植物生理学实验报告.docx

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1、植物生理学实验报告1、愈创木酚法测定过氧化物酶活性2、可溶性蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝G-250法）姓名：周杨班级：资环14-1学号：愈创木酚法测定过氧化物酶活性一、实验目的过氧化物酶它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活性可以反映某一时期植物体内代谢的变化。通过本实验了解过氧化物酶的作用，掌握愈创木酚法测定过氧化物酶。二、实验原理在过氧化物酶（POD）催化下，H2O2将愈创木酚氧化成茶褐色产物。此产物在470nm处有最大光吸收值，故可通过测470nm下的吸光度

2、变化测定过氧化物酶的活性。三、实验材料马铃薯块茎。四、设备与试剂分光光度计，离心机，研钵，容量瓶，量筒，试管，吸管。100mmol/L的磷酸缓冲液（pH6.0）；愈创木酚溶液；30％H2O2；20mmol/LKH2PO4五、实验步骤六、实验结果酶活力=[(A1-A2)/(t2-t1)x0.01]xD=[(1.977-0.874)/10x0.01]x25=0.酶的比活力=酶活力/样品重或样品中蛋白质的含量=0./1=0.实验分析研磨时若未加入缓冲液或加入不及时会造成部分酶失活，从而造成结果偏小。向比色杯中加

3、液时过满，会造成液体溢出，同时不方便混匀。可溶性蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝G-250法）一、目的：植物组织中的蛋白质有结构蛋白与可溶性蛋白，酶蛋白多位可溶性蛋白测定可溶性蛋白含量在计算酶比活力和研究植物氮代谢中是十分重要的。二、实验原理：可溶性蛋白质与考马斯亮蓝G-250反应生成青色产物，在595nm波长有最大吸收峰，其颜色深浅与可溶性蛋白含量成正相关，可用分光光度法测定可溶性蛋白的含量。三、材料：植物材料提取液、伤流液等、分光光度计、10ml刻度试管、移液管四、操作方法：五、实验结果蛋白质浓度(ug/

4、ml)0246810样品A5950.0000.1940.3700.4860.5660.7030.961从标准曲线上查得样品的蛋白质浓度c=13.76ug/mL蛋白质含量（%）=〔(13.76ug/mL×1mL×25)/1.0312g×106〕×100％=0.03％六、结果分析标准曲线的精确度偏低，可能是因为测定吸光度时比色皿未洗干净。