最新实训二 显微镜油镜的使用与细菌形态观察-药学医学精品资料.ppt

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1、最新实训二显微镜油镜的使用与细菌形态观察-药学医学精品资料（一）实验目的1、学习微生物涂片、染色的操作技术；2、掌握革兰氏染色的方法；3、初步掌握无菌操作技术；4、掌握革兰氏染色反应原理、操作步骤和意义。（二）实验内容及原理1.简单染色法只用一种染料使细菌着色以显示其形态，不能辨别细菌细胞的构造，通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红等）使其着色。菌种：培养12-16h的枯草杆菌染色液和试剂：草酸铵结晶紫染液、卢哥氏碘液、95%酒精、蕃红染液、二甲苯溶液、香柏油、无菌水器材：废液缸、洗瓶、载玻

2、片、接种杯、酒精灯、擦镜纸、显微镜等。（三）实验器材制片→初染（结晶紫1min）→水洗→媒染（碘液1min）→水洗→脱色（乙醇20-30s）→水洗→复染（番红2min）→水洗→干燥→观察(四）实验方法：（1）制片：取菌种培养物常规涂片、自然干燥、加热固定；注意无菌操作crystalvioletstainwashwithwaterStainwithgram'siodinesolutionDecolorizebyadding95%alcohol革兰氏阴性杆菌革兰氏阳性杆菌Counterstainwit

3、hSafranin①将浸过油的镜头按下述方法擦拭干净：a.先用擦镜纸将油镜头上的油擦去。b.用擦镜纸沾少许二甲苯液将镜头擦2-3次。c.再用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次。注意擦镜头时向一个方向擦拭。将显微镜小心轻拿，按号放入显微镜柜中。②观察后的染色玻片用废纸将香柏油擦干净，放入回收容器内。（10）实验完毕后的处理1、载玻片要洁净无油迹。涂片时，滴水不要过多，挑菌量宜少，涂片要均匀，菌膜宜薄。2、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。3、染色过程中勿使染色液干涸。4、选用幼龄的细菌。？（五）注意事项作业

4、绘出枯草杆菌的形态图，并注明两菌的革兰氏染色的反应性。1．你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？2．当你对一株未知菌进行革兰氏染色时，怎样能确证你的染色技术操作正确，结果可靠？辅助线的作法——角平分线模型知识要点角平分线AOB21性质：①角平分线上的点，到角两边的距离相等.②角内部到角的两边距离相等的点，都在这个角的平分线上（逆运用）PMN典型例题如图，若OP是∠AOB的角平分线，PE⊥OA，可过P点作PF⊥OB.则有结论：（1）PE=PF.（2）证得△OPE≌△OP

5、F.图中有角平分线，可向两边作垂线PFBOAE（3）OE=OF.CBAD典型例题例1.如图在△ABC中，∠A=90°，AB=AC，BD是∠ABC的平分线.求证：BC=AB+AD.又∵A=90°,AB=AC∴△ABC为等腰直角三角形证明：∵∠A=90°，BD是∠ABC的平分线∴DE=AD，BE=AB45°∴∠C=45°∵DE⊥BC∴∠CDE=∠C=45°过D作DE⊥BC于E1245°∴DE=CE∴BC=BE+EC=AB+ADE典型例题例2.如图，BE平分∠ABC，CE平分∠ACD,求证：E点在∠FA

6、C的平分线上.证明：∵BE平分∠ABC∴EM=EN∵CE平分∠ACD∴EM=EH，∴EN=EH过E作EM⊥BD于M，过E作EN⊥BF于N,过E作EH⊥AC于H,连接AE.∴E点在∠FAC的平分线上CBADEFMHNBOAPE典型例题如图，若OP是∠AOB的角平分线，可在OB上取OF=OE.则有结论：（1）△OPE≌△OPF（2）PF=PE，OF=OE.截长补短在角边，对称以后关系现F（3）∠PFO=∠PEO，∠OPF=∠OPECBAD典型例题例3.如图，等腰三角形ABC中，AB=AC，∠A=108

7、°，BD平分∠ABC.求证：BC=AB+DC.又∵A=108°,AB=AC证明：∴∠BED=∠A=108°∴∠DEC=72°在BC上截取点E，使BE=BA，连接DE36°∴∠C=∠ABC=36°∴BC=BE+EC=AB+DC1272°108°108°72°∵BD是∠ABC的平分线∴∠1=∠2，又∵BD为公共边∴△ABD≌△EBD（SAS）∴∠EDC=∠DEC=72°∴EC=DCE典型例题例4.如图，已知AB∥CD，AE、DE分别平分∠BAD和∠ADC，求证：AD=AB+CD.证明：∵∠1=∠2，A

8、E为公共边∴△ABE≌△AFE（SAS）∴∠B=∠5∵AB∥CD∴∠B+∠C=180°∵∠5+∠6=180°∴∠C=∠6在AD上截取点D，使AF=AB，连接EF21∴AD=AF+FD=AB+CDBCADEF3456∵∠3=∠4，DE为公共边∴△CDE≌△FDE（SAS）∴CD=FD典型例题BOA如图，若OP是∠AOB的角平分线，过P点作OB的平行线交OA于E点.则有结论：△EOP是等腰三角形角平分线平行线，等腰三角形来添PEFACBDE典型例题例5.如图，DE=EC，DF//BA，