植物细胞渗透势的测定.doc

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1、实验一植物细胞水势（或渗透势）的测定（质壁分离法）一实验目的学会用质壁分离法测量植物细胞水势。二器材与试剂1实验仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、移液管（10ml），培养皿2实验试剂：蔗糖溶液（1mol/L）3实验材料：洋葱三实验原理植物细胞是一个渗透系统，若将植物细胞放在各种不同浓度的蔗糖溶液中时，由于细胞液的浓度与外界溶液的浓度（或水势）的差异。两者便会发生水分的交换。当细胞液的浓度高于外溶液的浓度（或者说ψscell<ψssol即ψwcell<ψwsol）时，细胞则吸水，使细胞处于紧张状态；当细胞液的浓度低于外溶液的浓度时，（或者说ψscell>ψssol即

2、ψwcell>ψwsol）时，细胞液中的水分则往外渗透，严重时则引起质壁分离；当细胞液的浓度与外界溶液的浓度相等时，（或者说ψscell=ψssol即ψwcell=ψwsol）.细胞内外水分交换处于动态平衡。此时细胞既不紧张也不引起质壁分离，这时外溶液的浓度即为等渗浓度（即细胞内外ψs或ψw相等的浓度）。本实验是以细胞的初始质壁分离（即一视野中有半数细胞产生初始质壁分离）确定为等渗浓度。根据公式，即可计算出外溶液的ψs，即ψs=-CiRT[i:离解系数，蔗糖等于1;c:等渗浓度；R：气体常数，0.0083MPa·L/mol·K；T表示绝对温度，即273+t（实验时溶液的温

3、度）]。因为ψssol=ψwsol,又因为细胞初始质壁分离时，ψpcell=0,即ψwcell=ψscell,所以ψwcell(或ψscell)=ψwsol(或ψssol).四方法步骤1．按十字交叉法把1mol/L蔗糖溶液（母液）分别配成0.1、0.2、0.3、0.5、0.6mol/L蔗糖溶液各10ml。置于培养皿中，摇匀加盖。2．撕取带有色素的植物组织（如花瓣、洋葱鳞片等）表皮，分别投入各种浓度的蔗糖液中，（每浓度约放5片），使其完全浸入。3．20分钟之后依次取出表皮放在载玻片上，滴上同样浓度的溶液1滴，盖上盖玻片，在显微镜下观察细胞产生质壁分离的情况，确定等渗浓度C。

4、4．测量液温5．根据公式ψs=-CiRT,计算出所测材料的ψw(ψs).五实验报告试比较洋葱和大红花花瓣水势的高低。