家兔尿量及尿中钠,氯离子含量的影响

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1、实验九利尿药对麻醉家兔尿量及尿中钠、氯离子含量的影响【目的和原理】学习急性利尿的实验方法，观察呋塞米对麻醉兔的利尿作用；学习测定尿液中钠离子和氯离子的方法。尿液中的钠离子与醋酸铀镁试剂作用,被沉淀为醋酸铀镁,然后以亚铁氰化钾和试剂中剩余的醋酸铀作用,使成形棕红色的亚铁氰化铀。尿液中钠的含量越多,剩余的醋酸铀越少,显色越淡。反之,钠的含量越少,剩余的醋酸铀越多,则显色越深。故从剩余的醋酸铀量,可间接计算出钠的含量反应式如下：ＮaCl+3(UO2)(CH3COO)2+Mg(CHCOO)2+CHCOOH—→(UO2)3MgNa(CH3COO)9+HCl2(UO2)(CH3COO)2+K4〔Fe

2、(CN)6〕—→(UO2)2〔Fe(CN)6〕+4CH3COOK棕红色用硝酸银试剂将尿液中的氯离子沉淀为氯化银。如硝酸银略有过量，便与铬酸银作用，成形桔红色的铬酸银。其反应式如下：NaCl+AgN03→AgCl↓+NaN032AgN03+K2Cr04→AgCrO4↓+2KN03【实验对象】家兔,1.5～2.5kg一．家兔尿量的测定【实验药品】25%乌拉坦、1%呋塞米【实验器材】兔手术台、量筒、注射器、手术器械【实验方法】1.水负荷：灌胃给与自来水40ml/kg，避免灌至气管。2.麻醉：耳缘缓慢i.v.25%乌拉坦4ml/kg，随时观察角膜反射，反射消失即停止注射。3.手术：背位固定家兔，

3、剪去下腹部被毛，于耻骨联合上方切开皮肤约4～5cm，并沿腹白线剪开肌肉，暴露膀胱，在少血管区作荷包缝合后行膀胱插管，在插管前要将插管里充满生理盐水。4.记录每2min的正常尿量，连续记录10min。5.耳缘静脉注射1%呋塞米4mg/0.4ml/kg，记录给药后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20min的尿量（每2min的尿量）【实验结果】结果汇总，计算不同时间尿量的均值，以尿量毫升数为纵坐标，给药后时间为横坐标作图。二．尿液中钠离子和氯离子的含量测定测定体液中的钠离子以火焰光度法为最简便可靠,在没有火焰光度计的场合,也可用醋酸铀镁比色法来进行。测定体液中的氮离子则多用银滴定

4、法。(一)尿中钠离子的醋酸铀镁比色测定法【实验试剂】1.醋酸铀镁试剂：取醋酸铀（U2(CH3COO)2·2H2O）4g、醋酸镁（Ｍg(CH3COO)2·4H2O）15g、冰醋酸15ml、加蒸镏水75ml，加热溶解，并煮沸2分钟。放冷后加蒸镏水至100ml,再加无水乙醇至500ml，于冰箱中过夜。除去底层的微量沉淀，将上清液贮存于棕色试剂瓶中，置冰箱中备用。2.1%醋酸溶液（V/V）。3.10%亚铁氰化钾溶液。4.钠标准溶液：①当量钠溶液：取氮化钠（Ａ．Ｒ．）少许置于烧杯中,放置110～120℃烘箱内4小时,取出后置于干燥器内待冷，精密称取5.845g置于100ml容量瓶内，加蒸镏水至刻度

5、。②150mEq/L钠标准液:准确吸取当量钠溶液15.0ml,置于100ml容量瓶内,加蒸镏水至刻度。③250mEq/L钠标准液:准确吸取当量钠溶液25.0ml,置于100ml容量瓶内,加蒸镏水至刻度。④200mEq/L钠标准液:准确吸取当量钠溶液20.0ml,置于100m1容量瓶中，加蒸镏水至刻度。【实验器材】光电比色计、冰箱、离心机、烧杯、试管、吸管。【实验方法】1.收集各实验组相应时间内的尿液，分别合并混匀，测量总量。分别吸取各组尿液5ml,加入氢氧化钙0.2g,摇匀,放置15分钟,过滤,以除去磷酸盐类。2.滤过之尿液与等量200mEq/L钠标准液混合吸取0.1ml,按表5.1操作

6、。表1尿钠测定快速比色法操作步骤步　　　　　　　骤管别空白管（ml）标准管(ml)测定管(ml)与200mEq/钠标准液混合的尿液150mEq/L标准液250mEq/L标准液醋　酸　铀　镁试　剂——0.15.0—0.1—5.00.1——5.0以玻棒充分搅拌，使生沉淀，试管加塞，置冰箱中10分钟，离心沉淀。分别吸取上清液于另外三只试管中1%醋　酸　溶　液10%亚铁氰化钾溶液0.28.00.40.28.00.40.28.00.4混匀后,10min内用520nm或绿色滤光片光电比色,以250mEq/L钠标准管作空白管，校正光密度到0点，读取标准管（150mq/L钠溶液）及测定管的读数。计算Na

7、+mEq/L×2.3=Na+mg/100ml【注意事项】1.醋酸铀镁的加入量必须准确，否则将影响实验结果。2.操作时试管放入冰箱及离心沉淀时，均需加塞，以免试剂中乙醇浓度变化而影响结果。3.醋酸铀镁试剂中所含醇的浓度必须为80%(V/V)，否则影响钠的沉淀。4.尿中钾的浓度较高，与醋酸铀镁试剂作用后能与钠共同发生沉淀。但如将尿钠浓度提高至150mEq/L以上时，则钠的干扰就不明显，因此宜在尿液中事先加入适当浓度钠标准液，然后测定之。