药理学实验指导:利尿药对麻醉家兔尿量及尿中钠、氯离子含量的影响

药理学实验指导:利尿药对麻醉家兔尿量及尿中钠、氯离子含量的影响

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1、实验九利尿药对麻醉家兔尿量及尿中钠、氯离子含量的影响【目的和原理】学习急性利尿的实验方法,观察咲塞米对麻醉兔的利尿作用;学习测定尿液屮钠离了和氯离子的方法。冰液屮的钠离子与醋酸铀镁试剂作用,被沉淀为醋酸铀镁,然后以亚铁氟化钾和试剂中剩余的醋酸铀作用,使成形棕红色的业铁亂化铀。尿液屮钠的含最越多,剩余的醋酸铀越少,显色越淡。反Z,钠的含量越少,剩余的醋酸铀越多,则显色越深。故从剩余的醋酸铀量,町间接计算出钠的含量反应式如下:NaCl+3(U02)(CH3COO)2+Mg(CHCOO)2+CHCOOH—--(U02);AlgNa(CH^COO)g

2、+HCl2(U02)(CH3COO)2+K4(Fe(CN)e)(U02)2(Fe(CN)6)+4CH3C00K棕红色用硝酸银试剂将尿液屮的氯离了沉淀为氯化银。如硝酸银略有过量,便与倂酸银作用,成形桔红色的俗酸银。其反应式如下:NaCl+AgN03-AgClI+NaN032AgN0s+K2Cr04-*AgCrO.,I+2KN03【实验对象】家兔,1・5〜2.5kg一.家兔尿量的测定【实验药品】25%乌拉坦、1%咲塞米【实验器材】兔手术台、量筒、注射器、手术器械【实验方法】1.水负荷:灌胃给与自來水40ml/kg,避免灌至气管。2.麻醉:耳缘缓慢

3、i.v.25%乌拉坦4ml/kg,随时观察角膜反射,反射消失即停止注射。3.手术:背位固定家兔,剪去下腹部被毛,于耻骨联合上方切开皮肤约4〜5cm,并沿腹口线剪开肌肉,暴露膀胱,在少血管区作荷包缝合后行膀胱插管,在插管前要将插管里充满生理盐水。4.记录每2min的正常尿量,连续记录10min。5.耳缘静脉注射1%咲塞米4mg/0.4ml/kg,记录给药后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20min的尿量(每2min的尿量)【实验结果】结果汇总,计算不同吋间尿量的均值,以尿量毫升数为纵坐标,给药后吋间为横坐标作图。二.尿液中钠离子和

4、氯离子的含量测定测定体液中的钠离子以火焰光度法为最简便可靠,在没有火焰光度计的场合,也可用醋酸铀镁比色法來进行。测定体液小的氮离子则多用银滴定法。(一)尿中钠离子的醋酸铀镁比色测定法【实验试剂】1.醋酸铀镁试剂:取醋酸铀(U2(CH3C00)2-2H20)4g.醋酸镁(Mg(CH3C00)2•4H20)15g.冰醋酸15ml、加蒸锚水75ml,加热溶解,并煮沸2分钟。放冷后加蒸锚水至100ml,再加无水乙醇至500ml,于冰箱小过夜。除去底层的微量沉淀,将上清液贮存于棕色试剂瓶屮,置冰箱中备用。2.1%醋酸溶液(V/V)o3.10%亚铁鼠化钾

5、溶液。4.钠标准溶液:①当量钠溶液:取氮化钠(A.R.)少许置于烧杯屮,放置110〜120°C烘箱内4小时,取出后置于干燥器内待冷,精密称取5.845g置于100ml容最瓶内,加蒸钿水至刻度。%1150mEq/L钠标准液:准确吸取当量钠溶液15.0ml,置于100ml容量瓶内,加蒸锚水至刻度。%1250mEq/L钠标准液:准确吸取当量钠溶液25.0ml,置于100ml容量瓶内,加蒸锚水至刻度。%1200mEq/L钠标准液:准确吸取当量钠溶液20.0ml,置于100ml容量瓶中,加蒸锚水至刻度。【实验器材】光电比色计、冰箱、离心机、烧杯、试管、

6、吸管。【实验方法】1•收集各实验组相应时间内的丿求液,分别合并混匀,测量总量。分别吸取各组尿液5眉,加入蛍氧化钙0.2g,摇匀,放置15分钟,过滤,以除去磷酸盐类。2.滤过Z尿液与等量200mEq/L钠标准液混合吸取0.1ml,按表5.1操作。表1尿钠测定快速比色法操作步骤步骤管别空白管(ml)标准管(ml)测定管(ml)与200mEq/饰标准液混合的尿液——0.1150mEq/L标准液—0.1—250mEq/L标准液0.1——酷酸铀镁试剂5.05.05.0以玻棒充分搅拌,使生沉淀,试管加塞,置冰箱中10分钟,离心沉淀。分别吸取上清液于另外三

7、只试管中0.20.20.21%醋酸溶液8.08.0&010%亚铁亂化钾溶液0.40.40.4混匀后,10min内用520nm或绿色滤光片光电比色,以250mEq/L钠标准管作空白管,校正光密度到0点,读取标准管(150mq/L钠溶液)及测定管的读数。计算cn测定管光密度inn1AA]cNT+c/T250—-~_x10()—100x2=NamEq/LL标准管光密度」4NamEq/LX2.3=Na+mg/100ml【注意事项】1.醋酸铀镁的加入量必须准确,否则将影响实验结果。2.操作时试管放入冰箱及离心沉淀时,均需加塞,以免试剂中乙醇浓度变化而

8、影响结果。3.醋酸铀镁试剂中所含醇的浓度必须为80%(V/V),否则影响钠的沉淀。4.尿中钾的浓度较高,与醋酸铀镁试剂作用后能与钠共同发牛沉淀。但如将丿求钠浓度提高

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