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时间:2018-04-30
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1、不同频率电刺激大鼠丘脑底核对束旁核神经元自发放电的影响【关键词】丘脑底核束旁核电刺激 Abstract:ObjectiveToexamtheeffectofthedifferentfrequencystimulationofthesubthalamicnucleus(STN)ontheneuronalactivitiesoftheparafascicularnucleus(PF)inrats.MethodsDifferentfrequencystimulation(20,50,100,130,200Hz,intensity0.4mA,s,duratio
2、n5s)ajorityofPFneuronspresentedexcitatoryresponse.ConclusionsHigh-frequencystimulationoftheSTNinducedanexcitoryeffectonthespontaneousactivityofthePFneuronsinnormalrats.ItsuggestedthatSTN-HFSusedtotreatParkinson'sisrelatedtoexcitationoftheactivityoftheparafascicularnucleus. Keyic
3、nucleus;parafascicularnucleus;electricalstimulation 近些年来,采用高频电刺激STN改善帕金森氏病(PD)的运动症状,取得了可喜的疗效。丘脑底核-深部脑刺激术(STN-DBS)已经逐渐成为PD治疗的首选方法[1,2],但其机制却尚未阐明。最近一些研究表明束旁核(PF)参与运动的调节。PF是丘脑髓板内核群后群的一组核团,与基底神经节的不同核团之间有着广泛的联系,对基底节环路发挥有效的调控功能[3]。但高频刺激STN治疗PD的运动症状,是否有PF神经元的参与还尚未见报道。本实验用电刺激方法研究大鼠STN对P
4、F神经元放电的影响,有助于阐明高频电刺激STN治疗PD的作用机制。 1材料和方法 1.1实验动物及仪器 成年雄性Spragne-DaL/100g)腹腔麻醉后,置于脑立体定位仪上。行常规开颅手术,剥除硬脑膜,并行小脑延髓池引流,以降低颅内压,防止脑疝。参照PaxionsΩ,管内灌注含1%滂胺天蓝的3.0mol/LNaCl溶液,借助微电极推进器将记录电极缓慢推进到大鼠的PF内。单位放电经微电极放大器采集、滤波(300~3000Hz)、显示于示波器,并输入计算机用Spike2生物信号采集系统处理。实验中只对信噪比>3/1和放电稳定的神经元进行记录。
5、在进行电刺激前每一单位需记录2~3min的基础放电。 1.2.2组织学检测 在每一次电生理学记录完毕后,经微电极电泳滂胺天蓝(-20μA,15min)标记记录部位,刺激部位采用直流电损毁法标记。大鼠用含4%多聚甲醛的0.1mol/L磷酸缓冲液经颈动脉灌流固定后,立刻断头取脑,放入相同固定液4h,再将脑组织移入30%的蔗糖磷酸缓冲液(pH7.4)至沉底后行冠状冰冻切片,片厚30μm。焦油紫染色。光镜下观察,仅取记录和刺激部位均正确的资料进行统计学分析。 1.3.2神经元放电形式变化 根据下面公式判定神经元对电刺激的反应: R=(刺激后放电频率/刺
6、激前放电频率-1)×100% R≥20%为兴奋型反应,R≤-20%为抑制型反应,介于两者之间的为无反应。 结果以平均值±标准误(±s)表示,显著性检验用t检验,P<0.05为有显著性差异,P<0.01为有极显著性差异。 2结果 2.1丘脑束旁核神经元的自发放电活动 共记录了53个正常大鼠PF神经元的自发放电,其自发放电频率较低,放电频率在0.98~26.9Hz之间,平均为(9.27±0.74)Hz。其中多数神经元呈不规则放电,部分呈爆发放电,偶见规则放电。 2.2电刺激STN对PF神经元放电的影响 共观察了57个正常大鼠PF神经
7、元对高频刺激(频率130Hz,强度0.4mA,波宽0.06ms,时程5s)STN的反应。高频电刺激STN结束后使大多数PF神经元(35/57,61.4%)的放电频率增加,平均由刺激前的(7.55±0.89)Hz增加到刺激后的(13.33±1.43)Hz(P<0.001),平均增加了(5.78±0.99)Hz。另有7个神经元抑制(7/57,12.28%),15个神经元无反应(15/57,26.32%)。实验还观察了26个PF神经元对不同频率电刺激(20、50、100、130、200Hz)STN后的反应(见表2)。结果显示刺激频率低于100Hz时,多数
8、神经元无明显反应;刺激频率为130Hz和200Hz时,大多数神经元呈兴奋反应,放
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