血细胞分析仪与临床应用资料知识讲解.ppt

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1、血细胞分析仪与临床应用资料公司创办人贝克曼仪器公司始创于1935年Dr.ArnoldO.Beckman库尔特电子公司始创于1958年WallaceH.&JosephR.Coulter库尔特先生(1913-1998)“ScienceServingHumanity”(科学服务人类)库尔特原理发明者，早期单克隆抗体研究者直至1998年，曾获6项美国科学荣誉，及多项发明专利主要服务对象生物研究诊断医疗大学研究所生物技术生化制药医院临床实验室私人实验室医疗所血细胞分析仪的发展史从库尔特公司的发展史开始…1947年，华莱士.库尔特先生发明库尔特原理；“当一个不良导体颗粒，例如血细胞，通

2、过两个电极之间时，导致电路的电阻抗发生变化。”-华莱士.库尔特，19471953年库尔特家族研制出全世界第一台血细胞计数仪：ModelA;现在，95%的血细胞分析仪采用库尔特原理；库尔特原理三要素：小孔、负压、电极检测：细胞大小和数量负压血细胞悬液外电极内电极小孔小孔管小孔电流样品杯小孔近观在等渗电解质溶液（稀释液）中，有一个用于细胞计数的小孔管，其内侧充满了稀释液，并有一个内电极，其外侧细胞悬液中有个外电极，小孔两侧的电极之间有稳定的电流。细胞为相对不良导体，其导电性质比稀释液低，当有个细胞通过小孔，于瞬间引起了电压变化而出现脉冲信号，脉冲的数量与细胞的数量成正比，高度与

3、细胞体积成正比。脉冲信号经放大，阈值调节，甄别，整形后，送入计数系统进行处理，得出被测细胞的数量和体积分布直方图。检测区域红细胞红细胞通过小孔库尔特原理Oscilloscope示波镜检测区域白细胞白细胞通过小孔库尔特原理示波镜库尔特技术高频度分析-直方图直方图-X轴：体积（fL）-Y轴：相对数量通道划分RBC直方图：36-360fLPLT直方图：2-20fLWBC直方图：35-450fL脉冲编辑（专利技术）作用：删除不规则脉冲对体积测量的影响。重叠校正（专利技术）小孔近观作用：纠正因重叠而导致的对颗粒计数和体积测量的影响。三次计数/延长计数血小板计数以三次拟合的均值为依据；对

4、血小板浓度小于67X109/L的标本，仪器自动延长1-2个三次计数。三次计数：统计补偿；监控计数过程的稳定性。延长计数：针对低浓度的标本。扫流技术(专利技术)测试区域红细胞回流示波镜红细胞血小板+-测试区域红细胞被扫流液冲走示波镜RBCPLT+-扫流液扫流技术(专利技术)扫流技术(专利技术)作用：防止红细胞回流对血小板计数的干扰；防止细胞再度进入感应区被两次计数。拟合曲线（专利技术）在血小板的直方图上可见两条曲线：一条是2fl-20fl的原始数据曲线;另一条是0fl-70fl的拟合曲线.由最小平方回归法定义出一条对数正态曲线，即拟合曲线；拟合曲线血小板计数的干扰主要来自:2f

5、l以下：噪音;细菌的干扰20fl以上：裂红细胞;小红细胞;白细胞的干扰拟合曲线的作用对曲线下的面积进行积分计算；将该面积值校准到参考的PLT计数；获得与参考方法最具相关性的血小板数值.在0-70fL范围的非血小板脉冲被拟合曲线排除于血小板计数之外；大大增加了血小板的线性范围(0-1,500,000)燃烧电路（专利技术）作用：预防蛋白堆积于计数孔；取消小孔的日常保养程序。酶清洁剂（专利配方）操作：每24小时浸泡0.5小时。作用：令仪器的流式通道、计数池、分血片、和血红蛋白检测室保持洁净性。图示：计数孔在用CLENZ清洁剂浸泡前后的洁净度比较。自我清洁的分血片库尔特另一个免日常保

6、养的关键部件是专利的、是具自我清洁功能的分血片。库尔特CBC分析技术计数和体积分析的技术脉冲编辑重叠校正三次计数/延长计数高频度分析血小板分析的技术扫流技术拟合曲线三次计数/延长计数免日常保养的技术燃烧电路酶清洁剂自我清洁的分血片其他技术白细胞分类原理三分类原理：库尔特直方图分类五分类原理：VCS三维分析原理从三分类到五分类三分类：淋巴细胞单核细胞粒细胞中性粒细胞嗜酸细胞嗜碱细胞五分类：淋巴细胞单核细胞中性粒细胞嗜酸细胞嗜碱细胞在进行白细胞分析时,,由于白细胞计数池中除加入一定量的稀释液外还加入了溶血剂,此溶血剂一方面使红细胞溶解,另一方面使白细胞质经胞膜渗出,胞膜紧裹在细胞

7、核或存在的颗粒周围,使白细胞成为”膜包核”.仪器将体积在35-450fl的这种颗粒认定为白细胞,并根据其体积大小在直方图上从左至右初步确认其相应的三个细胞群.在正常白细胞直方图上,小细胞群是位于左侧又高又陡的峰,分布在35-90fl,以成熟淋巴细胞为主要特征细胞,大细胞群是位于右侧较低且分布宽的峰,跨越160-450fl,以中性粒细胞为主要特征细胞,位于大、小细胞群之间的较平坦的区域，分布在90-160fl，是单个核细胞，也称为中间细胞，以单核细胞为主要特征细胞。淋巴细胞单核细胞粒细胞仪器根据各细胞群占