nacl胁迫下玉米幼苗叶片中几个microrna的real—time pcr 鉴定上的论文

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1、NaCl胁迫下玉米幼苗叶片中几个microRNA的real—timePCR鉴定上的毕业论文目录目录1摘要4关键词4ABSTRACT5KEYWORDS51.绪论61.1盐害对植物的影响61.1.1盐害简介61.1.2盐害对玉米的影响61.1.3其它因素对受盐胁迫玉米的影响61.1.3.1NO对盐胁迫的缓解作用61.1.3.2丛枝菌根对盐胁迫的缓解作用71.1.3.3脱落酸对盐胁迫防御作用71.1.3.4外源Ca2+对盐胁迫的缓解作用71.1.3.5铈（Ce）对受盐胁迫玉米的作用71.1.3.6硅对盐胁迫下玉米幼苗生长的影响71.

2、2实时定量PCR的原理81.2.1生物原理81.2.2化学原理81.2.2.1荧光染料嵌入法81.2.3实时定量PCR的重要概念91.3microRNA简介91.3.1microRNA概述91.3.2植物的microRNA101.3.3miRNA的特征与差异111.3.4鉴定miRNA的方法111.3.5几种热门的microRNA介绍121.3.5.1mir-21的研究121.3.5.2Let-7的研究12421.3.6MiRNA与植物逆境胁迫的研究进展131.4microRNA种类间存在协同作用关系141.5与microRN

3、A研究密切相关的学科或研究方向141.6选题目的及意义151.7实验流程152.实验内容162.1材料与仪器162.1.1实验材料、试剂、器皿及资料162.1.2实验仪器162.2实验方法162.2.1营养液的配制162.2.2玉米种子的处理及萌发172.2.3玉米幼苗的移栽172.2.4玉米幼苗的处理172.2.5总RNA的提取172.2.5.1CTAB-LiCl法提取总RNA172.2.5.2SDS法提取总RNA182.2.5.3TRNzol-A+法提取总RNA192.2.6MiRNA定量PCR的引物设计192.2.7Mi

4、RNA的cDNA的合成192.2.8RealTimePCR反应212.2.9待检验miRNA的引物设计212.2.10荧光定量标准曲线的制定212.2.11内参的选择222.3实验结果232.3.1总RNA提取结果232.3.25个待检测MiRNA的realtimePCR结果282.3.3相对表达量的柱状图结果302.4实验数据处理与结果分析382.4.1trizol法提取的总RNA的OD值分析及讨论382.4.2trizol法提取的总RNA的电泳结果分析及讨论382.4.3实时定量PCR结果分析及讨论382.4.4相对表达量

5、的柱状图分析3842参考文献40附录1缩略词41附录二REALTIMECT值41致谢4242NaCl胁迫下玉米幼苗叶片中几个microRNA的Real-timePCR鉴定作者：谢玺（西北农林科技大学生命科学学院）指导教师：武永军摘要：microRNAs(miRNAs)是一类长度为20-25nt的非编码内源小分子RNA，广泛存在于各种生物中。它由基因组特定区域编码，抑制靶基因翻译。在线虫、植物和哺乳动物中的研究发现其功能多种多样。盐渍化土壤在我国分布广、面积大，已成为一种严重的环境问题和制约粮食生产的主要因素之一。盐渍化主要发生

6、我国西部和北部地区，而玉米则是北方主要作物之一，故研究盐胁迫对玉米的影响是十分有必要的。本实验以玉米幼苗叶片为材料，通过NaCl胁迫的方式处理玉米并提取总RNA，对前期已经预测到的5个新的miRNAs进行了RealtimePCR验证。设置3h、6h两个时间梯度和5%、10%、20%三个浓度梯度。利用real-timePCR的数据做出相对表达量的柱状图并分析，做出推断。关键词：玉米；盐胁迫；miRNA；RealtimePCR42IdentificationofseveralmiRNAsinleavesofmaizeseedlin

7、gsusingreal-timePCRunderNaClstressAuthor:XiXieTutor:YongjunWuABSTRACT：microRNAs(miRNAs)areakindofnoncodingendogenousRNAsandtheydistributewidelyinnematode,plant,mammalandotherorganisms.Theywerecodedbythespecialregionofgenome,maturedbyDicerandotherrelevantenzyme.Theyb

8、indwithRISCandguidecomplexustocutthemRNAoftargetgeneorpreventthetranslationoftargetgene.Researchofnematode,plantandmammalfindmiRNA’sfuncti