实验十、人类染色体核型分析.ppt

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1、实验十人类染色体组型分析实验目的：1、了解人类外周血淋巴细胞的培养和染色体标本的制备方法2、了解人类染色体的形态和分组特征，学习染色体组型分析方法实验内容与原理：1、人类染色体标本制作简介人类外周血淋巴细胞的培养及染色体标本制作技术淋巴细胞——G0期或G1期1960年Nowell和Morhead植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)外周血淋巴细胞的培养和染色体标本制作的步骤：⑴培养液的分装：培养液：RPMI1640或M199、小牛血清、PHA、肝素、双抗（青霉素、链霉素）⑵采血：静脉采血⑶培养：37℃培养66～72h⑷秋水仙素处理：

2、秋水仙素→分裂阻止剂⑸低渗处理：使红细胞破碎，白细胞膨胀⑹离心：收集白细胞⑺固定：固定液——甲醇：冰醋酸=3：1⑻离心、再固定：⑼再离心：弃上清，留白细胞⑽制片：⑾染色：Giemsa染液⑿镜检：⒀封片：⒁显微摄影→进行核型分析2、人类染色体组型分析*核型（karyotype)*组型(idiogram)*染色体组型分析（1）染色体的数目人类染色体2n=46核型：正常男性——46，XY正常女性——46，XX人类染色体按其形态大小分7组：A、B、C(X)、D、E、F、G(Y)，其主要特点和鉴别要求如下：组别编号形态大小着丝粒位置随体鉴别要求A1~3最大1、3

3、中部2近中无要求明确区分各号B4~5次大近中无要求不与其他组相混C6~12中等近中无要求6、7、8不与其他混D13~15中等近端有要求不与其他组相混E16~18较小16中17、18近中无要求明确区分各号F19~20小中部无要求不与其他组相混G21~22最小近端有要求21、22与Y区分染色体的排列规则：①染色体的大小，大→小②着丝粒位置，中部→端部（2）染色体的长度及着丝粒位置1μm：微型染色体1~4μm：小型染色体4~12μm：中型染色体12μm＜：大型染色体①相对长度:②臂率:1.01～1.70中部着丝粒染色体m1.71～3.00近中着丝粒染色体sm

4、3.01～7.00近端着丝粒染色体st7.01～∞端部着丝粒染色体t③着丝粒指数（3）随体及次缢痕的有无实验材料与用具：*人类染色体照片（复印）*剪刀、胶水、组型分析报告纸实验步骤：1、染色体分组编号了解各染色体的特点一个照片作对照，另一分组编号用2、核对、调整、粘贴着丝粒在横线上，p在上q在下3、分析结果作业：人类染色体组型分析报告姓名：日期：材料：结性染色体常染色体2n果对照照片12345AB6789101112131415CD16171819202122EFGXX/XY