神经节细胞未受到足够刺激所致.两种学说相互联系,互为补充.中枢病因学说的直接的电生理依据是弱视眼的P-VEP以及多导P-VEP的P波振幅明显下降,伴或不伴随潜伏期的延长[2].外周发生学说的电生理依据是弱视眼仅损害了对高空间频率刺激的反应能力[3]. 单眼睑缝合是研究发育期形觉剥夺效应的一种有价值的实验方法,能够藉此研究弱视动物模型的视觉电生理特征.弱视病理生理研究提示:弱视眼P-VEP的异常源自视皮层对图形运动感觉及边界对比效应敏感的神经元的功能异常.但在单眼形觉剥夺猫的健眼
8、,其P-VEP的P波潜伏
