过敏原检测教学提纲.ppt

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1、过敏原检测过敏反应原理过敏反应的原理，通俗地说，就是当过敏原第一次进入人体后，产生了能够引起过敏反应的物质，当过敏原第二次进入人体后，这些物质就发生病理性的免疫反应，产生各种过敏的症状。所以说，往往第一次接触到的物质不会过敏，反复的接触后，可出现过敏性症状。反复接触后，症状一般会逐渐加重。过敏反应的类型过敏（变应性）分为4种不同的种类，其中最常见的是I型和IV型。I型有时也被称为“特应性”或者“速发型变应性”。例如，人体在被昆虫蜇伤后几秒钟就会作出反应，动物毛发过敏和花粉过敏在几分钟内就有反应，食物过敏的

2、时间则在30分钟以内。与此相反，IV型过敏的反应则要慢得多，症状要在一天或者几天之后才会出现。例如装饰物过敏和许多类型的职业过敏等。因此，人们把其称为“迟发型变应性”。TypeITypeIITypeIIITypeIV早期反应IgE-介导肥大细胞脱核数分钟内花粉热细胞毒反应IgG/IgM介导血细胞的破坏数小时到一天药物过敏免疫复合物形成持续产生IgG/IgM免疫复合物数小时到一天免疫复合物病细胞免疫反应T-细胞介导反应12小时到数周接触过敏反应(Ni)4种过敏反应类型(超敏反应)I型过敏反应幼稚T细胞和B细

3、胞与过敏原接触后活化若活化的TH2细胞与相应的活化T细胞接触后，将刺激产生特异性的IgE抗体IgE由浆细胞(B细胞)释放，然后结合到肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面当再次接触到过敏原后，细胞膜表面的IgE抗体通过过敏原相互连接，并启动释放相关介质（组胺）最终导致典型过敏反应的产生。过敏原种类引起过敏反应的抗原物质常见的有2000-3000种，它们通过吸入、食入、注射或接触等方式使机体产生过敏现象。吸入过敏原：空气中的吸入过敏原(例如.植物花粉,动物毛发,室内灰尘或虫螨等)食物过敏原;通过胃肠道吸收(例如.鱼、肉

4、、蛋、坚果和蔬菜等)接触过敏原:皮肤接触（例如：金属饰品、化妆品和生活日用品等）输注过敏原：直接输入体内(例如：昆虫或动物的毒液,注射类药品等)过敏原检测预防过敏，关键是寻找过敏原。过敏原一旦明确，应立即停止继续接触过敏原，过敏反应通常自然消失。过敏原的检查主要分体内检测和体外检测两种。体内检测皮内试验：通过体内注射过敏原，经过一定时间后观察皮肤的反应，根据皮肤反应的情况确定是否对这种过敏原过敏。点刺试验：点刺试验可视为一种特殊的皮内试验，其方法是先将点刺皮试液滴在皮肤上，然后用点刺针穿过液滴，刺入皮内。

5、皮肤的点刺液仅为皮内试验的万分之一，安全性较高。由于皮损小，患者无痛苦。斑贴试验：斑贴试验主要用于检测接触性过敏原。具体方法是将试剂贴在皮肤上观察一段时间后，根据皮肤对接触物的反应判断是否对这种物质过敏。斑贴试验是检测面部和手部等部位过敏原有效的方法之一。体外检测血清学IgE抗体检测：针对I型变态反应检测总IgE抗体及特异性IgE抗体。可进行众多疾病抗体的筛选检测，系统方法可信，特异性与皮试相近，并与常规体外单项过敏原检测试验结果相符。对患者来说不存在风险尤其适合5岁以下儿童，可避免强烈的皮肤反应与其它皮

6、肤病区别不需附加其它药物适合无法进行皮试的食物过敏原的检查体外检测优势步骤1:总IgEELISA步骤2:特异性IgEEUROLINE检测IgE总IgE超出参考范围大多数是由于过敏反应导致例外:寄生虫病;免疫抑制;HIV;重度烧伤临床相关特异性IgE结果与总IgE相关的特异性IgE浓度越高，患者临床过敏反应的可能性就越大.总IgEELISA:结果解释特异性IgE总IgE特异性IgE5IU/ml(kU/l)总IgE200IU/ml患者1特异性IgE5IU/ml(kU/l)总IgE25IU/ml患者2总IgEE

7、LISA:结果解释举例实验操作简单快捷低检出限(1IU/ml)高重复性(批内实验:5%)通过4份标准品计算定量结果检测方法产品编码产品名称ELISAEV3840E总IgE检测试剂盒总IgEELISA检测特异性IgE检测简便和快捷的实验操作仅需少量样本(过夜温育)结果基于广泛应用的EAST分级系统与PharmaciaCAP具有良好的相关性自动温育通过EUROLineScan程序实现结果的自动判读颜色反应色原底物膜条抗原提取物60min二抗反应10min底物温育AP标记二抗AKP清洗3x5min清洗3x5mi

8、n自动化判读或肉眼观察60min未稀释过夜1:11稀释特异性IgEEUROLINE血清温育温育EUROLINE检测系统结果判读:EUROLineScan特异性IgE欧蒙印迹法自动化CCD是“CrossreactiveCarbohydrateDeterminants（交叉反应性碳水化合物决定子）”的英文缩写.该结构为结合于糖蛋白N末端的多聚糖。依据糖基化作用的不同而产生不同的结构。与总IgE相关的特异性IgE浓度越高，患者临床